高鑫
- 作品数：10 被引量：21H指数：3
- 供职机构：苏州大学医学部基础医学与生物科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海外及港澳学者合作研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Tim-3分子在非小细胞肺癌浸润淋巴细胞上的表达及其生物学功能的初步研究
- 2002年发现的Tim-3分子是T细胞免疫球蛋白粘蛋白(Tim)家族的成员，被证实为表达于Th1细胞而不表达于Th2细胞的一个免疫分子。由301个氨基酸组成，属于Ⅰ型膜蛋白，结构上包括一个Ig样V区的N-端(富含半胱氨酸...
- 高鑫
- 关键词：真核表达基因转染非小细胞肺癌淋巴细胞
- 文献传递
- 基因转染表达小鼠白细胞介素-33及其抗肿瘤机制研究被引量：3
- 2015年
- 目的 建立分泌小鼠白细胞介素-33（IL-33）的基因转染细胞株,分析其特性并探讨IL-33在肿瘤微环境中的抗肿瘤作用.方法 构建含有人CD8信号肽基因序列的IL-33融合基因,经BamH I和EcoR I双酶切后插入pCDEF3真核表达载体构建成为pCDEF3-IL-33重组子,采用脂质体法以重组质粒pCDEF3-IL-33和空质粒pCDEF3分别转染小鼠乳腺癌细胞株4T1,经G418长期加压筛选后,使用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测基因转染细胞株培养上清中小鼠IL-33的分泌和IL-33体外对效应性CD8^＋T细胞干扰素（IFN）-γ的分泌;活细胞计数和羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）掺入法检测基因转染细胞生长与增殖的均一性.结果 基因转染细胞4T1-pCDEF3-IL-33能稳定分泌小鼠IL-33分子,其培养上清中的表达量为28 μg/L;与4T1及转染了空质粒pCDEF3的4T1-vec比较,其生长和增殖差异无统计学意义（P＞0.05）;体外刺激试验表明,IL-33能显著地促进效应性CD8^＋T细胞分泌IFN-γ,对照组为125 μg/L,实验组为300μg/L,差异有统计学意义（P＜0.05）;体内实验研究表明,分泌于肿瘤微环境中的IL-33能显著抑制肿瘤的生长和转移,第30天时肿瘤直径对照组为（18.0±2.5） mm,实验组为（6.5±0.9）mm,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 建立了稳定分泌小鼠IL-33的基因转染细胞株,微环境中的IL-33对肿瘤具有显著的抑制作用.
- 文雯吕全省李刚高鑫张学光蒋敬庭王雪峰朱一蓓卢斌峰
- 关键词：白细胞介素-33肿瘤微环境干扰素
- 人Tim-3基因克隆及其转基因细胞的构建
- 2011年
- 目的克隆人Tim-3基因,并构建含有该目的基因的重组真核表达载体,获得稳定表达人Tim-3分子的L929基因转染细胞。方法采用RT-PCR方法从人外周血T淋巴细胞中克隆出Tim-3基因,通过双酶切(XhoI,Sa-lI)装入真核表达载体pIRES2-EGFP中,脂质体法转染L929细胞,72 h后加入G418进行筛选,挑选出能稳定表达Tim-3蛋白的L929细胞株。结果构建了用于表达的含Tim-3基因的重组真核表达载体,经脂质体转染L929细胞,继而经RT-PCR和流式细胞术表型检测,筛选出稳定表达人Tim-3蛋白的L929转基因细胞。结论构建了含人Tim-3基因重组真核表达载体和稳定表达人Tim-3蛋白的细胞株,为该基因功能的后续研究和单克隆抗体的研制奠定了基础。
- 高鑫李刚陈慧汪家敏张光波卢斌峰张学光
- 关键词：TIM-3基因基因转染真核表达T细胞
- 4NQO诱发C57BL/6小鼠舌癌及食管鳞状细胞癌模型的建立被引量：8
- 2010年
- 目的为探讨化学诱导舌癌和食管癌的作用及可能机制,利用化学致癌剂4硝基喹啉1氧化物(4NQO)建立C57BL/6小鼠的舌癌和食管癌模型。方法 100μg/ml、50μg/ml、10μg/ml的4NQO通过饮水法作用于C57BL/6小鼠,实验期间通过肉眼和组织学观察病变过程。结果随着摄入4NQO浓度的增加,小鼠在同一时期的发病率也随之增加,病变加重,同时随着服用时间的延长,病情逐渐加剧。在实验过程中,可以观察到舌和食管的病变经历了单纯性上皮增生—异常增生—原位癌—浸润性癌这样一个经典的鳞状上皮细胞癌的病变过程。当服用100μg/ml4NQO16周,到第28周时可观察到浸润性癌的病理症状。结论采用4NQO饮水法成功建立了C57BL/6小鼠舌癌和食管癌动物模型,为研究口腔鳞状上皮细胞癌和食管鳞状上皮细胞癌提供了有价值的动物模型。
- 陈慧高鑫李刚王凤鸣孙静刘柳卢斌峰张学光
- 关键词：舌癌食管鳞状细胞癌C57BL/6小鼠动物模型
- 大鼠呼吸黏膜外胚间充质干细胞与骨髓间充质干细胞生物学特性及成神经分化能力的比较
- 目的: 1、鉴定大鼠鼻中隔呼吸粘膜是否存在外胚层呼吸粘膜间充质干细胞。 2、比较大鼠外胚层来源的呼吸粘膜间充质干细胞与中胚层来源的骨髓间充质干细胞体外生物学特性及成神经分化的能力。 方法: 1、自Sprague-...
