张跃军
- 作品数：15 被引量：35H指数：4
- 供职机构：南华大学医学院病原生物学研究所更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金湖南省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 梅毒螺旋体重组蛋白Tp0993、Tp0971的表达与鉴定
- 曾铁兵吴移谋裴瑞青张跃军刘双全赵飞骏刘小军
- 白介素2与梅毒螺旋体膜蛋白Gpd双价核酸疫苗的免疫活性及保护作用研究被引量：1
- 2011年
- 目的探讨白介素2（IL-2）基因与梅毒螺旋体（Treponema pallidum，Tp）Gpd抗原编码基因融合构建双价核酸疫苗免疫新西兰兔后的免疫应答效果及感染Tp后的保护作用。方法定向克隆构建真核表达重组体pcDNA3．1（＋）／Gpd—IL-2，与先期构建的pcDNA3．1（＋）／Gpd真核表达重组体分别设为两个疫苗实验组，同时设pcDNA3．1（＋）空质粒对照组及PBS对照组，共4组，每组18只雄性新西兰兔，肌肉多点注射初次免疫，于初次免疫后第10周各实验组兔皮下接种Tp标准株进行感染实验，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测不同时间点免疫兔特异性抗体产生水平和脾细胞IL-2及干扰素γ（IFN-γ）诱导水平，噻唑蓝法检测兔脾淋巴细胞增殖水平。结果用pcDNA3．1（＋）／Gpd—IL-2融合双价疫苗和pcDNA3．1（＋），Gpd单基因疫苗在免疫期间和感染期间均能检测到高滴度的IgG特异性抗体，最高滴度分别可达1：4096和1：1024（P值均〈0．01）；两疫苗组之间在免疫及感染期间不同时间点比较差异也有统计学意义（P值均〈0．01）；免疫后第8周双价融合核酸疫苗组及单基因核酸疫苗组兔脾细胞培养上清中IFN-γ分别为（447±22．4）μg／L、（225±17．6）μg／L，IL-2分别为（167±15．7）μg／L、（110±12．6）μg／L，均高于空质粒对照组和空白对照组（P值均〈0．01）；感染期间不同时间点兔脾细胞受相应蛋白刺激均有明显增殖反应，检测指标均显著高于空质粒对照组和空白对照组（P值均〈0．01）。早期感染皮损观察显示双价融合核酸疫苗组较之单基因疫苗组有着更低的皮损Tp检测阳性率（17．5％）、溃疡病灶发生率（15％）以及更短的皮损愈合时间。结论用pcDNA3．1（＋）／Gpd—IL-2双基因融合疫苗在兔体内能更有效地诱导保护性体液免疫和细胞免疫应答。
- 余坚赵飞骏张晓红顾伟鸣刘双全曾铁兵张跃军裴瑞青吴移谋
- 关键词：GPD
- 梅毒螺旋体TprK膜蛋白的研究现状被引量：1
- 2009年
- 梅毒是由梅毒螺旋体(Tp)引起的一种严重危害人类健康的性传播疾病,其中TprK是Tp的一个重要的膜蛋白,从属于TprP重复蛋白家族,具有增强Tp逃避宿主免疫反应和维持慢性感染的能力,可能是Tp有效疫苗的组分之一。现就TprK膜蛋白的研究现状作一综述。
- 张跃军吴移谋
- 关键词：梅毒螺旋体膜蛋白V区
- 梅毒螺旋体Tp0971重组蛋白的表达及其在梅毒血清学诊断中的初步评价被引量：8
- 2010年
- 目的表达梅毒螺旋体(Tp)重组蛋白Tp0971(rTp0971),评价其作为候选抗原在梅毒血清学诊断中的意义。方法 PCR扩增Tp0971基因,构建原核重组体pET-28a/Tp0971并诱导表达蛋白,Western blot检测表达产物的抗原性;建立rTp0971-ELISA,检测238份TPPA阳性和120份TPPA阴性血清的Tp特异性IgG,并与TPPA法比较。结果成功高效表达了rTp971;Western blot显示纯化的rTp0971能被梅毒患者血清识别。用rTp0971-ELISA检测临床血清标本的特异性为100%,敏感性为89.1%,总符合率为92.7%。结论 rTp0971有较好的抗原性,可望作为梅毒血清学检测的候选诊断抗原。
- 曾铁兵刘小军张跃军刘双全裴瑞青赵飞骏吴移谋
- 关键词：梅毒螺旋体梅毒酶联免疫吸附试验血清学试验
- Treponema pallidum membrane lipoproteins Tp0663, Tp0821 and Tp0971 induce macrophages to produce proinflamatory cytokines via TLR2 pathway
- 张跃军赵飞骏刘双全曾铁兵顾伟鸣裴瑞青吴移谋
- 梅毒螺旋体Tp0319重组蛋白的表达及免疫活性研究被引量：4
- 2010年
- 目的 克隆和表达梅毒螺旋体Tp0319基因,并对其表达产物进行免疫活性分析.方法 挑选并克隆出Tp0319免疫优势区基因,构建原核表达载体 诱导表达并纯化重组蛋白,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western印迹法鉴定 用纯化的重组蛋白免疫新西兰兔 间接ELISA法检测梅毒螺旋体参考血清及临床标本.结果 成功构建原核表达载体pQE32/Tp03 19 高效表达和纯化出一相对分子质量约30 000的重组蛋白.用重组蛋白免疫新西兰兔,能刺激其产生高水平抗体滴度.Western印迹证明其能与梅毒患者血清发生特异性反应,阴性对照菌未见目的 表达条带.间接ELISA法检测80份梅毒螺旋体参考血清（阴性、阳性各40份）,阳性和阴性结果的符合率均为100%.检测200份临床梅毒血清标本及200份正常人血清,结果与梅毒螺旋体明胶凝集试验相比,灵敏度和特异度分别为92.6%和100%,符合率为96%.结论 制备的Tp0319重组蛋白具有良好的免疫活性,为进一步研究其在梅毒血清学诊断中的应用奠定一定的基础.
