丁惠民
- 作品数：11 被引量：31H指数：2
- 供职机构：东南大学附属中大医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”江苏省“135”工程重点医学人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生语言文字更多>>
- 蛋白激酶C对肺微血管内皮通透性的影响被引量：2
- 2006年
- 早期急性呼吸窘迫综合征(ARDS)或急性肺损伤(ALI)是以肺毛细血管内皮细胞损伤和功能障碍导致水和蛋白向间质渗出增加为特点,而肺毛细血管内皮损伤后进一步损伤肺上皮细胞,导致肺损伤。引起肺血管内皮细胞损伤从而导致其通透性增加的因素很多,有活性氧物质(如过氧化氢H2O2),α-凝血酶,肿瘤坏死因子(TNF-α)等。蛋白激酶C(PKC)是介导其损伤作用的重要介质之一,但它们活化PKC的机制并不完全一样,PKC活化后引起血管内皮细胞损伤的机制也不尽相同。
- 丁惠民邱海波
- 关键词：蛋白激酶C血管内皮细胞通透性
- 血管紧张素Ⅱ对人肺微血管内皮细胞核因子-κB的活化作用被引量：1
- 2007年
- 目的探讨不同浓度血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在不同时间点对人肺微血管内皮细胞(HPMEC)核因子-κB(NF-κB)的活化作用。方法采用原代培养的HPMEC,分别以浓度为10-8、10-7、10-6、10-5mol.L-1的AngⅡ刺激HPMEC0、0.5、1、2、4 h,用凝胶电泳迁移率实验(EMSA)观察NF-κB对DNA的结合活性。结果各浓度组AngⅡ均能活化HPMEC中NF-κB;与0 h比较,AngⅡ10-8mol.L-1组在4 h表现出明显的NF-κB活化作用(P<0.05),AngⅡ10-7mol.L-1组在1 h开始活化NF-κB(P<0.05),随后各时间点的效应逐渐增强;AngⅡ10-6mol.L-1组在1 h开始活化NF-κB(与0 h比较,P<0.05),2 h时达到高峰(与1 h比较,P<0.05),4 h活化水平下降(与2 h比较,P<0.05);AngⅡ10-5mol.L-1组在0.5 h即明显活化NF-κB(与0 h比较,P<0.05),随后各时间点NF-κB活化效应逐渐减弱。结论AngⅡ刺激HPMEC后能引起NF-κB活性增加,这可能是AngⅡ促炎作用的重要环节。
- 王连邱海波杨毅丁惠民刘玲李红鹏
- 关键词：人肺微血管内皮细胞核因子-ΚB
- 血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ 1型受体途径在介导大鼠肺部炎症反应中的作用
- 目的：探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)-血管紧张素Ⅱ1型受体(ATR1)途径在介导大鼠肺部炎症反应和急性肺损伤中的作用。
方法：清洁级SD大鼠24只，随机分为4组：①对照组：持续皮下注射与AngⅡ等体积的生理盐水7...
- 刘玲邱海波杨毅丁惠民王连
- 关键词：肺部炎症反应急性肺损伤
- 文献传递
- 血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1型受体途径在介导大鼠肺部炎症反应中的作用被引量：8
- 2007年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)-血管紧张素Ⅱ1型受体(ATR1)途径在介导大鼠肺部炎症反应和急性肺损伤中的作用。方法清洁级SD大鼠24只,随机分为对照组、AngⅡ组、AngⅡ+氯沙坦组和氯沙坦组。光镜观察肺组织病理改变并测定肺湿/干重比(W/D)。凝胶迁移率改变电泳(EMSA)测定肺组织核因子-κB(NF-κB)活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆血管性血友病因子(vWT)的含量,比色法测定髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量。结果AngⅡ可致肺泡间隔增宽、出血及大量炎性细胞浸润等急性肺损伤病理改变,氯沙坦可缓解由AngⅡ所致的肺组织病理损伤。AngⅡ组肺W/D、NF-κB活性、TNF-αmRNA表达、MPO、MDA及vWF含量均明显高于其余3组(P<0.05),对照组与AngⅡ+氯沙坦组和氯沙坦组的肺W/D、NF-κB活性、TNF-αmRNA表达、MPO、MDA及vWF含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论AngⅡ可激活肺部炎症反应并导致急性肺损伤,AngⅡ在肺部的促炎作用主要是通过其1型受体介导的。
- 刘玲邱海波杨毅丁惠民王连
- 关键词：炎症急性肺损伤
- AngⅡ通过经典途径及MEK途径对肺微血管内皮细胞NF-κB活化的实验研究
- 第一部分
目的:探讨血管紧张素II(AngII)对肺微血管内皮细胞(HPMEC)核因子-кB(NF-кB)的活性的影响,以及经典途径在AngII介导的NF-кB活化过程中的作用。
方法:本实验分为以下...
- 丁惠民
- 关键词：血管紧张素II肺微血管内皮细胞凝胶电泳DNA结合活性
- 文献传递
- 血管紧张素Ⅱ诱导人肺微血管内皮细胞核因子κB的活化作用
- 目的：探讨不同浓度血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)在不同时间点对人肺微血管内皮细胞(HPMEC)核因子-κB(NF-κB)的活化作用。方法：采用原代培养的HPMEC，以浓度为10-8、10-6、10-5mol·L-1的Ang-...
