李旻
- 作品数：10 被引量：56H指数：5
- 供职机构：云南出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技支撑计划云南省应用基础研究计划面上项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 火把梨14-3-3基因的克隆与序列分析被引量：6
- 2012年
- 依据火把梨(Pyrus pyrifolia Nakai)14-3-3蛋白的EST序列设计基因特异引物,采用快速扩增cDNA末端技术(Rapid amplification of cDNA ends,RACE),从云南火把梨中克隆一个新的14-3-3基因(Pp14-3-3)的全长cDNA序列。Pp14-3-3全长cDNA为1 107 bp,具有84 bp 5'非编码区(Untranslated Regions,UTR)、786 bp开放读码框(Openreading frame,ORF),以及237 bp 3'UTR,编码含261个氨基酸的蛋白质。Pp14-3-3与其他物种14-3-3蛋白在中间功能区域高度保守,包含典型的14-3-3结构域。与已知植物14-3-3s家族成员间的氨基酸序列进行聚类分析,将Pp14-3-3聚为非ε大类14-3-3。Pp14-3-3在火把梨接受光照和没有光照的果皮以及幼嫩叶片中大量表达,且表达量稳定。对Pp14-3-3的基因克隆以及表达特性进行了分析,为后期深入研究该新基因的功能奠定了基础。
- 王光勇刘迪秋李旻饶健孙兵召丁元明
- 关键词：RACERT-PCR
- 菊花上2种病毒的检测及其部分外壳蛋白基因序列分析被引量：4
- 2012年
- 采集昆明地区花卉基地和公园的269份菊花样品,调查并分析侵染菊花的番茄不孕病毒(Tomatoaspermy virus,TAV)和菊花B病毒(Chrysanthemum virus B,CVB)的发病状况。ELISA和RT-PCR检测结果表明,TAV和CVB在菊花植株上的发病率分别为4.62%和16.70%。对3个TAV分离物和8个CVB分离物的外壳蛋白(coat protein,CP)基因的部分序列进行测定,并分别与GenBank登录的TAV和CVB序列进行比对和系统进化分析,结果显示各TAV分离物的CP基因核苷酸序列同源性为85.04%～98.02%。在系统进化树中聚集的2个簇中,昆明分离物都在同一簇。CVB的CP基因存在较明显的序列变异,核苷酸序列同源性为75.09%～84.99%,在系统进化树中聚为3个簇,昆明分离物均集中在同一簇。
- 雷强李旻丁元明王云月
- 关键词：菊花番茄不孕病毒外壳蛋白基因系统进化分析
- 兰花上凤仙花坏死斑病毒和建兰花叶病毒双重RT-PCR检测方法的建立被引量：3
- 2009年
- 根据凤仙花坏死斑病毒(Impatiens necrotic spot virus,INSV)和建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CyMV)的保守序列设计特异性引物,建立了双重RT-PCR同时检测两种病毒的方法。用该方法对兰花基地的可疑发病兰株进行检测,结果从田间采取的12株可疑兰花中有6株检出INSV,1株检出CyMV,2株同时检出两种病毒。
- 丁元明张巧萍王云月李旻周剑白永华段禄华和万忠
- 关键词：凤仙花坏死斑病毒建兰花叶病毒
- 盆栽文心兰上的凤仙花坏死斑病毒的检测与分子鉴定被引量：5
- 2008年
- 应用酶联免疫吸附检测法(ELISA)和RT-PCR技术从表现有同心圆褪绿斑的进境盆栽文心兰上检测出凤仙花坏死斑病毒。ELISA检测发现该病毒在文心兰上分布不均匀,病毒主要集中在表现症状的病斑处。同时,根据该病毒SRNA上的核衣壳蛋白(N)基因序列保守区设计了一对特异性引物,利用RT-PCR方法检测得到500bp的预期DNA片段。经HindIII和EcolI酶切验证后克隆了该序列片段,序列分析结果表明该病毒的N基因序列和已经发表的凤仙花坏死斑病毒(登陆号为AB109100、AB207803、DQ425096)核苷酸序列同源性为99%,进一步确认进境盆栽文心兰上携带凤仙花坏死病毒。这是INSV首次在中国的报道,也是第一次在文心兰上发现该病毒。
