张小贤
- 作品数：20 被引量：70H指数：5
- 供职机构：杭州医学院更多>>
- 发文基金：浙江省教育厅科研计划浙江省医药卫生优秀青年科技人才专项科研基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 慢性前列腺炎患者假丝酵母菌感染及耐药性分析被引量：3
- 2005年
- 目的了解慢性前列腺炎与假丝酵母菌感染的相关性及假丝酵母菌的耐药性。方法采用常规沙堡平板分离360例慢性前列腺炎患者的前列腺液标本中的假丝酵母菌,疑似菌落用ATBExpression鉴定仪进行鉴定。采用ATB-Fungus真菌药敏板,对假丝酵母菌株进行药敏试验。结果11.7%前列腺液标本(42/360)假丝酵母菌阳性,其中白假丝酵母菌23例(54.7%),近平滑假丝酵母菌13例(30.9%),其它6例(14.3%)。假丝酵母菌菌株对两性霉素B和制霉菌素敏感率均为100%,其次为酮康唑,敏感率为97.0%;对5-氟胞嘧啶耐药性最强,其耐药率为56.5%。结论白假丝酵母菌和近平滑假丝酵母菌是慢性前列腺炎假丝酵母菌感染的优势菌种,假丝酵母菌株最敏感的药物是两性霉素B和制霉菌素。
- 张家敏张小贤于志坚
- 关键词：慢性前列腺炎假丝酵母菌耐药性
- 甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白fliC-a基因的克隆、原核表达及鉴定
- 2012年
- 目的:克隆甲型副伤寒沙门菌1相鞭毛蛋白抗原(H1抗原)fliC-a基因,构建原核表达系统并鉴定重组蛋白的抗原性。方法:PCR方法扩增fliC-a基因,克隆到质粒pET-42a构建原核表达载体pET-fliC-a,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导目的重组蛋白rfliC-a表达,用SDS-PAGE鉴定rfliC-a,Western blot和双向免疫扩散法鉴定rfliC-a的抗原性和免疫原性。结果:成功表达并纯化获得相对分子量为14.4 kDa的重组蛋白rfliC-a,rfliC-a能与兔抗甲型副伤寒沙门菌全菌血清发生特异性结合,免疫家兔获得高效价抗体。结论:成功构建了fliC-a基因原核表达系统,所表达的rfliC-a具有良好的抗原性。
- 张小贤张家敏王志刚朱永良
- 关键词：甲型副伤寒沙门菌克隆原核表达
- 应用多重PCR法快速检测伤寒沙门菌的研究被引量：6
- 2010年
- 目的:建立快速、特异检测伤寒沙门菌的多重PCR法,应用于临床肠热症的快速诊断。方法:根据GenBank,EMBL及DDBL公布的伤寒沙门菌鞭毛蛋白抗原基因、菌体抗原基因及表面抗原基因的核酸序列,设计出针对fliC-d,rfbE,rfbS及viaB基因的4对特异性引物,采用多重PCR法检测伤寒沙门菌标准株、非伤寒沙门菌标准株及伤寒沙门菌临床菌株。结果:实验结果证实,所有伤寒沙门菌株应用多重PCR法均成功扩增出预先设计的4条特异性目的条带。结论:所建立的多重PCR法可用于快速检测和鉴定伤寒沙门菌,为肠热症的临床诊断及流行病学溯源提供了一种更简便易行的检测技术。
- 张小贤张家敏黄卫平杨珺
- 关键词：伤寒沙门菌基因多重PCR
- 浙江省72家医院免疫学检验项目开展情况调查分析
- 目的:改进医学检验专业免疫学及免疫学检验技术课程的教学,为修订教学大纲提供依据。方法:对浙江省72家医院检验科免疫学检验项目的开展情况进行调查,与现行教学大纲、毕业实习大纲进行比较、分析。结果:现行教学大纲与医院检验科免...
