仇超
- 作品数：32 被引量：61H指数：5
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 中国HIV-1 CRF01_AE流行株结构基因和调节／辅助基因DNA疫苗的构建和免疫原性研究被引量：5
- 2010年
- 目的构建表达gag—env融合基因和tat-rev-integrase（c-half）-vif-nef融合基因的DNA疫苗，并评价其免疫原性。方法按人源密码子使用频率对AE2f株的gag、env、tat、rev、integrase、vif和nef基因序列进行优化，构建真核表达质粒。用Westernblot法验证体外表达情况；用ELISPOT法检测小鼠的细胞免疫反应。结果限制性酶切及DNA测序结果表明两个融合基因质粒构建正确，可以表达相应的融合蛋白。ELISPOT结果显示，Gag—Env特异性的T细胞反应强度为（3010±566）SFC／10^6脾细胞；Tat-Rev—Integrase（C．half）-Vif-Nef融合蛋白特异性的T细胞反应为（948±737）SFC／10^6脾细胞，均显著高于空载体组。结论构建的表达HIV-1CRF01_AE流行株gag—env融合基因和tat—rev-integrase（c-half）-vif-nef融合基因的DNA疫苗可以正确表达所编码的融合蛋白并有效地激活机体的T细胞免疫反应。
- 袁松华万延民仇超张聪优黄杨乔勇叶芮琪邱趁丽张晓燕徐建青
- 关键词：HIV-1艾滋病疫苗结构基因调节基因
- 全反式维甲酸对TGF-β体外诱导大鼠Foxp3^+Treg分化的作用被引量：3
- 2010年
- 目的探索TGF-β、全反式维甲酸及IL-2在大鼠初始T细胞向Foxp3+T细胞分化中的作用。方法分选Lewis大鼠脾脏CD4+CD25-初始T细胞,在抗CD3和CD28抗体激活下,分别用TGF-β、IL-2及全反式维甲酸诱导,通过流式细胞仪检测细胞表面CD25及胞内Foxp3的表达。并提取细胞mRNA通过逆转录PCR检测Treg功能相关基因的表达。结果 TGF-β在体外能诱导大鼠CD4+CD25-初始T细胞分化为CD4+CD25+Foxp3+T细胞,而IL-2或全反式维甲酸的单独作用不能诱导Foxp3表达。IL-2与全反式维甲酸能增强TGF-β诱导Foxp3表达的作用,在TGF-β、IL-2及全反式维甲酸的共同作用下,诱导的Foxp3+T细胞比例提高。TGF-β诱导的Foxp3+T细胞较高表达IL-10、CTLA-4等调节性T细胞功能相关基因。结论 TGF-β在体外能诱导大鼠CD4+CD25-初始T细胞分化为CD4+CD25+Foxp3+T细胞,IL-2与全反式维甲酸能增强这一作用。
- 史乾邱趁丽兰琴曹浩刘建仇超徐建青范慧敏刘中民
- 关键词：调节性T细胞全反式维甲酸FOXP3TGF-Β
- PEG接枝PDMAEMA作为DNA疫苗载体的研究
- DNA载体主要分为两类：一种是病毒载体，另一种是非病毒载体。目前，病毒类载体依然是最有效的一类载体。但是病毒载体本身存在许多不足，主要体现在免疫原性高、靶向特异性差、制备较复杂、费用较高及安全性顾虑等方面。病毒载体在DN...
- 乔勇董岸杰岳鑫业邢金峰徐建青黄杨仇超万延民张聪优袁松华邓联东
- 关键词：DNA疫苗
- 文献传递网络资源链接
- 细胞膜锚定蛋白LY6E对T细胞活化及HIV-1感染的相关研究
- 2015年
- 淋巴细胞抗原6复合体E(LY6E)是细胞膜表面的糖基磷脂酰肌醇(glycosylphophatidylionositol,GPI)锚定蛋白,对T细胞功能的影响以及在HIV-1感染中起到的作用并不明确.本实验构建了LY6E过表达的Jurkat稳定细胞系Jurkat-LY6E,并用anti-CD3和anti-CD28抗体刺激该细胞系活化后检测相应细胞因子表达,实验结果表明,LY6E过表达的Jurkat细胞系产生白介素-2(interleukin-2,IL-2)的水平要明显高于对照细胞系Jurkat-p WPI;而利用HIV-1假病毒感染Jurkat细胞,结果表明LY6E并未对HIV-1复制产生明显影响.综上所述,LY6E分子可以促进T细胞活化,但并不能影响HIV-1假病毒在T细胞中的感染复制过程.