- 张巧萍丁元明李旻周键白永华寸东义曹云华
- 关键词：文心兰RT-PCR
- 玉米致死性坏死病研究进展被引量：6
- 2011年
- 玉米致死性坏死病是由2种病毒协生作用产生的。目前仅在玉米植株上有相关报道,被我国列入进境植物检疫性有害生物名录。从生物学特性、检测方法和防治等方面对相关病毒作了阐述。我国相关部门应尽快建立相关病毒快速、准确和有效的检测方法,保障我国农业生产安全。
- 于洋何月秋李旻丁元明
- 植物nrDNAITS假基因研究进展被引量：2
- 2013年
- 核核糖体DNA内转录间隔区(nrDNA ITS)被广泛应用于植物系统发育研究中。近年来,发现在很多植物类群中存在ITS假基因(pseudogenes),然而这些假基因在系统发育分析中的潜在价值往往被低估,甚至在部分研究中被忽略。主要介绍假基因的生成、特性以及ITS假基因在植物系统学中的应用,并对ITS假基因的研究前景进行展望。
- 尤欢周阿涛岳亮亮寸东义李旻丁元明
- 关键词：ITS假基因进化
- 类甜蛋白的结构特征以及功能研究进展被引量：11
- 2010年
- 类甜蛋白是一种具有多种生物学活性及重要功能的植物防御蛋白,属于病程相关蛋白。近年来关于类甜蛋白具有抗真菌活性的研究较多。类甜蛋白具有葡聚糖酶活性,能结合并降解真菌细胞壁的组成成分—β-1,3葡聚糖酶。在三维晶体结构中类甜蛋白表面的一个酸性"V"字形裂缝对其抗真菌活性起着至关重要的作用。对类甜蛋白结构与功能的关系,不同植物中类甜蛋白的生物学特性,以及国内外基因工程中类甜蛋白基因的应用研究进展进行了综述。
- 李文娴刘迪秋丁元明葛锋李旻王光勇
- 关键词：病程相关蛋白
- 云南山茶(Camellia reticulata)nrDNA ITS序列多态性分析被引量：13
- 2013年
- 对云南山茶(Camellia reticulata)8个品种的核核糖体DNA内转录间隔区(nrDNA ITS)进行克隆测序,将获得的ITS序列进行GC含量、5.8S区二级结构的稳定性、替代模式、核苷酸多样性及系统发育关系的相关分析。实验结果显示,云南山茶8个品种的ITS序列存在丰富的基因组内多态性,同时包含中性进化的假基因,表明其ITS序列逃离了一致性进化。云南山茶ITS序列多态性的原因可能来自广泛的种间杂交,以及rDNA位点在基因组中有不确定的物理位置。ITS假基因为品种的物种形成研究提供了更全面的遗传证据,同时也提示了利用ITS假基因进行系统发育分析可能会对其真实的系统关系造成影响。
- 周阿涛岳亮亮李旻刘迪秋丁元明
- 关键词：云南山茶NRDNAITS多态性假基因
- 泰国进口玉米种子玉米褪绿斑驳病毒的检测被引量：8
- 2013年
- 采用DAS-ELISA对从泰国进口的6个玉米品种的种子进行玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus,MCMV)检测,结果显示其中1个样品为MCMV阳性,其他品种为阴性。RT-PCR检测结果进一步证实该样品为阳性。对PCR产物进行测序,将分离物序列与已发布的23条MCMV序列进行比对和系统进化分析,结果表明该分离物的序列与中国分离物和泰国分离物的遗传距离较近,同分化在进化树的同一个簇。取5号样品的100粒种子进行DAS-ELISA检测,结果仅有2粒种子为阳性,即MCMV的检出率为2%。
- 雷屈文李旻丁元明王云月
- 关键词：玉米种子
- 基于抗原表位烟草环斑病毒单克隆抗体的制备被引量：1
- 2012年
- 基于多种生物信息学软件综合预测烟草环斑病毒(TRSV)外壳蛋白抗原表位所在的结构域,明确了该外壳蛋白抗原表位可能位于C端319～328、384～388、420～430、480～487、495～511位氨基酸残基附近。通过RT-PCR扩增出了目的片段,构建了TRSV外壳蛋白原核表达载体,表达的TRSV外壳蛋白外源融合蛋白具免疫活性。采用杂交瘤细胞技术,利用外源融合蛋白制备了单克隆抗体,制备的抗血清可与TRSV外壳蛋白基因原核表达产物发生免疫反应。检验结果表明,制备的抗血清具较好的特异性,可应用于TRSV的检疫检验。
- 秦绍钊何月秋李旻雷屈文王光勇丁元明
- 关键词：烟草环斑病毒抗原表位原核表达融合蛋白单克隆抗体