- 高鑫
- 关键词：骨髓间充质干细胞外胚间充质干细胞生物学特性神经分化
- 文献传递
- 负性免疫分子TIM-3和细胞因子IL-33在T细胞介导的肿瘤免疫中的作用及机制
- 高鑫
- 关键词：TIM-3
- 文献传递
- 人白细胞介素-22的克隆及原核表达被引量：1
- 2010年
- 目的克隆hIL-22成熟链基因并在大肠杆菌表达体系中进行有效表达。方法采用反转录PCR以及巢式PCR的方法克隆得到hIL-22基因。将hIL-22基因装入PQE3.0载体构建重组载体hIL-22/PQE3.0,继而转化宿主工程菌株M15。经异丙基B-D硫代半乳糖苷诱导表达产生hIL-22/His重组蛋白并纯化。重组蛋白经电泳分析和Westernblot验证。结果成功地克隆和构建了hIL-22/PQE3.0载体,转化的工程菌经过诱导表达18kd的hIL-22成熟链,利用亲和层析得到了纯化的重组蛋白。结论成功获得hIL-22/His重组蛋白,为下一步研究人IL-22在肿瘤细胞中的作用奠定了物质基础。
- 李刚高鑫陈慧王凤鸣卢斌峰张学光
- 关键词：重组蛋白原核表达
- 非小细胞肺癌组织浸润B7-H3+HLA-DR-CD14+MDSC表达特征、临床意义以及生物学功能研究
- 髓系来源的抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)是一群表型异质细胞群,在肿瘤免疫逃逸中发挥了重要作用。本研究收集手术切除的非小细胞肺癌癌灶部位、癌远端组织标本以及对应外...
- 张光波黄海涛高鑫孙海红张学光
- 关键词：MDSCB7-H3TREG
- 文献传递
- 人可溶性B7-H3酶联试剂盒的研制及在肝病患者血清中水平的检测被引量：8
- 2012年
- 目的:建立定量检测人的可溶性B7-H3(sB7-H3)酶联检测试剂盒,并分析肝病患者外周血中sB7-H3水平及其临床意义。方法:在已获得2株识别位点不同的小鼠抗人B7-H3单克隆抗体(4H7和2E6)基础上,采用单抗4H7为包被抗体,以经生物素标记的抗体2E6为检测抗体,以重组人可溶性B7-H3为标准品,建立可溶性B7-H3分子的酶标检测方法。在此基础上对健康献血者和不同肝病患者的血清样本进行了检测并分析其临床意义。结果:研制了sB7-H3酶联检测试剂盒,检测的线性范围是8.192～2 000 ng/L,批内、批间变异系数分别为3.35%和6.97%。酶标检测板在4℃放置1个月,变异系数(CV%)<±8.6,回收率为94%～117%,特异性试验显示无交叉反应,提示该检测试剂盒具有良好的灵敏度、稳定性和特异性。用该试剂盒分析不同肝病患者外周血sB7-H3水平后发现,(1)乙肝患者以及乙肝合并肝硬化或肝癌患者与健康对照组之间并不存在差异(P>0.05);(2)重症肝炎患者血清B7-H3水平低于健康对照组(P=0.0183);(3)血吸虫性肝硬化患者血清B7-H3水平显著高于健康对照组(P<0.01)。结论:建立了灵敏、特异的人sB7-H3酶联检测试剂盒,对肝病患者检测的结果表明,不同的肝病患者外周血sB7-H3表达水平不同,显示该试剂盒具有潜在的应用价值。
- 李淑湘张光波孙海洪高鑫张学光
- 关键词：ELISA肝病
- 非小细胞肺癌组织浸润B7-H3+HLA-DRCD14+MDSC表达特征、临床意义以及生物学功能研究
- 张光波黄海涛高鑫孙海红张学光
- 关键词：MDSCB7-H3TREG
