孟玲珍
- 作品数：8 被引量：18H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
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- 抗莱氏无胆甾原体单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
- 1991年
- 本文采用浓缩提纯的莱氏无胆甾原体做为抗原,多途径免疫 BALB/C 小鼠,取脾细胞与 SP_2/O-Ag^(14)小鼠骨髓瘤细胞融合,建立了4株分泌抗莱氏无胆甾原体单克隆抗体杂交瘤细胞。分析了杂交瘤细胞的染色体,平均数为103条;制备了腹水抗体,经 APAAP 法(碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶桥联酶标显色技术)和 IFA 法检测,抗体效价在80～320之间;对免疫球蛋白亚类进行了鉴定,其抗体均为 IgM。上述细胞经3～4个月稳定传代后,冻存于液氮中。该单克隆抗体的制备对细胞培养中支原体污染的检出可能有重要意义。
- 辛颜彬杨保安孟玲珍刘景兰
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤
- 4种抗支原体单克隆抗体免疫学特性的研究被引量：4
- 1991年
- 为了有效地控制细胞质量、我们从1987年开始、相继建立了抗口腔支原体(M.orale),精氨酸支原体(M.arginini),猪鼻支原体(M.hyorhinis).和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)的杂交瘤细胞系共20株。并用IFA法、BA法或APAAP法对单克隆抗体进行了检测和鉴定。单克隆抗体(McAb)亚类鉴定结果:8株为IgG1,2株为IgG2b,其余10株为IgM。抗体效价测定大多数在4000～8 000之间。利用支原体纯培养的菌落进行了IFA染色试验,封闭试验,生长抑制试验和免疫电镜检查,均证实了它们的特异性,并获得2株对同属支原体有抗原交叉的McAb(3D1和3A11)。利用上述McAb检测实验室常用细胞的支原体污染,较常规法和DNA荧光染色法简便,快速,特异性较高。
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- 关键词：枝原体杂交瘤单克隆抗体
- APAAP桥联酶标技术检测支原体和虫媒病毒被引量：2
- 1989年
- APAAP免疫酶标技术(即碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶标显色技术)是最近几年随着单克隆抗体(McAb)技术进展而发展起来的一新兴组化染色技术.此项技术在国内首先由杨志刚等同志建立并推广应用.我们将这一方法应用于支原体和虫媒病毒抗原检测,获得了满意结果.材料与方法支原体:口腔支原体引自生物制品检定所,猪鼻支原体(BTS-7CF8)引自中监所.病毒:辛德比斯病毒引自生物制品检定所,森林脑炎病毒(森张株)引自长春生物制品所.上述支原体和病毒感染敏感细胞一定时间后按常规法进行细胞滴片,经丙酮固定后,作为感染抗原片.
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- 关键词：虫媒病毒抗原检测单克隆抗体
- 利用菌落免疫荧光法鉴定对多种支原体起反应的单克隆抗体被引量：1
- 1991年
- 我们用菌落免疫荧光染色技术对4株(3D_1、3A_(11)、3F_5、2E_5)抗精氨酸支原体(MycoPlasma arginini)McAb进行了鉴定,在热水固定的菌落上3D_1、3A_(11)不仅与精氨酸支原体出现了阳性反应,而且与口腔支原体(M.orale)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)、莱氏无胆甾原体(AcholePlasma laidlawii)、羊无乳支原体(M.agalactia)PG_2和牛丝状支原体丝状亚种(M.mycoides subsp. mycoides)PG_1等均有交叉反应;在未固定的菌落上用表面免疫荧光检测时, McAb却表现了与PcAb不同的特性。同时我们还做了阻断试验,进一步证明了我们制备的McAb的支原体特异性。
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- 关键词：支原体属单克隆抗体
- 抗支原体单克隆抗体试剂盒的研制和应用被引量：7
- 1993年
- 从20株抗支原体MAb中筛选出1株能够对各种支原体起反应的MAb(3D1)组成试剂盒,用间接免疫荧光法(IFA) 检查了35株传代细胞和6份动物标本,支原体检出率为83%,为了验证此方法的准确性,将其中部分细胞同时做常规培养检查,符合率为90%。结果证明,MAb试剂盒具有特异性高,敏感性强,速度快等优点。
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- 关键词：枝原体单克隆抗体试剂盒免疫
- 抗鸡IgG重链单克隆抗体的制备与应用被引量：1
- 1996年
- 以提纯鸡IgG做抗原免疫Balb/c小鼠,取鼠细胞在-PEG_1000作用下与小鼠骨髓瘤细胞(Sp_2/o-Ag14)融合,采用间接免疫荧光(IFA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清抗体,阳性孔经有限稀释法进行细胞克隆。共获得7株分泌抗鸡IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞(2H_8、4D_8、1B_7、2A_7、2B_3、1G_12、3D_12),将这些细胞分别接种同系小鼠制备出腹水抗体,ELISA效价可达10~5～10~6,其中4株IFA效价为1∶400～1∶800,另3株为阴性。Ig亚类鉴定结果表明:除1G_12为lgG_(2a)外,其余均为IgG_1。经阻断试验、琼脂扩散试验和免疫印迹试验(Western blot)证明了单克隆抗体的特异性。上述杂交瘤细胞经3～6个月稳定传代后冻存于液氮中,1年后复苏培养,其分泌抗体的功能未见改变。
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- 关键词：单克隆抗体鸡血清免疫球蛋白G
- 猪鼻支原体单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定被引量：1
- 1989年
- 作者用提纯的猪鼻支原体抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,在PEG1000作用下,与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag14融合,共获得5株稳定分泌抗猪鼻支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备了小鼠腹水抗体,并对杂交瘤细胞株行进了鉴定。上述细胞株经3～6个月稳定传代,冻存于液氮中,复苏后其分泌抗体的水平未见下降。
- 辛颜彬杨保安孟玲珍刘景兰
- 关键词：杂交瘤细胞株单克隆抗体小鼠骨髓瘤细胞抗原免疫分泌抗体脾细胞
- 抗精氨酸支原体单克隆抗体的制备被引量：2
- 1990年
- 本室制备了4株(A11、E5、F5、D1)抗精氨酸支原体的单克隆抗体(McAb )。用APAAP桥联酶标技术测定该抗体腹水效价为1:640～1:40 960,A11抗体的Ig类型是IgM,而E5、F5及D1均为IgG1。建立的4株能稳定分泌抗精氨酸支原体的McAb,经液氮冻存后复苏,其分泌抗体能力不受影响。该McAb用于检测细胞培养中的支原体污染,可特异性地检出精氨酸支原体,达到快速、准确的要求。
- 杨保安刘景兰孟玲珍辛颜彬
- 关键词：支原体属杂交瘤单克隆抗体
