于淼
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：哈尔滨职业技术学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项黑龙江省杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 胰岛素受体底物1和2敲低对猪肝脏细胞糖脂代谢的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:通过shRNA干扰高效敲低猪肝脏细胞中IRS1和IRS2基因的表达,进而验证其对于糖脂代谢相关基因表达的影响,为构建2型糖尿病模型猪奠定基础。方法:首先通过重叠PCR方法克隆了猪IRS1基因全部的mRNA序列(4 814bp)以及通过3'RACE方法克隆了猪IRS2基因的部分3'非编码区(3-untranslated region,3'UTR)。然后,通过Real-time PCR筛选获得了能显著敲低这两个基因的shRNA片段,并在同时敲低IRS1和IRS2的猪肝脏细胞中,检测糖脂代谢相关基因的表达。结果:猪肝脏细胞中IRS1和IRS2的表达被显著敲低,分别下降了78%和64%。另外,糖异生作用酶磷酸烯醇丙酮酸激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)和果糖-1,6-二磷酸酶(fructose-1,6-bisphosphatase,F-1,6-BP)基因表达显著上升,并导致催化肝脏中糖酵解反应的葡糖激酶(glucokinase,Gck)基因表达的显著下降。同时,胆固醇调节元件结合蛋白(sterol regulatory element-binding proteins,SREBP-1)基因的表达也显著上升以及胆固醇调节基因Abcg8,CYP7a1表达明显上调。结论:猪肝脏细胞中IRS1和IRS2基因的敲低可激活糖异生作用,并抑制糖酵解反应,从而导致糖代谢的异常,同时也能引起脂类代谢的异常。
- 黄天晴孔庆然李妍于淼刘忠华
- 关键词：RNA干扰糖脂代谢
- 猪Slc22a18与Slc22a3的克隆及印迹表达分析
- 2014年
- 本试验通过鉴定候选印迹基因Slc22a18与Slc22a3,以丰富猪中已鉴定印迹基因的数量,为今后在猪中的印迹研究提供基础。本研究采用单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)直接测序法检测了猪Slc22a18与Slc22a3在16个组织器官中的印迹状态。首先,克隆得到657bp的Slc22a18cDNA序列及1 077bp的Slc22a3cDNA序列,然后进行SNP直接测序法检测。Slc22a18在1月龄仔猪的组织器官中为双等位基因表达,而在45d胎盘中为母源等位基因表达。Slc22a3的表达具有母源偏好性。实时定量PCR显示,Slc22a18在各组织器官中表达水平差异很大,在肝、肾和小肠中表达水平显著高于其他各组织,Slc22a3在各组织器官中广泛表达。上述结果表明,Slc22a18与Slc22a3在猪不同组织器官中存在印迹多态性,是猪母源表达的印迹基因。
- 周洋焦明霞吕嘉伟朱江于淼孔庆然刘忠华
- 关键词：SLC22A18印迹基因
