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万延民: 作品数：32 被引量：48H指数：5; 供职机构：复旦大学更多>>; 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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猴／人嵌合免疫缺陷病毒应用的研究进展: 2005年; 猴/人类免疫缺陷病毒(SHIV)自20世纪80年代末开始构建,并被广泛应用于人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)疫苗的攻毒实验和抗HIV中和抗体的活性评价.随着研究的深入,SHIV构建涉及的HIV-1病毒亚型也越来越多,如HIV-1 B、HIV-1 C、HIV-1 E等;同时,对SHIV致病性、细胞嗜性和应用的研究也有长足的进步,促进了HIV疫苗研究,并为HIV致病性研究提供了宝贵经验.; 万延民李河民王佑春; 关键词：人类免疫缺陷病毒疫苗分子克隆 T淋巴细胞

HIV-1B`/C、A／E重组亚型pol基因DNA疫苗的构建及其免疫原性研究被引量：1: 2012年; 目的构建表达中国BYC和A／E重组亚型HIV-1pol基因的DNA疫苗，并比较其免疫原性。方法按哺乳动物密码子使用频率对HIV-1CN54（BYC重组亚型）与AE2f（A／E重组亚型）的pol基因进行序列优化，构建DNA疫苗，通过Westernblotting验证其体外表达效率。通过肌肉注射途径免疫小鼠，然后无菌分离小鼠脾淋巴细胞并分别在ConsensusBPol和HIV-1AE2f Pol肽库刺激下，采用酶联免疫斑点技术（ELISPOT）检测抗原特异性IFN-γ的分泌情况，观察比较两个DNA疫苗免疫原性特征。结果DNA测序结果表明两个pol基因重组质粒构建正确，且两个DNA疫苗均能在体外有效表达。ConsensusBPol肽库刺激后，pSVAE—Pol活化的总T细胞免疫反应为（636±178）个斑点形成细胞数／10。个脾淋巴细胞，pSVCN—Pol活化的总T细胞免疫反应为（468±265）个斑点形成细胞数／10^6个脾淋巴细胞（P=0．412）；HIV-1 AE2fPol肽库刺激后，pSVAE—Pol活化的总T细胞免疫反应为（1378±611）个斑点形成细胞数／10^6个脾淋巴细胞，pSVCN—Pol活化的总T细胞免疫反应为（713±61）个斑点形成细胞数／10^6个脾淋巴细胞（P=0．134）。将总T细胞反应按肽池分解后发现，pSVAE—Pol活化的特异性T细胞反应主要集中于Pol 1肽池；而pSVCN—Pol除了能够活化针对Pol1的T细胞反应之外，也可以较好地活化针对ConsensusBPol2肽池的T细胞反应。结论两个亚型PolDNA疫苗中以AE-Pol的免疫原性更强，但其所活化的T细胞表位识别谱不及CN—Pol广泛。HIV-1疫苗可能需将两者结合在一起。; 万延民任艳琴王婧任晓楠胡志东仇超徐建青; 关键词：HIV T淋巴细胞

HIV-1 AE重组型疫苗构建及免疫原性研究被引量：1: 2010年; 目的利用AE亚型的膜蛋白,研发抗HI V-1 AE重组型的疫苗并进行免疫原性评价。方法构建表达中国流行株97CNGX2F(HI V-1 AE2F)包膜蛋白gp140的重组痘苗病毒rVVT140AE。使用表达gp140的DNA疫苗和rVVT140AE用初免-加强方式免疫小鼠。免疫结束后第2周处死小鼠,分别检测特异性抗体滴度和特异性T细胞反应。结果本疫苗所活化的特异性抗体滴度在3 200和51 200之间,几何平均值为11 143;总T细胞免疫反应强度为(1 918±442)SFCs/106脾细胞,其中针对env1、env2、env3、env4肽池的免疫反应强度分别为(1 280±330)SFCs/106脾细胞,(66±16)SFCs/106脾细胞,(163±34)SFCs/106脾细胞和(409±96)SFCs/106脾细胞,均显著高于空载体对照组(<10 SFCs/106脾细胞)。结论本实验构建的HI V-1 AE2F株包膜蛋白gp140重组痘苗病毒疫苗可作为针对我国HI V-1流行株的候选疫苗免疫原。; 张聪优万延民仇超黄杨阮力许雪梅徐建青; 关键词：HIV疫苗包膜蛋白

中国HIV-1 CRF01_AE流行株结构基因和调节／辅助基因DNA疫苗的构建和免疫原性研究被引量：5: 2010年; 目的构建表达gag—env融合基因和tat-rev-integrase（c-half）-vif-nef融合基因的DNA疫苗，并评价其免疫原性。方法按人源密码子使用频率对AE2f株的gag、env、tat、rev、integrase、vif和nef基因序列进行优化，构建真核表达质粒。用Westernblot法验证体外表达情况；用ELISPOT法检测小鼠的细胞免疫反应。结果限制性酶切及DNA测序结果表明两个融合基因质粒构建正确，可以表达相应的融合蛋白。ELISPOT结果显示，Gag—Env特异性的T细胞反应强度为（3010±566）SFC／10^6脾细胞；Tat-Rev—Integrase（C．half）-Vif-Nef融合蛋白特异性的T细胞反应为（948±737）SFC／10^6脾细胞，均显著高于空载体组。结论构建的表达HIV-1CRF01_AE流行株gag—env融合基因和tat—rev-integrase（c-half）-vif-nef融合基因的DNA疫苗可以正确表达所编码的融合蛋白并有效地激活机体的T细胞免疫反应。; 袁松华万延民仇超张聪优黄杨乔勇叶芮琪邱趁丽张晓燕徐建青; 关键词：HIV-1 艾滋病疫苗结构基因调节基因

