陈茵
- 作品数:7 被引量:52H指数:4
- 供职机构:上海第二医科大学更多>>
- 发文基金:上海市科技兴农重点攻关项目上海市科学技术委员会资助项目上海市科委科技攻关项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 猪体细胞核移植重构胚的体外发育(英文)被引量:5
- 2002年
- 以卵丘细胞为核供体细胞组成重构胚 ,卵裂率达到 5 6.7% ,发育至桑椹胚率达到1 1 .7% ,囊胚率为 6.7% ,显著高于成纤维细胞重构胚 (P <0 .0 5 )。本文还研究了卵母细胞的采集方法、激活程序和卵龄对卵丘细胞核移植重构胚体外发育的影响。以血清饥饿法将卵丘细胞诱导至G0 G1 期 ,抽吸法 解剖法采集卵母细胞 ,体外培养 3 3~ 44h ,将卵丘细胞放至去核卵母细胞的卵周隙中 ,重构胚以钙离子载体A2 3 81 7或电脉冲结合 6 DMAP激活处理 ,体外培养 6d。研究表明 ,卵母细胞采集方法、激活液中细胞松弛素 (CB)、激活程序并不影响重构胚的发育 (以卵龄 44h的卵母细胞为受体 ) ;而以电脉冲结合 6 DMAP激活处理能提高重构胚发育能力 (以卵龄 3 3h的卵母细胞为受体 ) (P <0 .0 5 )。本研究显示 ,以电脉冲结合 6 DMAP激活卵丘细胞重构胚 。
- 张德福王英陈茵陈茵王凯LIN Cai-lu
- 关键词:体细胞核移植重构胚体外发育
- 猪体细胞核移植重构胚的体外发育研究(英文)
- <正> 以卵丘细胞为核供体细胞组成重构胚,卵裂率达到56.7%,发育至桑椹胚达11.7%、囊胚率为6.7%,显著高于成纤维细胞重构胚(p<0.05)。本文还研究了卵母细胞的采集方法、激活程序和卵龄对卵丘细胞核移植重构胚体...
- 张德福王英陈茵王凯Karl SchellandeTLin Cailu
- 文献传递
- 体细胞的组织来源及培养代数对猪核移植重构胚发育的影响被引量:6
- 2006年
- 本研究系统探讨了体细胞的组织来源及培养代数对猪核移植重构胚发育的影响。体外成熟培养40-44h的猪卵母细胞去核后,将经血清饥饿(0.5%FBs)培养2-9d、0.1mg/L Aphidicolin (APD)培养+0.5%FBS培养2-9d或一般培养法(10%FBS)培养的卵丘细胞、颗粒细胞、输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞,直接注射到去核的卵母细胞质中,或注射到卵周隙中。再经电融合(100V/mm,30μs,电脉冲1次)构建重构胚。重构胚以钙离子载体A23817或电脉冲结合6- DMAP激活处理,体外培养6天。耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经0.1mg/L APD+0.5%FBS培养处理后的重组胚卵裂率,均高于血清饥饿和一般培养处理的同种供体细胞(P<0.01)。卵丘细胞、颗粒细胞经0.1mg/L APD+0.5%FBS处理后进行核移植的分裂率和发育率均高于输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞(P<0.05)。以猪颗粒细胞为核供体时,电融合法的重构胚分裂率显著高于胞质内注入法(P<0.05),但囊胚发育率无显著差异(P>0.05)。培养3代和6代的猪颗粒细胞以及培养6代和10代的耳皮成纤维细胞,其具有正常二倍染色体的细胞比例均无显著差异(P>0.05);以这2种细胞不同培养代数做供体进行核移植时,各代之间核移胚的体外分裂率、囊胚发育率无显著差异(P>0.05)。这些结果表明:(1)猪耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经培养传代所建立起来的细胞系相对比较稳定;(2)0.1mg/L APD预培养处理供体细胞能提高猪体细胞核移植的效果,血清饥饿培养则无明显效果;(3)猪颗粒细胞和耳皮成纤维细胞等均可做供核细胞.核移植后都能得到体细胞克隆的囊胚,但前者的效果略优于后者,且其核移植效果不受供核细胞培养代数的影响;(4)电融合核移植胚胎的发育率高于胞质内直接注入法,但两者的总体效率相近。
