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李晓艳: 作品数：44 被引量：175H指数：6; 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>; 发文基金：吉林省科技厅科技发展计划项目国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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RNA干扰的作用机制及应用前景被引量：3: 2006年; RNA干扰是将双链RNA导入细胞引起特异基因mRNA降解的一种细胞反应过程,涉及多种蛋白质共同参与。此干扰机制可在转录、转录后和翻译水平上实现。转录水平上的干扰机制是通过对靶基因染色质结构的改变,使其基因转录受限,导致表达系统的关闭。翻译水平上的干扰机制,是通过抑制相应mRNA的翻译,使相应的蛋白质表达受阻。转录后水平则包括siRNA形成阶段和扩增循环阶段。siRNA形成阶段即外源性或内源性dsRNA通过Argonaute家族基因编码的蛋白质的识别,进一步诱导双链RNA与Dicer结合。扩增循环阶段即特异性siRNA与靶mR-NA结合后,没有被活性酶切割、降解;而是以siRNA中的一条链为引物,以靶mRNA为模板,在RNA依赖的RNA聚合酶的作用下,延伸形成新的双链RNA,被Dicer内切酶或相关酶切割为新的21 nt^23 nt siRNA。随着RNA干扰技术的不断进步,RNA干扰可广泛地应用到抗病毒,肿瘤治疗,药物靶点筛选以及免疫性疾病治疗等方面。; 唐景峰李晓艳王兴龙; 关键词：RNA干扰

环丙沙星单克隆抗体制备、纯化及鉴定被引量：6: 2008年; 目的:制备抗环丙沙星单克隆抗体。方法:用碳二亚胺(EDC)法合成的环丙沙星-牛血清白蛋白完全抗原(CPFX-BSA)免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术筛选分泌抗环丙沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果:筛选出3株分泌抗环丙沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞株1D10、3C6和3G7,其抗体类型分别为IgM、IgG1和IgG1。其中3C6腹水抗体纯度、抗体浓度、亲和常数分别为80.04%、3.96 g/L和1.01×108L/mol。该单抗与恩诺沙星、诺氟沙星的交叉反应率分别为125.89%、19.50%,与青霉素、卡那霉素和庆大霉素等无交叉反应。结论:该单抗可用于动物性食品中CPFX残留ELISA检测方法的建立。; 李岩松周玉万忠海李晓艳谭建华; 关键词：单克隆抗体

羊布氏菌SOD基因重组酿酒酵母菌株的构建及鉴定: 2011年; 目的构建羊布氏菌超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)基因重组酿酒酵母菌株,并进行鉴定。方法 PCR扩增羊布氏菌16M株SOD基因,与psos载体连接,构建重组表达质粒psos-SOD,转化酿酒酵母菌cdc25H,并进行PCR鉴定、表型验证、自激活及定位情况检验。结果重组真核表达质粒psos-SOD经双酶切和测序证明构建正确;重组酵母菌经PCR可扩增出525 bp的SOD基因条带,其表型正常,无自激活宿主菌的作用,表达蛋白定位正确。结论已成功构建了羊布氏菌SOD基因重组酿酒酵母菌株,为研究布氏菌致病的分子机制奠定了基础。; 王景龙屈海龙杨延玲孙春辉王秀然郎需龙李晓艳卜昭阳王兴龙; 关键词：超氧化物歧化酶

新城疫病毒TL1株P基因的克隆及序列分析: 2007年; 根据GenBank登陆的新城疫病毒P基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR技术对新城疫病毒内蒙古分离株TL1的P基因进行了扩增。将扩增产物提纯后克隆入pGEM-Teasy载体,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确。测序拼接得出P基因的序列长度为1248bp,该基因的ORF总长为1188bp,编码395个氨基酸。与GenBank下载的12株参考毒株比较P基因编码区全核苷酸序列和氨基酸序列,发现TL1株与鹅源新城疫NA-1株核苷酸的同源性为99.8%,氨基酸的同源性为99.2%;与鹅源新城疫ZJ1株核苷酸的同源性为96.1%,氨基酸的同源性为95.5%,说明TL1株和与鹅源新城疫NA-1株、ZJ1株的同源性极高,它们三者亲缘关系较近,同属于基因VII型新城疫病毒。而与传统疫苗株LaSota核苷酸的同源性为83.4%,氨基酸的同源性81.8%,说明该毒株相对于经典的NDV在P基因上已发生了较大的变异。; 王学理王兴龙李晓艳任林柱张辉闫广谋; 关键词：新城疫病毒 P基因

