施静
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市卫生局科研项目重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 炎症加重脂质诱导内质网应激致人肾小球系膜细胞损害的分子机制
- 目的:高脂血症是儿童原发性肾病综合征重要的病理生理改变之一,主要表现为血胆固醇和低密度脂蛋白的升高.本实验通过建立体外高脂模型，探讨高脂负荷下HMCs能否发生ERS及其具体的分子机制，并探讨炎症可否加重高脂介导的ERS为...
- 施静崔晶晶阳海平刘玮万俊丽王志铁邱桂霞李秋
- 关键词：原发性肾病综合征儿童患者炎症内质网应激分子机制
- 炎症加重脂质诱导内质网应激致人肾小球系膜细胞损害的分子机制
- <正>背景高脂血症是儿童原发性肾病综合征重要的病理生理改变之一,主要表现为血胆固醇和低密度脂蛋白的升高。脂代谢紊乱或持续的高脂血症,是肾脏损害的独立危险因素,终致肾小球硬化和肾间质纤维化。PNS患儿不仅有高脂血症、脂质代...
- 施静崔晶晶阳海平刘玮万俊丽王志铁邱桂霞李秋
- 文献传递
- 53例无症状小儿肾结石随访和预后分析被引量：3
- 2013年
- 目的：评估无症状小儿肾结石的中远期预后。方法：以我院泌尿系统超声筛查发现的75例无症状小儿肾结石为研究对象，其中三聚氰胺相关肾结石（melamine—associatedrenalcalculi，MARC）37例，非三聚氰胺肾结石（nonmelamine-associatedre—nalcalculi，NMARC）38例。随访28～45月（平均41月），通过泌尿系统超声和尿常规检查进行评估。结果：随访息儿53例，其中MARC患儿34例．NMARC患儿19例；结石自发排出率为58．49％（31／53）。婴幼儿，直径≤5mm结石最易自发排出；而3岁以上．直径≥10mm的结石自发排出率较低（P=0．003，P=O．000）。尿常规显示，41月后总体异常检出率为15．38％明显低于初诊时41．03％（P=-0．010）；其中MARC患儿蛋白尿全部消失，其缓解率高于NMARC患儿（P=-O．030）。结论：41月后无症状小儿肾结石自发排出率较高，结石直径和发病年龄是影响其排出的主要因素；总体预后良好，MARC患儿预后比NMARC相对较好；其长期预后尚需继续随访。
- 王志铁阳海平李秋吴道奇王荞刘俊宏崔晶晶施静万俊丽
- 关键词：小儿无症状肾结石随访预后
- IL-1β通过加重脂质诱导的内质网应激导致人系膜细胞损伤被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨白细胞介素1β(IL-1β)加重脂质诱导的内质网应激(ERS)而导致人肾小球系膜细胞(HMCs)损伤的分子机制。方法:将HMCs分为对照组、高脂组(LDL)、IL-1β+高脂组(IL-1β+LDL)及4-苯基丁酸(4-PBA)干预组(4-PBA+IL-1β+LDL)。油红O染色检测HMCs胞内脂质沉积;real-time PCR检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA水平;免疫细胞化学分析GRP78蛋白水平;Western blotting检测NF-κB p65水平;ELISA法测定细胞培养上清IL-6和TGF-β1含量。结果:与LDL组相比,IL-1β+LDL组胞内脂质沉积、GRP78 mRNA与蛋白水平、PERK mRNA水平、NF-κB p65水平及IL-6分泌量均显著增高(均P<0.05);4-PBA可减少胞内脂质沉积,降低GRP78 mRNA与蛋白及PERK mRNA水平,抑制NF-κB p65的表达,减少IL-6的分泌(均P<0.05 vs IL-1β+LDL组)。与LDL组相比,IL-1β+LDL组α-SMA mRNA表达增高(P<0.05),4-PBA可显著降低其表达(P<0.05 vs IL-1β+LDL组)。结论:IL-1β可加重脂质诱导的ERS,从而导致细胞损伤。