- 黄卫平周海鸥吴森林张小贤胡明成
- 关键词：免疫学检验
- 文献传递
- 16SrRNA实时荧光定量PCR检测肠道菌群的研究被引量：11
- 2010年
- 目的:应用细菌的16SrRNA序列设计双歧杆菌(Bifidobacterium)、乳酸杆菌(Lactobacillus)、大肠杆菌(E.coli)、肠球菌(Enterococcus)的引物并对肠道的这4种细菌菌属进行定量测定,绕过分离培养环节,以微生物rRNA/rDNA基因作为种属鉴别序列,确定肠道菌群的情况。方法:采用腹腔注射链脲菌素(STZ)的方法建立小鼠糖尿病模型,分别检测小鼠肠道主要的菌群。结果:造模成功小鼠血糖升高(>12.3mmol/L,P<0.05)时,肠道益生菌(双歧杆菌,乳酸杆菌)数量降低(P<0.05),而大肠杆菌、肠球菌数量增加(P<0.05)。结论:小鼠糖尿病模型可引起肠道菌群失调,荧光定量PCR是一种特异性高、敏感性强的定量方法,可正确定量肠道中的细菌菌群数量。
- 张小贤钱香楼正青陈莹莹沈岳良
- 关键词：小鼠糖尿病肠道菌群
- 浙江省72家医院免疫学检验项目开展情况调查分析
- 2005年
- 目的:改进医学检验专业免疫学及免疫学检验技术课程的教学,为修订教学大纲提供依据。方法:对浙江省72家医院检验科免疫学检验项目的开展情况进行调查,与现行教学大纲、毕业实习大纲进行比较、分析。结果:现行教学大纲与医院检验科免疫学检验项目存在较大差异,其中有14个项目几乎在被调查医院中均采用,有13个项目在被调查医院基本不开展。结论:需根据临床实际修订现行教学大纲,调整实验技能训练考核内容。
- 黄卫平周海鸥吴森林张小贤胡明成
- 关键词：免疫学检验
- 利福喷丁衍生物体内外抗结核菌活性的研究被引量：1
- 2003年
- 利福喷丁及其衍生物脱乙酰基利福喷丁对人型、牛型和草结核分枝杆菌的MIC10 0 分别为 2和 2、2和 2、0 .5和 0 .2 5mg/L。 10～ 4 0mg/kg剂量的利福喷丁组和脱乙酰基利福喷丁组小鼠半数动物存活时间(ST50 )均超过 2 8d ,2 .5和 5 .0mg/kg剂量的利福喷丁组小鼠ST50 分别为 18和 18d ,2 .5和 5 .0mg/kg剂量的脱乙酰基利福喷丁组小鼠ST50 分别为 16和 2 7d ,感染对照组小鼠ST50 为 13d。实验结果表明利福喷丁及其衍生物脱乙酰基利福喷丁有相似而良好的体内外抗结核分枝杆菌的活性。
- 蒋锦琴张小贤张加敏黄卫平吴森林严杰
- 关键词：衍生物结核菌抑菌浓度抗结核药物
- fliC基因在快速分型鉴定伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的应用
- 2012年
- 目的:探讨沙门菌1相鞭毛蛋白抗原fliC基因在快速分型鉴定伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的应用。方法:根据伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌1相鞭毛蛋白fliC-d和fliC-a基因以及菌体抗原rfbS基因的核酸序列,设计针对fliC-d、fliC-a及rfbS基因的3对特异性引物,采用多重PCR法进行检测。结果:实验结果显示,伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌分别在750 bp和329 bp处扩增出2条特异性目的条带,在258 bp处扩增出1条相同条带,非伤寒沙门菌株和甲型副伤寒沙门菌株均为阴性。结论:fliC基因检测可用于伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的分型鉴定,而rfbS基因则无助于分型鉴定。
- 张家敏张小贤王志刚
- 关键词：伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌多重PCR
- 非融合rIL-24蛋白的制备及活性鉴定
- 2009年
- 目的制备非融合的rIL-24蛋白,鉴定其体外诱导肿瘤细胞凋亡活性。方法为制备非融合IL-24蛋白,将IL-24基因插入到pET32a(+)上KpnⅠ与BamHⅠ之间,构建表达载体IL-24/pET32a,IPTG诱导在E.coliBL21(DE3)中表达。洗涤后的包涵体溶解在2 mol/L尿素(pH9.0)中,采用镍离子亲和色谱和凝胶分子筛的二步法纯化,肠激酶酶切(肠激酶与蛋白1∶400,pH7.5处理36 h),再用亲和柱色谱纯化制备非融合的rIL-24。MTT法和形态学观察分析rIL-24体外诱导肿瘤细胞凋亡的活性。结果重组工程菌以包涵体形式表达出相对分子质量约为35 000的融合蛋白。包涵体经洗涤、溶解及二步纯化得到纯度大于95%的Trx-IL-24。融合蛋白用肠激酶酶切之后,经亲和色谱制备得到纯度大于98%的非融合蛋白rIL-24。rIL-24显著诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡(P<0.05),而对正常人肺成纤维细胞NHLF没有影响。结论IL-24基因在E.coli中高效表达,并获得高纯度、在体外明显诱导乳腺癌细胞凋亡的非融合蛋白rIL-24,预示其具有肿瘤治疗应用的前景。
- 杨珺张小贤张卫军邹全明
- 关键词：纯化诱导肿瘤细胞凋亡
- 107家医院寄生虫检验项目开展情况调查分析
- 2002年
- 对浙江省107家医院检验科及有关卫生单位寄生虫检验项目的开展情况进行调查。结果表明:现行教学大纲要求与医院检验科寄生虫检验项目开展情况存在较大差距。建议:根据调查结果对现行教学大纲作大幅度调整,编写相应的教学用书、实验指导、实训指导等,建立适应医学高职人才培养要求的新的课程体系。
- 周海鸥葛思荣张小贤
- 关键词：教学改革
