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蛋白质组学在奶牛酮病研究中的应用探讨被引量：2: 2013年; 随着蛋白质组学技术理论的不断进步发展,蛋白质组学已逐渐成为后基因组学时代中生命科学领域研究的关键性技术,其理论和技术的发展为科学研究带来了新的思维。奶牛酮病是奶牛围产期重要营养代谢病之一,以机体机能障碍、代谢紊乱和产奶量降低等为主要临床特点。酮病不仅严重损害奶牛机体健康,也对畜牧业造成巨大的经济损失。文章主要对蛋白质组学的不同技术在奶牛酮病中的进一步研究进行阐述。; 孙玲伟张洪友夏成吴凌包凯李影李兰; 关键词：蛋白质组蛋白质组学奶牛酮病诊断标志物

三种激素疗法对奶牛持久黄体的治疗效果被引量：2: 2014年; 为了观测三种激素疗法对奶牛持久黄体的治疗效果,为临床应用提供借鉴。选用45头根据发情表现和直肠检查被诊断为持久黄体的奶牛,分别采用方法1(促黄体素、氯前列烯醇、促排三号)、方法2(氯前列烯醇)、方法3(促性腺激素释放激素)治疗持久黄体,每个方法 15头牛。通过检测治疗后奶牛血液中促黄体素(LH)、促卵泡素(FSH)、雌二醇(E2)、孕酮(P4)的激素水平,结合治疗效果,表明方法2(肌肉注射氯前列烯醇)对持久黄体的治疗效最好,治愈率最高为67%。; 李兰张洪友夏成于永忠吴晨晨包凯李影; 关键词：奶牛持久黄体生殖激素激素疗法

奶牛酮病的血浆代谢组学分析: 引言奶牛酮病是一种原发性或继发性且多发于泌乳早期的代谢性紊乱性疾病。酮病因造成奶牛生产性能、繁殖性能下降,给奶牛场来了巨大损失,而受到奶牛养殖业的高度重视。目的通过应用生物核磁共振技术结合多元统计分析方法,分析奶牛在患有...; 孙玲伟张洪友夏成包凯李兰李影; 关键词：酮病

代谢组学平台在兽药检测中的研究应用评价被引量：2: 2014年; 随着兽药在畜牧生产上的广泛应用及人们对食品安全的要求,兽药分析技术已成为迫切需求,并取得较大的发展。代谢组学是一门新兴的学科,是研究生物体系因不同条件因素而影响内源性代谢物变化的研究平台。通过对该技术的综述,旨在较深入了解兽药残留检测样品分离、纯化技术及确证技术的现状和发展趋势。; 孙玲伟包凯张洪友夏成李影李兰; 关键词：代谢组学兽药

围产期奶牛钙、磷代谢障碍调查研究被引量：6: 2014年; 对黑龙江两个规模化奶牛场围产期奶牛钙、磷情况进行了调查研究。通过对不同时间点奶牛血浆钙、磷浓度的检测,两个牛场分娩当天低血钙发病率分别为90.32%和80.95%。; 金锡山舒适夏成李昌盛钱伟东李兰; 关键词：围产期奶牛钙磷代谢障碍

奶牛孕酮单克隆抗体的制备及其鉴定被引量：2: 2015年; 国内外研究表明通过对奶牛血液及乳汁中孕酮水平的检测能有效的用于奶牛发情鉴定、妊娠诊断及繁殖障碍性疾病的监测。本研究旨在制备鼠抗孕酮单克隆抗体,为奶牛孕酮免疫学检测技术提供研究基础。实验采用碳化二亚胺方法合成孕酮完全抗原,经SDS-PAGE电泳及紫外分光光度计扫描鉴定,结果表明孕酮免疫抗原(P4-BSA)及检测抗原(P4-OVA)合成制备成功。乳化后的P4-BSA经皮下免疫小鼠,三免后血清效价可达到1∶64000。采用聚乙二醇化学融合方法进行细胞融合,间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株,最终获得一株能稳定分泌Ig G1型抗孕酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株,诱生的腹水经辛酸硫酸纯化制备,抗体的特异性较好。; 李兰张洪友夏成于永忠魏玉华高阳钱伟东牛聪; 关键词：孕酮抗原制备单克隆抗体腹水

过瘤胃脂肪对泌乳早期奶牛生产性能和能量代谢的影响被引量：12: 2013年; 为了解过瘤胃脂肪预防奶牛泌乳早期能量负平衡的效果和作用机制,随机选取产后10～15 d,年龄、胎次、产奶量相近,年产奶量大于6t的荷斯坦奶牛24头,随机分为4组,每组各6头。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础日粮精料中每头每天添加过瘤胃脂肪200、300和400 g,连续饲喂20 d,试验Ⅳ组为对照组,不添加过瘤胃脂肪。测定饲喂前1 d、饲喂后10 d和20 d的干物质摄入量、产奶量及血液代谢产物(葡萄糖、β-羟丁酸、游离脂肪酸、尿素氮、总胆固醇和甘油三酯)和激素(胰岛素、瘦素和胰高血糖素)等指标。结果:与对照组比较,各试验组干物质摄入量无显著变化(P>0.05),Ⅲ组产奶量极显著升高(P<0.01);与对照组比较,Ⅲ组血糖浓度显著升高(P<0.05),Ⅰ组血浆胰高血糖素水平显著升高(P<0.05);血浆游离脂肪酸、甘油三酯、总胆固醇、尿素氮和瘦素变化均不显著(P>0.05)。试验表明,过瘤胃脂肪不仅能提高奶牛泌乳性能,而且能提高血糖水平,从而改善奶牛的能量负平衡,以400 g过瘤胃脂肪添加效果最好。; 李兰李徐延李影张洪友夏成徐闯郑家三; 关键词：奶牛过瘤胃脂肪能量代谢