- 刘双全汪世平肖勇健吴移谋赵飞骏曾铁兵张跃军高冬梅
- 关键词：密螺旋体苍白重组蛋白质类免疫活性
- 梅毒螺旋体膜脂蛋白Tp0663、Tp0821、Tp0971通过TLR2途径诱导巨噬细胞产生前炎症细胞因子
- 目的：探讨梅毒螺旋体（Treponema pallidum, Tp）膜脂蛋白 Tp0663、Tp0821、Tp0971能否诱导巨噬细胞产生前炎症细胞因子（CKs）IL-6和IL-1β;通过观察 TLR2抗体、CD14抗体...
- 张跃军
- 关键词：梅毒螺旋体膜脂蛋白巨噬细胞前炎症细胞因子信号转导
- 文献传递
- 梅毒螺旋体重组蛋白Tp0663前炎症活性的研究被引量：3
- 2013年
- 目的探讨梅毒螺旋体(Tp)重组Tp0663蛋白(rTp0663)潜在的前炎症活性并初步探讨可能参与激活的信号分子,为阐明Tp的致病机制提供依据。方法体外以不同剂量rTp0663以不同时间刺激THP-1细胞源性人巨噬细胞,ELISA分别检测其产生前炎症细胞因子IL-1β和IL-6的水平;以rTp0663刺激经抗TLR2、抗CD14、抗TLR2与抗CD14联合、NF-κB特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)处理后的巨噬细胞,检测其释放IL-1β和IL-6的水平。结果 rTp0663在一定范围内内以剂量和时间依赖方式显著诱导巨噬细胞产生IL-1β和IL-6,在3μg/mL刺激剂量和刺激24 h时达到高峰;Tp0663刺激经抗TLR2、抗CD14、抗TLR2与抗CD14联合、PDTC预处理后的巨噬细胞释放IL-1β水平分别下降至63.0%、69.0%、51.3%和15.8%,IL-6分别降至66.0%、71.0%、54.3%和18.7%。结论 rTp0663可通过TLR2和CD14激活NF-κB诱导THP-1源性人巨噬细胞产生前炎症细胞因子,Tp0663可能是Tp的一个重要的致病因子。
- 刘小军张跃军吴移谋赵飞骏刘双全姚玲曾铁兵
- 关键词：梅毒螺旋体前炎症细胞因子核因子KAPPA
- 梅毒螺旋体Tp0821基因的克隆、表达、纯化及免疫活性研究被引量：5
- 2010年
- 目的 构建梅毒螺旋体（Tp）膜脂蛋白Tp0821的重组质粒,表达、纯化其相应蛋白,研究其免疫活性.方法 构建重组质粒pQE32/Tp082l,诱导表达其相应蛋白,以纯化的重组蛋白免疫新西兰兔,制备多克隆抗体并测定其效价.建立间接ELISA法,检测80份梅毒参比血清、临床经FTA-ABS确诊的阳性血清各150份.结果 成功构建重组质粒pQE32/Tp0821,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析重组蛋白分子量与预期结果相符.将亲和层析后所获高纯度重组蛋白免疫新西兰兔,制备的多克隆抗体效价达1：6400.间接ELISA法检测梅毒参比血清、临床梅毒患者血清,与间接免疫荧光螺旋体抗体吸附试验（FTA-ABS）法比较,其灵敏度、特异度分别为92.6%和98.6%,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 Tp0821重组蛋白具有较好的免疫活性,可用于梅毒血清学检测.
- 伍宁肖勇健顾伟鸣刘双全赵飞骏张跃军吴移谋
- 关键词：重组蛋白质类免疫活性梅毒
- 梅毒螺旋体膜蛋白Tp0971激活MAPKs和NF-κB诱导巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β被引量：13
- 2019年
- 目的:探讨梅毒螺旋体(Tp)膜蛋白Tp0971诱导巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β的分子机制。方法:课题组前期表达的Tp0971重组蛋白为研究对象,将不同浓度的重组Tp0971刺激巨噬细胞,分别采用ELISA和实时定量PCR检测TNF-α和IL-1β的分泌及其mRNA的表达。采用Western blot检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs) p38,ERK1/2以及JNK1/2的磷酸化,并用相应的抑制剂处理观察TNF-α和IL-1β的变化。同时采用Western blot观察核转录因子κB(NF-κB)的核转位情况,并采用抑制剂处理观察其在介导TNF-α和IL-1β分泌中的作用。结果:ELISA结果显示,重组Tp0971能在0.5～10μg/ml剂量范围内诱导巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β。并能促进其mRNA表达,采用转录抑制剂放线菌素D(Act D)或翻译抑制剂放线菌酮(CHX)处理后,TNF-α和IL-1β的转录和分泌水平显著降低。Tp0971也可诱导p38,ERK1/2以及JNK1/2磷酸化,采用其相应的抑制剂处理后,TNF-α和IL-1β分泌明显减少。Western blot结果也显示Tp0971能诱导NF-κB p65亚基核转位,采用NF-κB抑制剂PDTC处理后,TNF-α和IL-1β分泌水平降低。结论:Tp0971激活MAPKs和NF-κB诱导巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β。
- 张跃军蒋传好肖鹏程刘佳强彭俊吴移谋
- 关键词：梅毒螺旋体膜蛋白白细胞介素-1Β