- 施静崔晶晶阳海平刘玮万俊丽王志铁邱桂霞李秋
- 关键词：炎症系膜细胞脂质沉积内质网应激
- 炎症状态下高脂介导的内质网应激在系膜细胞损伤中的作用及机制被引量：2
- 2013年
- 目的观察炎症状态下高脂介导的内质网应激在人肾脏系膜细胞(HMCs)损伤中的作用,并探讨高脂在肾脏损伤中的作用机制。方法体外培养HMCs,分为对照组、高脂组、炎症组、高脂+炎症组、高脂+炎症+4-苯基丁酸(4-PBA)干预组(4-PBA干预组),分别培养24、48和72h。用油红O染色观察HMCs胞内脂质沉积水平;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖变化;实时荧光定量PCR检测GRP78、纤连蛋白(FN)mRNA水平;免疫细胞化学半定量分析糖调节蛋白78(GRP78)蛋白水平。结果 (1)与对照组比较,高脂组、炎症组、高脂+炎症组HMCs胞内脂质沉积增多(P均<0.01),细胞增殖增快,且呈时间依赖性(P均<0.01),同时FN mRNA表达升高(P均<0.01);与高脂+炎症组比较,4-PBA干预组胞内脂质沉积减少(P均<0.01),细胞增殖减慢(P均<0.01),且FN mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01)。(2)与对照组比较,高脂组、炎症组、高脂+炎症组GRP78mRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);而4-PBA干预组GRP78mR-NA和蛋白表达较高脂+炎症组降低(P均<0.01)。(3)在24、48及72h,细胞脂质沉积水平与其增殖、GRP78蛋白及FN mR-NA水平均呈正相关(P均<0.01),GRP78蛋白表达水平与细胞增殖和FN mRNA水平呈正相关(P均<0.05)。结论炎症状态下,高脂可通过启动HMCs内质网应激致细胞损伤。
- 崔晶晶施静李秋阳海平刘玮
- 关键词：内质网应激肾小球系膜细胞高脂炎症
- 小鼠白细胞介素-17及其shRNA重组表达质粒的构建
- 2013年
- 目的构建小鼠白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)及其shRNA重组表达质粒。方法以小鼠脾脏细胞总RNA为模板,PCR扩增IL-17基因,并亚克隆至质粒pLVX-IRES-ZsGreen1,构建重组表达质粒pLVX-IL-17-IRESZsGreen1;设计并合成3对针对IL-17基因的shRNA序列和1对阴性对照shRNA序列,分别插入质粒pLVX-shRNA,构建重组干扰质粒pLVX-shRNA1、pLVX-shRNA2、pLVX-shRNA3和阴性对照质粒shRNAC,进行测序;用脂质体法将各重组干扰质粒分别与表达质粒共转染293T细胞,分为空白对照组、过表达组、shRNA1组、shRNA2组、shRNA3组和shRNAC组,经荧光定量PCR和ELISA法分别检测各组细胞中IL-17基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平。结果 PCR扩增获得500 bp的目的基因,IL-17重组表达质粒及其shRNA重组质粒经酶切及测序鉴定证明构建正确;重组表达质粒转染293T细胞48 h后可见绿色荧光表达;过表达组IL-17基因mRNA及蛋白表达水平均明显高于空白对照组(P均<0.05),shRNA1组、shRNA2组和shRNA3组IL-17基因mRNA和蛋白表达水平均明显低于shRNAC组(P均<0.05)。结论成功构建了小鼠IL-17基因重组表达质粒及其特异性shRNA表达质粒,并筛选出shRNA1,其对IL-17的表达具有最佳的抑制效应。
- 万俊丽李秋刘玮阳海平崔晶晶施静
- 关键词：白细胞介素-17短发夹RNA原发性肾病综合征
