张家敏
- 作品数：17 被引量：64H指数：4
- 供职机构：杭州医学院更多>>
- 发文基金：浙江省教育厅科研计划浙江省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 慢性前列腺炎患者假丝酵母菌感染及耐药性分析被引量：3
- 2005年
- 目的了解慢性前列腺炎与假丝酵母菌感染的相关性及假丝酵母菌的耐药性。方法采用常规沙堡平板分离360例慢性前列腺炎患者的前列腺液标本中的假丝酵母菌,疑似菌落用ATBExpression鉴定仪进行鉴定。采用ATB-Fungus真菌药敏板,对假丝酵母菌株进行药敏试验。结果11.7%前列腺液标本(42/360)假丝酵母菌阳性,其中白假丝酵母菌23例(54.7%),近平滑假丝酵母菌13例(30.9%),其它6例(14.3%)。假丝酵母菌菌株对两性霉素B和制霉菌素敏感率均为100%,其次为酮康唑,敏感率为97.0%;对5-氟胞嘧啶耐药性最强,其耐药率为56.5%。结论白假丝酵母菌和近平滑假丝酵母菌是慢性前列腺炎假丝酵母菌感染的优势菌种,假丝酵母菌株最敏感的药物是两性霉素B和制霉菌素。
- 张家敏张小贤于志坚
- 关键词：慢性前列腺炎假丝酵母菌耐药性
- 脱乙酰基利福喷丁抗结核杆菌生长活性的研究
- 2005年
- 张家敏张小贤蒋锦琴黄卫平吴森林严杰
- 关键词：结核病治疗药物
- 创伤弧菌vvhA基因的克隆、原核表达系统的构建及鉴定
- 2006年
- 目的克隆创伤弧菌(Vibrio vulnificus,Vv)溶细胞素基因(vvhA),构建原核表达系统并鉴定其表达产物的免疫性。方法采用PCR技术从Vv GTC333和WZ01株DNA中扩增全长vvhA基因,T-A克隆后测定其核苷酸序列。采用pET32a质粒构建vvhA基因原核表达载体,在E.coliBL21(DE3)宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导目的重组蛋白rVvhA表达,采用Ni-NTA亲和层析法提纯rVvhA,SDS-PAGE检测表达和提纯效果。采用兔抗Vv全菌抗体的Western Blot和兔抗rVvhA血清的免疫扩散试验鉴定其免疫反应性和免疫原性。结果所克隆的vvhA基因核苷酸序列与GeneBank公布的同源性分别为96.09%和98.26%。在0.5 mmol/L IPTG诱导下,rVvhA产量可占细菌总蛋白的18%。提纯的rVvhA经SDS-PAGE后仅显示单一的蛋白条带。重组蛋白rVvhA能与兔抗Vv全菌抗体发生特异性结合,免疫家兔可获得高效价抗体。结论该研究成功地构建了创伤弧菌vvhA基因高效原核表达系统,所表达的rVvhA具有良好的免疫原性和免疫反应性,可作为Vv免疫检测试剂盒及疫苗的抗原。
- 张家敏应斌宇楼永良严杰
- 关键词：克隆免疫性
- 女性尿路感染病原菌分布及耐药性监测被引量：4
- 2007年
- 目的:了解女性尿路感染病原菌的分布及耐药性,为临床治疗提供可靠的依据。方法:应用回顾性调查分析方法,对2002年1月～2005年1月杭州市某医院住院及门诊女性尿路感染患者尿培养分离出的617株细菌进行鉴定和耐药分析。结果:女性尿路感染菌株以大肠埃希菌为主,占55.91%。其次为肠球菌属、变形菌属、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、葡萄球菌属及真菌。肠杆菌科细菌除对亚胺培南保持100%敏感外,对其他抗生素耐药率均呈上升趋势。革兰阳性球菌耐药率也相当严重,仅万古霉素对革兰阳性球菌敏感率为100%。结论:女性尿路感染的主要病原菌为肠杆菌科细菌。必须重视女性尿路感染病原菌及其耐药性监测,从而合理使用抗生素。
- 张家敏张小贤
- 关键词：女性尿路感染病原菌抗菌药物耐药性
- 医院假丝酵母菌属感染的临床调查及药物敏感性分析被引量：13
- 2008年
- 目的探讨杭州市某综合性三甲医院假丝酵母菌属医院感染的相关因素及耐药现状,为预防与控制医院感染提供依据。方法应用回顾性调查分析方法,采集2004年1月-2006年12月住院发生感染患者的临床标本进行假丝酵母菌属的鉴定及药物敏感试验;采用科玛嘉显色培养基和API20CAUX酵母菌鉴定系统进行假丝酵母菌属的培养和鉴定,药物敏感试验采用浓度梯度法(Etest法),药敏性数据分析采用WHONET-5软件,依据美国临床实验室标准化研究所(CLSI)制定的标准进行结果判读。结果3年间共检出假丝酵母菌属264株,年检出率分别为78株(29.5%)、87株(33.0%)和99株(37.5%);菌种检出构成比显示白色假丝酵母菌检出率最高(65.5%),其次为热带假丝酵母菌(15.1%);痰液标本中假丝酵母菌属的检出率最高(108株,40.9%);患有呼吸系统原发性疾病的患者感染率最高,检出率为58株(22.0%);药敏结果显示对两性霉素B最敏感,其次是氟康唑;3年动态变化分析结果显示对两性霉素B敏感菌株的比例保持稳定,而对氟康唑敏感菌株的比例逐年下降。结论3年间假丝酵母菌属医院感染率逐年上升,白色假丝酵母菌感染率最高,对4种常用抗真菌药物的敏感性有较大差异,且对抗真菌药物的敏感率呈动态变化;预防与控制假丝酵母菌属医院感染,应加强对假丝酵母菌属医院感染危险因素的监测,提高机体免疫力及合理使用抗真菌药物。
- 张家敏施新颜
- 关键词：假丝酵母菌属医院感染药物敏感性
- 306株鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性监测被引量：15
- 2007年
