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梅毒分子生物学实验诊断方法的研究进展被引量：4: 2010年; 梅毒的临床表现十分复杂,诊断主要依靠实验室检测方法。传统的梅毒实验室诊断方法暴露出诸多缺点,本文综述了国外一些分子生物学技术用于梅毒实验室诊断的方法(以基因工程重组抗原的血清学方法和聚合酶链反应)的研究进展。; 裴瑞青曾铁兵吴移谋; 关键词：梅毒重组抗原 PCR 分子生物学技术

梅毒螺旋体Tp0993重组蛋白的表达及鉴定被引量：2: 2010年; 目的表达、鉴定梅毒螺旋体(Tp)重组蛋白Tp0993(rTp0993),为进一步评价其在梅毒血清学诊断中的意义奠定基础。方法 PCR扩增去除信号肽核苷酸序列的Tp0993基因,构建原核重组体pET-28a/Tp0933并诱导表达蛋白;Ni-NTA法纯化重组蛋白,Western blot检测表达产物的抗原性。结果成功构建了原核重组体pET-28a/Tp0993,经诱导表达了一分子量大约为40 Ku的重组蛋白;Western blot结果显示纯化蛋白能被梅毒患者血清特异性识别。结论 rTp0993有较好的抗原性,为进一步研究其在梅毒血清学诊断中的作用奠定了基础。; 曾铁兵裴瑞青张跃军严加林刘双全赵飞骏吴移谋; 关键词：梅毒螺旋体梅毒血清学试验

白介素2与梅毒螺旋体膜蛋白Gpd双价核酸疫苗的免疫活性及保护作用研究被引量：1: 2011年; 目的探讨白介素2（IL-2）基因与梅毒螺旋体（Treponema pallidum，Tp）Gpd抗原编码基因融合构建双价核酸疫苗免疫新西兰兔后的免疫应答效果及感染Tp后的保护作用。方法定向克隆构建真核表达重组体pcDNA3．1（＋）／Gpd—IL-2，与先期构建的pcDNA3．1（＋）／Gpd真核表达重组体分别设为两个疫苗实验组，同时设pcDNA3．1（＋）空质粒对照组及PBS对照组，共4组，每组18只雄性新西兰兔，肌肉多点注射初次免疫，于初次免疫后第10周各实验组兔皮下接种Tp标准株进行感染实验，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测不同时间点免疫兔特异性抗体产生水平和脾细胞IL-2及干扰素γ（IFN-γ）诱导水平，噻唑蓝法检测兔脾淋巴细胞增殖水平。结果用pcDNA3．1（＋）／Gpd—IL-2融合双价疫苗和pcDNA3．1（＋），Gpd单基因疫苗在免疫期间和感染期间均能检测到高滴度的IgG特异性抗体，最高滴度分别可达1：4096和1：1024（P值均〈0．01）；两疫苗组之间在免疫及感染期间不同时间点比较差异也有统计学意义（P值均〈0．01）；免疫后第8周双价融合核酸疫苗组及单基因核酸疫苗组兔脾细胞培养上清中IFN-γ分别为（447±22．4）μg／L、（225±17．6）μg／L，IL-2分别为（167±15．7）μg／L、（110±12．6）μg／L，均高于空质粒对照组和空白对照组（P值均〈0．01）；感染期间不同时间点兔脾细胞受相应蛋白刺激均有明显增殖反应，检测指标均显著高于空质粒对照组和空白对照组（P值均〈0．01）。早期感染皮损观察显示双价融合核酸疫苗组较之单基因疫苗组有着更低的皮损Tp检测阳性率（17．5％）、溃疡病灶发生率（15％）以及更短的皮损愈合时间。结论用pcDNA3．1（＋）／Gpd—IL-2双基因融合疫苗在兔体内能更有效地诱导保护性体液免疫和细胞免疫应答。; 余坚赵飞骏张晓红顾伟鸣刘双全曾铁兵张跃军裴瑞青吴移谋; 关键词：GPD

梅毒螺旋体pcDNA3.1(+)/Gpd-IL-2真核重组体的构建、表达及其免疫活性研究: 赵飞骏吴移谋顾伟鸣余坚刘双全曾铁兵张跃军裴瑞青

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