动物布鲁氏菌抗原胶体金试纸膜检测试剂盒: 本发明公开一种动物布鲁氏菌抗原胶体金试纸膜检测试剂盒，根据抗原抗体能特异结合的免疫学基本原理，利用胶体金免疫层析技术和银染加强技术，以重组的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)作为金标抗体，以高纯度的布鲁氏菌LPS作为包被抗原...; 王兴龙李晓艳唐景峰梅建军; 文献传递

新城疫病毒TL1株L基因的克隆及其真核表达载体的构建: 2007年; 目的对新城疫病毒TL1株L基因进行克隆、序列分析及真核表达载体构建。方法根据GenBank登录的新城疫病毒L基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR对内蒙古分离株TL1的L基因进行整体扩增。将扩增产物提纯后,克隆入pGEM-Teasy载体,再亚克隆至真核表达载体pCI-neo上,通过酶切、PCR鉴定及测序进行验证。结果测序拼接得出L基因的全序列长度为6704bp,该基因的ORF总长为6615bp,编码2204个氨基酸。与GenBank登陆的12株参考毒株比较L基因编码区全核苷酸序列和氨基酸序列,发现TL1株与鹅源新城疫NA-1株、ZJ1株和SF02株的同源性极高,说明四者亲缘关系较近。结论已成功构建L基因真核表达载体,为对该株病毒进行反向遗传操作以及有关功能基因组研究奠定了基础。; 王学理王兴龙李晓艳任林柱刘锴; 关键词：新城疫病毒克隆真核表达

猪链球菌二型的研究与防治: 猪链球菌二型是一种新发的人兽共患传染病,给国内外的养猪业都曾带来巨大的损失,并引起高度关注。本文较为完整的综述了国内外学者对该菌的研究成果,其中主要包括毒力因子的发现、猪链球菌二型病的防治等。; 王英超王兴龙党源郎需龙李晓艳; 关键词：猪链球菌病毒力因子; 文献传递

单增李斯特菌ActA的表达与免疫原性研究被引量：1: 2008年; 目的:研究单增李斯特菌ActA原核表达产物的免疫原性。方法:构建原核表达载体pGEX-3X/ActA,IPTG诱导表达并进行SDS-PAGE与Western blot分析,GST亲合层析纯化蛋白,免疫小鼠,检测小鼠体内特异性抗体水平,脾淋巴细胞增值活性及T淋巴细胞亚群,评价表达蛋白的免疫原性。结果:在大肠杆菌中表达了融合蛋白并获得了纯度较高的ActA;免疫小鼠在免疫后7周效价达到高峰,以后逐渐下降;免疫组的脾淋巴细胞增殖活性显著高于对照组(P<0.05);免疫组CD3+细胞、CD4+细胞、CD4+/CD8+比对照组分别增加了17.14%、18.03%、32.67%,CD8+细胞降低了12.38%。结论:ActA诱导了特异性体液免疫和细胞免疫。; 张辉王兴龙李晓艳张爱玲张付贤崔丽瑾卜昭阳; 关键词：单增李斯特菌 ACTA 免疫原性

动物布鲁氏菌抗原胶体金试纸膜检测试剂盒: 本发明公开一种动物布鲁氏菌抗原胶体金试纸膜检测试剂盒，根据抗原抗体能特异结合的免疫学基本原理，利用胶体金免疫层析技术和银染加强技术，以重组的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)作为金标抗体，以高纯度的布鲁氏菌LPS作为包被抗原...; 王兴龙李晓艳唐景峰梅建军; 文献传递

四环素及β-内酰胺耐药性基因芯片的制作及优化: 2010年; 目的优化四环素及-内酰胺耐药性基因芯片制作和杂交条件。方法设置多组实验,逐一改变影响寡核苷酸在玻片表面固定及芯片杂交效率的实验条件,从中优化出芯片实验的最佳条件。结果得出的最佳条件是:探针以30pmol/μL的终浓度溶于50%二甲基亚砜中,在温度为20℃、湿度70%的条件下点制在基片上;荧光探针纯化后使用2×杂交液在42℃湿盒中杂交5h。结论优化出了耐药基因芯片制作和杂交的最佳条件,总结出芯片制作优化的方法。; 路浩王兴龙李晓艳郎需龙王瑞红张付贤闫广谋李研东; 关键词：基因芯片

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