- 张德福刘东汤琳琳王英陈茵王凯Karl SchellanderLIN Cai Lu
- 关键词:体细胞核移植细胞周期
- 不同供体细胞及其处理对猪核移植重构胚体外发育的影响被引量:24
- 2007年
- 系统探讨了体细胞的组织来源及培养代数对猪核移植重构胚发育的影响。体外成熟培养40~44h的猪卵母细胞去核后,将经血清饥饿(0.5%FBS)培养2~9天、0.1mg/L Aphidicolin(APD)培养+0.5%FBS培养2~9天或一般培养法(10%FBS)培养的卵丘细胞、颗粒细胞、输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞,直接注射到去核的卵母细胞质中,或注射到卵周隙中,再经电融合(100V/mm,30μs,电脉冲1次)构建重构胚.重构胚以钙离子载体A23817或电脉冲结合6.DMAP激活处理,体外培养6天。耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经0.1mg/LAPD+0.5%FBS培养处理后的重组胚卵裂率,均高于血清饥饿和一般培养处理的同种供体细胞(P〈0.01)。卵丘细胞、颗粒细胞经0.1mg/LAPD+0.5%FBS处理后进行核移植的分裂率和发育率均高于输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞(P〈0.05)。以猪颗粒细胞为核供体时,电融合法的重构胚分裂率显著高于胞质内注入法(P〈0.05),但囊胚发育率无显著差异(P〉0.05)。培养3代和6代的猪颗粒细胞以及培养6代和10代的耳皮成纤维细胞,其具有正常二倍染色体的细胞比例均无显著差异(P〉0.05);以这2种细胞不同培养代数做供体进行核移植时,各代之间核移胚的体外分裂率、囊胚发育率无显著差异(P〉0.05)。这些结果表明:(1)猪耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经培养传代所建立起来的细胞系相对比较稳定;(2)0.1mg/LAPD预培养处理供体细胞能提高猪体细胞核移植的效果,血清饥饿培养则无明显效果;(3)猪颗粒细胞和耳皮成纤维细胞等均可做供核细胞,核移植后都能得到体细胞克隆的囊胚,但前者的效果略优于后者,且其核移植效果不受供核细胞培养代数的影响;(4)电融合核移植胚胎的发育率高于胞质内直接注入法,但�
- 张德福刘东汤琳琳王英陈茵王凯王根林KARL SchellanderLIN Cailu
- 关键词:体细胞核移植细胞周期
- 影响猪体细胞核移植重构胚体外发育的若干因素被引量:20
- 2003年
- 以卵丘细胞为核供体细胞组成重构胚,卵裂率达到56.7%,发育至桑椹胚达11.7%、孵化囊胚率为6.7%,显著高于成纤维细胞组成的重构胚(p<0.05)。我们研究了卵母细胞的采集方法,激活方法和卵龄对卵丘细胞核移植重构胚体外发育的影响。以血清饥饿法将卵丘细胞诱导至GO或G1期,抽吸法/解剖法采集卵母细胞,体外培养33或44 h,将卵丘细胞置于去核卵母细胞的卵周隙中,重构胚以钙离子载体A23817或电脉冲结合6-DMAP激活处理,体外培养6天,结果表明,卵母细胞采集方法、激活液中细胞松弛素(CB)并不影响重构胚的发育(以卵龄44h的卵母细胞为受体);而以电脉冲结合6-DMAP激活处理能提高重构胚发育能力(以卵龄33 h的卵母细胞为受体)(p<0.05)。本研究显示,以电脉冲结合6-DMAP激活卵丘细胞重构胚。
- 张德福王英陈茵王凯KarlSchellanderLinCailu
- 关键词:体细胞核移植重构胚体外发育
- 猪体细胞核移植胚的体外发育及其影响因素
- 2002年
- 张德福王英陈茵王凯Karl SchellanderLin Cai lu
- 关键词:体外发育影响因素
- 应用电脉冲刺激激活猪卵母细胞的研究被引量:3
- 2002年
- 张德福王英陈茵王凯Karl SchellanderLin Cai lu
- 关键词:猪卵母细胞