乔玲 作品数:10 被引量:59 H指数:5 供职机构: 南开大学生命科学学院生物活性材料教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 天津市科技发展战略研究计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
间充质干细胞抑制肿瘤细胞的作用及其信号途径的研究 本文对间充质干细胞抑制肿瘤细胞的作用及其信号途径进行了研究。主要内容如下:
①应用两种不同来源的间充质干细胞,分别为胎儿真皮来源的Z3间充质干细胞和胎儿骨髓来源的BMMS-03 间充质干细胞。取间充质干细胞的条... 乔玲关键词:癌细胞抑制 间充质干细胞 细胞生物学 文献传递 间充质干细胞释放Dkk-1抑制乳腺癌细胞Wnt/β-catenin途径的实验研究 被引量:18 2007年 研究表明,间充质干细胞具有向肿瘤细胞定向迁移并且抑制肿瘤细胞的特性,然而其分子机理目前尚不清楚.为了探讨间充质干细胞抑制肿瘤细胞作用的分子机制,应用BMMS-03人间充质干细胞的条件培养液作用于MCF-7乳腺癌细胞,通过软琼脂克隆形成实验、MTT实验、免疫印迹和免疫荧光染色等技术观察细胞克隆形成、增殖和基因表达的变化.结果显示:在BMMS-03细胞条件培养液作用下,MCF-7细胞的克隆形成和增殖受到了明显的抑制,β-catenin及其下游靶蛋白c-Myc、Bcl-2、PCNA和survivin的表达被明显下调,MCF-7细胞浆和细胞核内β-catenin的表达被明显抑制.BMMS-03细胞中Dkk-1的表达水平与MCF-7细胞相比较高.利用抗Dkk-1的抗体中和BMMS-03细胞条件培养液中的Dkk-1后,可明显拮抗BMMS-03细胞条件培养液对MCF-7细胞中β-catenin及c-Myc表达的抑制作用,基因转染使MCF-7细胞过表达Dkk-1后,MCF-7细胞的β-catenin及c-Myc的表达明显下调.同样经基因转染使BMMS-03细胞过表达Dkk-1后,其条件培养液可进一步下调MCF-7细胞β-catenin及c-Myc的表达.上述结果表明,间充质干细胞BMMS-03对乳腺癌MCF-7细胞的恶性表型具有明显抑制作用,其分子机制与间充质干细胞释放Dkk-1抑制乳腺癌细胞Wnt/β-catenin信号途径有关. 乔玲 徐治立 谭旭 叶丽虹 张晓东关键词:间充质干细胞 乳腺癌细胞 DKK-1 乙肝病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)增强肝癌细胞NF-κB转录活性的实验研究 被引量:11 2007年 前期研究结果表明,乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白(hepatitis B virus X-interacting protein,HBXIP)具有促进细胞增殖的作用.为了进一步阐明其分子机制,观察了HBXIP对核因子κB(NF-κB)转录活性的影响.实验中通过基因共转染将NF-κB报告基因质粒pNF-κB-Luc和HBXIP真核表达载体pcDNA3-hbxip导入人肝癌H7402细胞系中,进行荧光素酶活性分析.结果显示:H7402细胞过表达HBXIP后NF-κB的转录活性明显增强;此外,基因转染后经免疫印迹检测显示,与NF-κB二聚体结合的抑制亚基IκBα的磷酸化水平明显增加;同时,提取H7402细胞的核蛋白,然后应用免疫印迹检测细胞核中p65/NF-κB的水平.结果显示,H7402细胞中HBXIP过表达后细胞核中p65/NF-κB的水平明显增加.当应用RNA干扰技术抑制了细胞内源性的HBXIP基因表达后,则出现与上述结果相反的效果.上述结果提示,HBXIP可增加核内p65/NF-κB蛋白水平,进而发挥NF-κB促转录调控的作用.因此,HBXIP可通过调控NF-κB信号途径而促进细胞增殖. 王凤泽 沙丽 乔玲 吴莲英 张晓东 叶丽虹关键词:IΚBΑ 肝癌细胞 人间充质干细胞抑制肝癌细胞增殖的作用及其基因表达谱分析 被引量:10 2007年 干细胞移植治疗肿瘤具有重要的临床价值.应用人间充质干细胞条件培养液作用H7402肝癌细胞,拟探讨间充质干细胞对肿瘤细胞的抑制作用,为今后应用人间充质干细胞进行肿瘤细胞治疗奠定理论基础.应用胎儿真皮来源的Z3间充质干细胞和胎儿骨髓来源的BMMS-03间充质干细胞的条件培养液作用于H7402肝癌细胞,采用软琼脂克隆形成实验、流式细胞仪技术、基因芯片技术和免疫印迹技术观察H7402细胞的克隆形成、增殖和基因表达谱变化.结果显示,H7402细胞在间充质干细胞条件培养液作用下,克隆形成和增殖受到了明显抑制;基因芯片检测结果显示,H7402细胞在间充质干细胞条件培养液作用下有23个基因上调表达,17个基因下调表达,这些差异表达的基因与细胞的转录调控、新陈代谢、信号转导、细胞周期、应激反应和细胞粘附等功能相关.本实验结果表明,人间充质干细胞对H7402肝癌细胞的克隆形成和增殖具有抑制作用,并有多种基因的表达发生改变,这些基因表达的改变可能参与了对上述肿瘤细胞的抑制. 