- 许璇仇超徐建青乔文涛李悦
- 关键词：JURKATT细胞活化HIV-1
- HIV-1感染者中全血miRNA表达谱的变化被引量：4
- 2013年
- 初步了解HIV-1感染者全血中miRNA表达谱的变化。使用Taqman低密度miRNA表达谱芯片,分别检测10例HIV-1感染者和10例未感染者全血样本中754条miRNA的表达情况。通过BRB分析软件对样本中miR-NAs的表达情况进行比较,筛选出差异表达的miRNA。使用DIANA在线工具预测差异表达miRNAs的靶基因和细胞功能。筛选结果显示有56条miRNAs显著差异表达(P<0.001),其中有49条miRNAs在感染者中下调,7条miRNAs的表达上调。差异表达miRNAs的靶基因涉及的生物学功能相对集中,主要富集在MAPK、TGF-be-ta、Wnt等信号通路。提示:HIV-1感染引起全血中部分miRNAs表达情况的改变。56条显著差异表达的miRNA可能有着重要的作用,对这些miRNA的进一步研究有望发现新的与致病机制相关的关键分子和HIV-1感染诊断潜在的标志物。
- 朱凌燕仇超吕建新徐建青
- 关键词：HIV-1MIRNA信号通路
- 山西省1996-2013年HIV/AIDS病人的病死率及影响因素的研究被引量：6
- 2015年
- 目的探索艾滋病病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)病人(简称HIV/AIDS病人)的病死率和影响因素,以及提高抗病毒治疗(ART)效果的方法。方法采用回顾性队列研究方法。通过艾滋病综合防治信息系统,选择山西省截止到2013年12月底报告的HIV/AIDS病例和ART信息,收集资料补充调查,计算病死率和治疗比例,用Cox比例风险回归模型进行分析。结果共收集HIV/AIDS确诊病例4861例,年龄平均(36.7±13.0)岁,男性占67.9%,农民占55.0%,性传播占61.4%。从2004年到2013年ART的比例由14.9%上升到62.3%,同期HIV/AIDS病例的病死率从40.7/100人年降低到5.0/100人年。对4861例HIV/AIDS病例Cox回归分析显示,最主要死亡风险是未进行ART[危险比(HR)=4.8]和未进行CD+4T淋巴细胞检测(HR=5.9);对2400例ART病例Cox回归分析显示,治疗前体质指数(BMI)过低和肥胖病例的死亡风险高于正常和超重病例(HR=2.4)、治疗前CD+4T淋巴细胞≤50个/μL病例的死亡风险高于>50个/μL病例(HR=2.3)。结论ART显著降低了HIV/AIDS病人的病死率,提示强化ART工作可进一步降低病死率。
- 薛子东卫军原琛利孟珺仇超徐建青
- 关键词：病死率抗病毒治疗
- 不同感染时间与感染途径的HIV-1感染者全基因组CTL免疫反应比较研究
- 2011年
- 目的 分析研究不同感染时间和不同途径感染HIV／AIDS感染者覆盖全基因组的CTL应答特征。方法 将75例HIV／AIDS感染者分为3组，血液感染1～2年组（10例）、血液感染〉10年组（43例）和性接触感染1～2年组（22例）；以HIV—lB亚型构建全基因组17个肽库作为抗原，采用ELISpot检测各组HIV特异性CTL应答；采用流式细胞术检测各组CD。计数；采用实时定量tit—PCR检测各组HIV病毒载量。结果血液感染1～2年组、血液感染〉10年组和性接触感染1～2年组感染者对HIV—B亚型17个肽库的平均应答频率分别为40％、65％、23％，经单向方差分析，3组感染者对HIV·1B亚型17个肽库的应答频率差异有统计学意义（F=19．96，P〈0．01）；3组感染者对HIV—B亚型17个肽库总应答强度范围分别为0～5835SFCs／10。PBMC、0～7225SFCs／10。PBMC、0～9740SFCs／IO。PBMC，且3组感染者对HIV—B亚型17个肽库的应答强度差异亦有统计学意义（H=101．90，P〈0．01）；此外，3组感染者对HIV—lB亚型17个肽库的应答广度分别为7（2—11）个、11（9—14）个、4（2—6）个，5组感染者应答广度的差异也有统计学意义（H=34．75，P〈0．01）。3组感染者应答频率、应答强度和应答广度从高到低依次为血液感染〉10年组、血液感染1—2年组、性接触感染1～2年组。不同感染时间和不同感染途径的感染者对Nef肽库和Gag肽库的应答百分比和应答强度均高于其他肽库。cD。计数〈200／~1、CD。计数为200～500／~1和≥500／~15组感染者对17个肽库的总应答强度范围分别为0～18475SFCs／10。PBMC、350～34095SFCs／10。PBMC、490～21550SFCs／IO。PBMC，但差异无统计学意义（H=2．93，P=0．23）；3组感染者CTL应答广度分别为3（0～8）个、10（2～17）个、10（1～17）个，3组间差异有统计学意义（H=14．72，P〈0．01），cD4计数〈200／~1的感染者CTL应答广度�
- 邱趁丽黄相刚卫军乔晓春仇超万延民王万海张晓燕徐建青
- 关键词：HIV感染HIV-1基因组免疫酶技术
- 携带绿色荧光蛋白基因的单轮感染活性HIV假病毒的建立及其活性检测被引量：15
- 2006年
- 目的构建携带绿色荧光蛋白基因的HIV假病毒载体,并研究该载体包装的HIV假病毒的感染活性,为进一步进行HIV生物学研究与中和抗体实验室评价搭建安全的技术平台。方法将增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)基因插入到骨架质粒pNL43LucR-E-的nef基因读码框,获得携带EGFP基因的质粒pNL43EGFPR-E-;通过将pNL43EGFPR-E-与编码HIV膜蛋白的质粒共转染293T细胞,收集上清,获得携带EGFP基因的HIV假病毒。该假病毒感染CD4+CCR5+的HOS细胞后可表达绿色荧光,这样通过流式细胞仪可测定表达绿色荧光的细胞数与细胞感染率。结果携带绿色荧光蛋白基因的HIV假病毒感染CD4+CCR5+的HOS细胞后,被感染的细胞可以表达绿色荧光蛋白,细胞的感染率与病毒加入量呈线性关系。结论获得了携带绿色荧光蛋白基因的HIV假病毒载体,并建立了具有单轮感染活性的HIV假病毒感染的检测方法。
- 仇超彭虹黄相刚任莉潘翔邵一鸣徐建青
- 关键词：绿色荧光蛋白假病毒中和抗体
- HIV-1潜伏感染人Jurkat T细胞模型的建立被引量：1
- 2011年
- 目的建立Ⅰ型艾滋病病毒(HIV-1)潜伏感染人Jurkat T细胞的模型,为进一步研究HIV-1潜伏感染机制奠定基础。方法利用一种表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的HIV-1假病毒感染人Jurkat T细胞,采用流式细胞术分选出GFP-细胞群,之后经激活剂曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)刺激后,再次采用流式细胞术分选出GFP+细胞,并通过有限稀释法制备获得单克隆细胞系。利用流式细胞术及酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测单克隆细胞系在TSA刺激前后的GFP+细胞比例及HIV-1病毒抗原p24;并用Alu-长末端重复序列(LTR)套式聚合酶链反应(Nested PCR)检测单克隆细胞系中HIV-1基因组的整合情况。结果获得了5株HIV-1潜伏感染的Jurkat单克隆细胞系,对这5株单克隆细胞系分别进行激活剂处理,发现无论是GFP表达细胞比例或HIV-1病毒蛋白p24抗原的表达,皆显著高于激活剂处理前的背景表达水平(P<0.05);并能从这5个单克隆细胞系基因组中扩增出针对HIV-1基因组的特异条带。结论已获得的5株单克隆细胞系具有HIV-1潜伏细胞的生物学特点,表明已成功地建立了HIV-1潜伏感染细胞模型。该模型可用于各种药物或激活剂的筛选和检测,也为进一步研究HIV-1潜伏感染机制奠定了工作基础。
- 李琳仇超李亮助刘爱平邱趁丽周明哲张晓燕徐建青朱焕章
- 关键词：JURKATT细胞系绿色荧光蛋白
- HIV-1感染者全基因多肽特异性T细胞免疫应答的初步研究
- 2011年
- 目的探讨HIV-l感染者人群分泌γ干扰素(IFN-γ)的HIV-1特异性T细胞反应的特征。方法对HIV-l感染者进行6个月和12个月随访,采用ELISPOT试验检测HIV-1特异性T细胞反应,采用流式细胞术计数CD4^+T细胞。结果 6个月随访,CD4^+T细胞计数与病毒载量呈负相关,具有统计学意义;分泌IFN-γ的HlV-1特异性T细胞反应最强的是Nef肽库;高强度特异性T细胞反应频度最高的是Nef(72%)肽库。12个月随访,CD4^+T细胞计数与病毒载量呈负相关,具有统计学意义;分泌IFN-γ的HIV-1特异性T细胞反应最强的是Nef肽库;高强度特异性T细胞反应频度最高的是Nef(74.1%)肽库。结论 HIV-1 B亚型的所有蛋白均可以诱导产生分泌IFN-γ的HIV-l特异性T细胞反应。6个月和12个月两次随访的研究结果均表明,针对Nef、Gag表位的HIV-1特异性T细胞反应最强、频度最高。
- 黄相刚仇超万延民徐建青
- 关键词：HIV-1T细胞免疫