- 王连邱海波丁惠民刘玲李红鹏
- 关键词：急性肺损伤急性呼吸窘迫综合征微血管内皮细胞核因子ΚB活化作用
- 文献传递
- AngII通过经典途径及MEK途径对肺微血管内皮细胞NF-κB活化的实验研究
- 丁惠民
- 关键词：人肺微血管内皮细胞核因子-ΚB
- 单指示剂法测定ARDS犬血管外肺水的比较性研究
- 目的:比较单指示剂法与重力法测定不同急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型血管外肺水的差异,从而判断单指示剂法的准确性和局限性.方法:动物分为对照组、油酸静脉注射复制ARDS模型组(油酸组)、盐酸吸入复制ARDS模型组(盐酸...
- 沈菊芳邱海波杨毅刘松桥陈永铭李家琼吴彬丁惠民
- 关键词：急性呼吸窘迫综合征血管外肺水
- 文献传递
- 脂多糖刺激下的人肺微血管内皮细胞血管紧张素Ⅱ受体1放射受体分析法的建立被引量：1
- 2007年
- 目的建立一种脂多糖（LPS）刺激下人肺微血管内皮细胞（HPMEC）血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）1型受体（ATR1）与其配体AngⅡ结合的放射配体结合分析法（RLBA）。方法体外培养的HPMEC接种于24孔培养板,当细胞达到80%-90%融合,饥饿24 h后用浓度为100 ng/ml的LPS刺激8 h,用0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.62、.0 fmol 8个不同剂量的放射性配体125I-AngⅡ（TL表示其放射性）在板孔中与ATR1结合（存在或不存在5μg AngⅡ）,然后γ计数仪计数,测定ATR1的总结合（TB）与非特异性结合（NSB）,TL减去TB得游离放射配体（F）,TB减去NSB得ATR1的特异性结合（B）。由TB与TL作图得ATR1饱和曲线;由B/F与B作图得出Scatchart曲线。结果随放射性配体125I-AngⅡ加入量的增加,NSB也相应逐渐增加,且由直线相关与回归分析得到NSB与加入125I-AngⅡ剂量呈直线关系（r2=0.9929）;Scatchart作图得B/F与B也呈直线关系,其相关系数r2=0.9514。HPMEC上仅存在单一亲和力的AngⅡ受体,反应亲和力的Kd值为109 pmol/5×10^5细胞,从Scatchart曲线与X轴截距得到ATR1的最大结合位点Bmax为29 pmol/5×10^5细胞;ATR1饱和曲线分为两段,前段斜率较大,随125I-AngⅡ加入量的增加TB增加明显;后端曲线较为平坦,TB随125I-AngⅡ的增加变化不明显,125I-AngⅡ在1600 pmol/5×10^5细胞与2000 pmol/5×10^5细胞之间TB的增加与NBS增加基本相当,能使ATR1饱和的125I-AngⅡ剂量为1600 pmol/5×10^5细胞。结论本实验建立的RLBA方法能得到ATR1的Kd与Bmax两个基本参数,可用于LPS刺激下HPMEC的ATR1功能研究。
- 李红鹏邱海波许德义刘玲王连丁惠民杨毅周韶霞
- 关键词：人肺微血管内皮细胞脂多糖
- 血管紧张素-Ⅱ活化肺微血管内皮细胞核因子-κB的研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对肺微血管内皮细胞（HPMEC）核因子-κB（NF-κB）的活性的影响，以及经典途径在AngⅡ介导的NF-κB活化过程中的作用。方法本实验分为：AngⅡ组：10^-6mol／L AngⅡ分别刺激HPMEC0、0．5、1、2、4h；氯沙坦组：10^-6mol／L氯沙坦（AugⅡ1型受体阻滞剂）预先处理HPMEC1h，再予相同10^-6mol／L AugⅡ刺激细胞2h，提取胞浆蛋白和胞核蛋白。凝胶电泳迁移率分析实验（EMSA）观察细胞中NF-κB的DNA结合活性。Western印迹检测细胞浆中抑制因子κBα（IκBα）的含量。结果AugⅡ刺激HPMEC0．5h后细胞中NF-κB活性明显上升（144．5±16．1），在2h达到峰值（270．1±27．2），4h（215．1±17．8）较2h有所下降，但仍高于0h水平，以上各时间点与AngⅡ刺激细胞0h（100．0±25．1）相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。与AngⅡ刺激HPMEC 0h IκBα含量（44．4％±2．1％）相比，0．5h后IκBα含量即开始明显下降（38．9％±3．6％，P〈0．05），2h后IκBα含量下降最为明显（32．6％±2．3％，P〈0．05），4h细胞中IκBα含量较2h有所上升，但仍然明显低于AugⅡ刺激0h细胞中IκBα的含量（40．1％±4．7％，P〈0．05）。氯沙坦组NF-κB活性（115．4±10．7）和IκBα含量（43．6％±3．7％）与AugⅡ组0h相比无明显差异。氯沙坦组中NF-κB活性明显低于AngⅡ组2h，氯沙坦组中IκBα的含量亦明显高于AngⅡ组2h。结论AngⅡ能通过AT1介导HPMEC中NF-κB活化。经典途径参与了AugⅡ诱导的HPMEC中NF-κB活化过程。
- 丁惠民邱海波王连刘玲李红鹏
- 关键词：人肺微血管内皮细胞核因子-ΚB