奶牛酮病的血浆代谢组学分析被引量：9: 2013年; 应用生物核磁共振技术结合主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析法(OPLS-DA)分别分析奶牛在患有临床酮病和亚临床酮病时内源性代谢产物的变化,研究酮病对奶牛代谢过程的影响,寻找差异表达的代谢物。运用1 H核磁共振(1 H NMR)技术获得临床酮病组、亚临床酮病组与健康对照组3组奶牛血浆代谢组谱。所采集的数据经过模式分析获得差异代谢物。结果显示:临床酮病组、亚临床酮病组与健康对照组相比,差异性代谢物均为23个,其中临床酮病组6个表达上调,17个表达下调;而亚临床酮病组13个表达上调,10个表达下调。临床酮病组与亚临床酮病组相比,差异性代谢物为28个,其中4个表达上调,24个表达下调。结果表明1 H NMR谱结合模式识别分析技术能有效获得区别奶牛临床酮病和亚临床酮病的差异代谢物,并全景式地揭示了酮病发生过程中机体发生的广泛代谢紊乱,为今后深入探究酮病发生机理和新的防治策略奠定了基础。; 孙玲伟张洪友夏成包凯李兰李影; 关键词：NMR 代谢组学酮病

奶牛临床和亚临床酮病的血浆代谢组学研究被引量：19: 2014年; 【目的】基于代谢组学的气相色谱(GC)/质谱(MS)联用技术分析临床酮病、亚临床酮病和健康的奶牛血浆代谢谱,观察奶牛体内代谢产物的变化,寻找内源性代谢分子标记物,用于发现奶牛临床和亚临床酮病的早期诊断及病情进展的特征生物标志物,并阐明该病发病机制。【方法】收集临床酮病奶牛血样24例,亚临床酮病奶牛33例,健康对照组奶牛23例,静脉采集试验奶牛血液,分离血浆,检测其β-羟丁酸、血糖等生化指标。将血浆样品预处理后,运用GC/MS联用技术检测各组奶牛血浆代谢产物,利用质谱数据库对其进行鉴定。采用主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘判别分析法(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)等多元统计方法对临床酮病组、亚临床酮病组和健康对照组奶牛检测数据进行模式识别分析。通过PLS-DA方法建立疾病诊断模型后,筛选潜在的疾病生物标记物。【结果】以80例奶牛血浆样品为分析对象,研究建立了内源性代谢物谱的GC/MS分析方法,并利用NIST(2008)商业质谱数据库对检测到的代谢物进行快速鉴定,共检测出267个变量。将代谢组数据导入SIMCA-P软件进行主成分分析和偏最小二乘法判别分析,代谢组数据可将患病组与健康组分别聚类区分,并且寻找到组间种类无差别代谢物为40种。结果显示与对照组相比,临床和亚临床酮病的差异代谢物均为32个,临床酮病与亚临床酮病组相比有13个差异代谢物。通过查找KEGG数据库,对代谢物进行分析,这些代谢物主要与氨基酸代谢、脂肪代谢和碳水化合物代谢等能量代谢途径相关。【结论】基于代谢组学的GC/MS技术对酮病奶牛血浆进行检测,并结合多元统计分析,共在临床、亚临床酮病和健康组之间发现40种代谢物(主要为脂肪酸,氨基酸和碳水化合物等物质)。证明奶牛血浆样品的GC/MS代谢谱可以有效地�; 孙玲伟包凯李影李兰张洪友夏成吴凌; 关键词：气相色谱代谢组学酮病

孕酮ELISA试剂盒在牛奶乳汁检测中的初步应用被引量：8: 2015年; 本实验利用自建的奶牛乳汁孕酮竞争ELISA法（酶标抗原法）研发了奶牛乳汁孕酮ELISA试剂盒。通过对试剂盒的特异性、灵敏性、重复性、稳定性和回收率等主要性能进行优化试验。结果表明：试剂盒可以在4℃条件下保存9个月,与睾酮、雌三醇、雌二醇无特异性反应,灵敏度为0.14 ng/mL,批内差异为4.11%,批间差异为6.26%,回收率为93.80%~107.60%,变异系数为5.65%。应用该试剂盒检测乳汁孕酮诊断奶牛妊娠与未妊娠的准确率分别为93.3%和95.8%。因此,该试剂盒性能良好,妊娠诊断效果理想,为今后在奶牛生产中的广泛应用奠定基础。; 吴凌高维明张洪友徐闯李兰; 关键词：奶牛乳汁孕酮 ELISA试剂盒

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李兰

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