乔玲 赵铁军 山长亮 叶丽虹 张晓东关键词:间充质干细胞 肝癌细胞 克隆形成 增殖 基因表达 应用基因表达谱芯片从不同转移能力的乳腺癌细胞中筛选转移相关基因 被引量:12 2005年 人乳腺癌细胞系MCF-7及其转移亚克隆LM-MCF-7为肿瘤转移分子机制的研究提供了细胞模型.应用基因芯片技术比较两种具有不同转移能力细胞系基因表达谱的差异,寻找乳腺癌转移相关基因.提取两种细胞总RNA,分别用Cy5-dCTP、Cy3-dCTP标记LM-MCF-7和MCF-7的cDNA,并与含有21329个基因的芯片进行杂交并扫描,利用GenePixPro4.0图像分析软件处理数据判断基因是否在两个细胞中存在表达差异.经互换荧光标记物重复两次实验,共筛选出差异表达基因67个,其中41个在LM-MCF-7细胞中表达上调,26个在LM-MCF-7细胞中表达下调.应用实时定量RT-PCR对7个表达差异明显的基因进行了验证.生物信息学分析结果提示,上述发现的差异基因编码产物与细胞内信号转导、转录调节、应激反应、新陈代谢、发育、细胞运动、细胞凋亡和细胞粘连等功能有关.据文献报道,这些差异表达的基因中有35个与肿瘤有关,其中9个与乳腺癌转移有关,6个可能参与肿瘤浸润和转移过程.根据基因芯片检测的结果,从功能上对LM-MCF-7细胞和MCF-7细胞与细胞凋亡的关系进行了研究,发现具有高转移倾向的LM-MCF-7细胞与MCF-7细胞相比,抗凋亡能力较强.上述与肿瘤转移相关基因在肿瘤转移中的作用及其分子机理有待深入研究. 叶丽虹 尤嘉琮 乔玲 蔡娜 王长晔 刘毅 吴晶辉 吴莲英 王洪辉 张晓东关键词:基因芯片 基因表达谱 乳腺癌 乳腺癌转移中参与细胞黏附作用基因的分离及分离方法 本发明公开了一种高精确度、高通量筛选在乳腺癌转移中参与细胞黏附作用基因的分离方法。本发明方法通过建立具有高转移倾向的转移亚克隆LM-MCF-7细胞系与其亲本人乳腺癌细胞系MCF-7形成配对细胞系作为实验样本,不仅可随时无... 张晓东 叶丽虹 乔玲 尤嘉琮文献传递 人间充质干细胞抑制乳腺癌细胞增殖作用的实验研究 被引量:5 2007年 应用人间充质干细胞作用肿瘤细胞,拟揭示间充质干细胞对肿瘤细胞的作用,为今后应用人间充质干细胞进行肿瘤细胞治疗奠定理论基础.应用胎儿真皮来源的 Z3间充质干细胞和胎儿骨髓来源的 BMMS-03间充质干细胞的条件培养液作用于乳腺癌 MCF-7细胞,观察 MCF-7细胞增殖和迁移能力的变化.结果显示,应用 BrdU 掺入分析和流式细胞仪测定等方法发现,在间充质干细胞条件培养液的作用下,MCF-7细胞的增殖受到了明显抑制;应用划痕实验和琼脂糖滴实验发现,MCF-7细胞的迁移能力也受到明显抑制.结果表明,人间充质干细胞对乳腺癌细胞的增殖和迁移具有抑制作用。 乔玲 叶丽虹 张晓东关键词:间充质干细胞 乳腺癌细胞 增殖 迁移 人肝干细胞对肝癌细胞表型影响的初步研究 张晓东 叶丽虹 徐治立 乔玲 赵铁军 谭旭 蔡娜 一、体外培养和扩增人干细胞的研究:建立了体外培养和扩增人干细胞的技术平台,已获得胎儿骨髓间充质干细胞(BMMS-03)和脐带血干细胞。在应用流式细胞仪对干细胞标志物进行了生物学鉴定,结果显示,符合间充质干细胞特征;完成了...关键词:关键词:肝癌 肝干细胞 细胞表型 信号途径 乳腺癌转移中参与转录调节作用基因的分离及分离方法 本发明公开了一种高精确度、高通量筛选筛选乳腺癌转移中参与转录调节作用基因的分离方法。本发明方法通过建立具有高转移倾向的转移亚克隆LM-MCF-7细胞系与其亲本人乳腺癌细胞系MCF-7形成配对细胞系作为实验样本,不仅可随时... 叶丽虹 张晓东 尤嘉琮 乔玲 张宝珠文献传递 乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)对细胞周期的影响 被引量:5 2007年 乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白(hepatitis B virus X-interacting protein,HBXIP)可与乙肝病毒X蛋白(HBX)的C端结合,它具有抑制HBX活性的作用.为进一步阐明HBXIP对细胞增殖的作用及其分子机制,构建了HBXIP的真核表达载体,并将其稳定转染至正常人肝细胞系L-O2细胞中,建立了稳定表达HBXIP蛋白的肝细胞系,命名为L-O2-hbxip.然后,应用MTT、BrdU标记实验和流式细胞术等方法,发现HBXIP过表达后,L-O2细胞的生长速度明显加快,可促进细胞由G1期进入到S期,表明HBXIP具有促进L-O2-hbxip细胞增殖的作用.应用免疫印迹对有关细胞周期相关蛋白进行了检测.结果显示,HBXIP过表达时可上调细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白E的表达,并下调p21和p27的表达,从而调节细胞周期,产生对细胞增殖的影响. 王凤泽 吴莲英 乔玲 张晓东 叶丽虹关键词:细胞增殖 细胞周期 肝细胞