5株SARS-CoV部分基因序列比较分析被引量：6: 2004年; 目的　分析SARS CoV部分结构区的基因序列 ,了解其变异程度。方法　采用套式PCR法扩增各结构区基因 ,对阳性PCR产物进行克隆和测序 ,并对序列进行分析。结果　完成了LC1株病毒的M、N、E和S基因的扩增和克隆 ,对LC2、LC3、LC4和LC5株病毒的M区基因进行了扩增和克隆。序列分析显示各结构基因的核苷酸序列与已报道的 18株序列的同源性在 99%以上。结论SARS CoV的基因序列较保守 ,有利于PCR诊断试剂和预防用疫苗的研制。; 李娟万延民许四宏张峰李秀华王佑春; 关键词：SARS-COV 基因序列严重急性呼吸道综合征 SARS冠状病毒

T细胞表面抑制性受体与HIV-1感染被引量：2: 2008年; 在抗病毒免疫中，有效而强大的T细胞免疫应答是清除病毒的关键，病毒感染的持续和慢性化常常是由于效应和记忆性T细胞的功能缺陷所致。而多数情况下，T细胞活化需要至少双信号刺激，有效的第二刺激信号，即非抗原特异性的共刺激信号，是决定受抗原刺激的T细胞进入增殖、分化过程成为效应细胞，还是进入无应答状态或凋亡状态的关键。介导第二刺激信号的是表达在T细胞表面的各种受体。根据其所传导的信号不同，可将这些受体分为两类：一类是介导激活信号的受体，; 解晓燕万延民徐建青; 关键词：抑制性受体 HIV-1感染 T细胞免疫应答共刺激信号抗病毒免疫记忆性T细胞

PEG接枝PDMAEMA作为DNA疫苗载体的研究: DNA载体主要分为两类：一种是病毒载体，另一种是非病毒载体。目前，病毒类载体依然是最有效的一类载体。但是病毒载体本身存在许多不足，主要体现在免疫原性高、靶向特异性差、制备较复杂、费用较高及安全性顾虑等方面。病毒载体在DN...; 乔勇董岸杰岳鑫业邢金峰徐建青黄杨仇超万延民张聪优袁松华邓联东; 关键词：DNA疫苗; 文献传递网络资源链接

HIV-1逃逸HLA限制性细胞毒性T淋巴细胞应答的研究进展被引量：1: 2015年; 特异性细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)在控制人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染和病毒复制过程中起关键作用。HIV-1通过在CTL表位内部或侧翼发生突变逃逸HLA限制性CTL造成的免疫压力,但是部分逃逸突变是以损失病毒适应性为代价。病毒逃逸会导致相应CTL反应水平减弱,免疫系统会产生针对突变病毒株的CTL反应。HIV-1逃逸突变与宿主的CTL反应在宿主体内相互博弈。本文重点综述CTL免疫压力下HIV-1病毒发生逃逸突变的研究进展。; 石银万延民徐建青; 关键词：人类免疫缺陷病毒免疫应答细胞毒性T淋巴细胞

HIV抗体酶联免疫诊断试剂检测不同基因型抗体的研究被引量：6: 2003年; 目的分析不同HIV抗体酶联免疫诊断试剂对检测HIV不同基因型抗体的情况。方法对不同地区的20份HIV抗体阳性样品中HIV核酸进行扩增,对PCR产物进行测序并进行基因型别分析。用不同试剂对系列稀释的不同基因型样品进行检测。结果 20份样品均为HIV RNA阳性,其中9份样品为HIV B亚型,9份样品为HIV C或BC重组,2份为HIV AE重组。不同试剂对HIV不同基因型抗体的检测灵敏度无明显差异。结论我国主要的商业化HIV抗体诊断试剂产品检测不同基因型抗体的能力无明显差异。; 宋爱京李秀华李娟许四宏张峰万延民张春涛王佑春; 关键词：HIV抗体酶联免疫试剂病毒株

HIV-1包膜蛋白疫苗免疫原选择及改造策略研究进展被引量：5: 2010年; 尽管经过全球研究人员20多年的共同努力，目前仍无有效的HIV-1疫苗面世。由于HIV-1病毒可以通过多种方式逃避机体免疫应答，所以截至目前仍未找到可以有效诱导广谱中和抗体的免疫原或免疫策略，但该方面的研究从未止步。在美国和泰国开展的2个Ⅲ期临床试验显示，gp120亚单位疫苗对HIV-1感染并无保护效果，也不能在HIV-1感染后减缓疾病进展。; 张聪优万延民许雪梅徐建青; 关键词：HIV-1疫苗蛋白疫苗 HIV-1病毒 HIV-1感染包膜机体免疫应答

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