- 目的调查杭州市某医院鲍曼不动杆菌感染的临床分布及其耐药性现状。方法监测该院2004年1月至2006年12月临床分离的306株鲍曼不动杆菌的临床感染分布及耐药性,药物敏感试验采用琼脂纸片扩散法,耐药性数据分析采用WHONET 5软件。结果2004年至2006年3年间,鲍曼不动杆菌的检出率呈逐年增加趋势(从1.60%增至2.40%);临床分布以重症监护室(ICU)最高(84/306),老年患者多见(131/306);有184株(60.13%)来源于痰液标本。药敏试验结果显示鲍曼不动杆菌对美罗培南最敏感,耐药率为4.6%;其次是亚胺培南/西司他丁和头孢哌酮/舒巴坦,耐药率分别为7.2%及8.5%;对3代头孢菌素及环丙沙星的耐药率均>50.0%;同时发现185株(60.5%)为多重耐药菌株。结论鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素及头孢哌酮/舒巴坦较敏感,临床医师应注意合理使用抗菌药物,以减少多重耐药菌株的产生。
- 张家敏施新颜
- 关键词：鲍曼不动杆菌抗菌药物耐药性药物监测
- 甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白fliC-a基因的克隆、原核表达及鉴定
- 2012年
- 目的:克隆甲型副伤寒沙门菌1相鞭毛蛋白抗原(H1抗原)fliC-a基因,构建原核表达系统并鉴定重组蛋白的抗原性。方法:PCR方法扩增fliC-a基因,克隆到质粒pET-42a构建原核表达载体pET-fliC-a,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导目的重组蛋白rfliC-a表达,用SDS-PAGE鉴定rfliC-a,Western blot和双向免疫扩散法鉴定rfliC-a的抗原性和免疫原性。结果:成功表达并纯化获得相对分子量为14.4 kDa的重组蛋白rfliC-a,rfliC-a能与兔抗甲型副伤寒沙门菌全菌血清发生特异性结合,免疫家兔获得高效价抗体。结论:成功构建了fliC-a基因原核表达系统,所表达的rfliC-a具有良好的抗原性。
- 张小贤张家敏王志刚朱永良
- 关键词：甲型副伤寒沙门菌克隆原核表达
- 应用多重PCR法快速检测伤寒沙门菌的研究被引量：6
- 2010年
- 目的:建立快速、特异检测伤寒沙门菌的多重PCR法,应用于临床肠热症的快速诊断。方法:根据GenBank,EMBL及DDBL公布的伤寒沙门菌鞭毛蛋白抗原基因、菌体抗原基因及表面抗原基因的核酸序列,设计出针对fliC-d,rfbE,rfbS及viaB基因的4对特异性引物,采用多重PCR法检测伤寒沙门菌标准株、非伤寒沙门菌标准株及伤寒沙门菌临床菌株。结果:实验结果证实,所有伤寒沙门菌株应用多重PCR法均成功扩增出预先设计的4条特异性目的条带。结论:所建立的多重PCR法可用于快速检测和鉴定伤寒沙门菌,为肠热症的临床诊断及流行病学溯源提供了一种更简便易行的检测技术。
- 张小贤张家敏黄卫平杨珺
- 关键词：伤寒沙门菌基因多重PCR
- N-糖基化IL-24的表达及体外诱导肿瘤细胞凋亡的研究被引量：4
- 2009年
- 目的构建IL-24基因的真核表达载体,在毕赤酵母GS115中高效表达,研究重组N-糖基化IL-24蛋白体外诱导肿瘤细胞凋亡的活性。方法借助过渡质粒α/pUC18,将IL-24基因插入到质粒pPIC9K的BamHⅠ和EcoRⅠ之间,构建重组质粒IL-24/pPIC9K,转化毕赤酵母GS115分泌表达,Tricine-SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白,ELISA检测蛋白表达量,糖苷酶PNGaseF分析IL-24糖基化形式和程度。MTT法和形态学分析重组IL-24诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡的活性。结果成功构建重组表达质粒IL-24/pPIC9K,IL-24在毕赤酵母最高表达量为(81.31±14.46)mg·L-1。约70%的IL-24发生了N-糖基化。重组IL-24诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡,对正常人肺成纤维细胞NHLF没有影响。N-糖基化IL-24对MCF-7抑制率约高于去糖基化IL-24。结论毕赤酵母分泌形式的表达和适度的糖基化修饰都有利于目的蛋白IL-24的生物学活性,为后续的研究提供基础。
- 杨珺张家敏黄卫平张卫军刘开云邹全明
- 关键词：白细胞介素24N-糖基化分泌表达肿瘤细胞凋亡
- fliC基因在快速分型鉴定伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的应用
- 2012年
- 目的:探讨沙门菌1相鞭毛蛋白抗原fliC基因在快速分型鉴定伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的应用。方法:根据伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌1相鞭毛蛋白fliC-d和fliC-a基因以及菌体抗原rfbS基因的核酸序列,设计针对fliC-d、fliC-a及rfbS基因的3对特异性引物,采用多重PCR法进行检测。结果:实验结果显示,伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌分别在750 bp和329 bp处扩增出2条特异性目的条带,在258 bp处扩增出1条相同条带,非伤寒沙门菌株和甲型副伤寒沙门菌株均为阴性。结论:fliC基因检测可用于伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的分型鉴定,而rfbS基因则无助于分型鉴定。
- 张家敏张小贤王志刚
- 关键词：伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌多重PCR
