王家旺
- 作品数：18 被引量：66H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院植物保护研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 银染色测定粘虫核多角体病毒多角体基因序列被引量：1
- 1995年
- LsMNPV DNA用EcoRV酶切进行基因组克降,用AcMNPV的部分多角体基因顺序DNA片段作探针,菌落原位杂交法结合测序筛选到分别含LsMNPV部分多角体基因的重组质粒pLsEV1和pLsPH5。用银染色PCR线性扩增双脱氧法测序,发现LsMNPv的完整基因即位于这两个片段上。LsMNPV多角体基因长741bp,编码区碱基同源性与AcMNPV和MbMNPV分别为80.0％和97.0％,氨基酸同源性分别为89.8和97.5％。氨基酸组成中以谷氨酸(Glu)含量最高,谷氨酰胺和色氨酸含量最低。密码子选用以第三个碱基为嘧啶的密码子频率最高。多角体蛋白N端有一类似信号肽结构的26个氨基酸的疏水区。
- 王家旺黄永秀齐义鹏杨复华
- 关键词：粘虫核型多角体病毒昆虫病毒
- 昆虫杆状病毒衣壳主蛋白基因的PCR扩增、克隆和定位被引量：2
- 1994年
- 用ＰＣＲ技术成功地扩增了苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒（ＡｃＮＰＶ）的衣壳主蛋白基因（ｖｐ３９基因），并克隆了该基因，利用纯的ｖｐ３９基因探针，在低严谨杂交条件下，已将粘虫核型多角体病毒（ＬｓＮＰＶ）的ｖｐ３９基固定位在ＰｓｔＩ－Ｆ，ＢａｍＨＩ－Ｃ，ＥｃｏＲＩ－Ｃ，ＸｈｏＩ－Ｄ，Ｉ，ＥｃｏＲＶ－Ｈ，Ｘ等片段上。ＰＣＲ反应时，在扩增出预期的包括完整ｖｐ３９基因的１４０６ｂｐ片段的同时也扩增出一条Ｃａ．４００ｂｐ的片段，本文讨论了ＰＣＲ的特异性扩增和非特异性扩增。
- 王家旺黄永秀谭业平李寿东齐义鹏
- 关键词：昆虫杆状病毒基因
- 生物农药EXTN-1防治蔬菜病害的效果
- 生物农药EXTN-1是由韩国农业微生物研究所研制的具有促进植物生长和防病效果的微生物制剂,其有效组分是从辣椒根际分离到的死谷芽孢杆菌(Bacillus vallis mortis).目前,生物农药EXTN-1得商业化产品...
- 葛蓓孛刘艳刘炳花陈菲菲邢亚楠王家旺张克诚
- 关键词：生物农药灰霉病
- 粘虫核型多角体病毒919bp片段的PCR双链直接序列测定
- 1998年
- 本文发展了ＰＣＲ克隆和亚克隆技术制备ＤＮＡ测序模板。首先，我们用ｐＵＣ／Ｍ１３系列质粒的通用正反向引物ＰＣＲ扩增出质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＫＳＤＮＡ的多克隆位点及其侧翼序列，用ＥｃｏＲＶ和ＸｈｏＩ消化成为左右两个引物多克隆臂，与粘虫核型多角体病毒（ＬｓＮＰＶ）的ＥｃｏＲＶ和ＸｈｏＩ约４００ｂｐ和５００ｂｐ片段分别连接，经ＰＣＲ扩增，得到两端具有上述正反向引物结合位点的测序模板，用ｄｄＮＴＰ链终止法／ＰＣＲ扩增／银染色，从片段两端测定了全部９１９ｂｐ序列，这种ｄｄＮＴＰ／ＰＣＲ／银染测序法简化了操作，大大缩短了测序模板的制备时间，易于实现自动化操作。
- 齐兵王家旺修建文黄永秀齐义鹏
- 关键词：PCR克隆粘虫核型多角体病毒
- 杆状病毒早期基因的结构与功能被引量：6
- 1995年
- 杆状病毒早期基因的结构与功能王家旺，齐义鹏（武汉大学病毒学研究所武汉４３００７２）在感染的昆虫细胞中，杆状病毒基因的表达和ＤＮＡ的复制是级联式的￣［１，２］。用受染细胞脉冲标记的特异性蛋白、蛋白质合成抑制剂（如放线菌酮）和ＤＮＡ复制抑制剂（如Ａｐｈｉ...
- 王家旺齐义鹏
- 关键词：杆状病毒早期基因
- 武夷菌素产生菌CK-15中转录调控因子wysR3的功能研究被引量：2
- 2015年
- wys R3是武夷菌素产生菌Streptomyces ahygroscopicus var.wuyiensis CK-15中可能的调控因子。为了验证wys R3是否参与武夷菌素生物合成基因的转录调节,构建了用于过表达wys R3的基因重组质粒p SETC-R,并通过接合转移的方法转化至武夷菌素产生菌S.wuyiensis CK-15中,构建过表达菌株。过表达菌株生长速度明显缓慢;通过摇瓶发酵和HPLC检测分析发现,武夷菌素产量与野生型菌株相比没有发生明显变化;DNS法测定发酵液中糖含量也没有发生明显变化,说明该基因与武夷菌素的产量和糖含量在该种条件下没有直接关系,但是影响菌株表型生长。
- 刘彦彦葛蓓孛孙蕾王家旺张克诚
- 关键词：武夷菌素基因功能表型鉴定
- 粘虫核型多角体病毒多角体蛋白基因结构和序列的研究
- 1998年
- 测定了粘虫核型多角体病毒（Ｌｅｕｃａｎｉａｓｅｐａｒａｔａｎｕｃｌｅａｒｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓｖｉｒｕｓ，ＬｓＮＰＶ）两个ＥｃｏＲＶ片段的共１２０１ｂｐ序列，发现了一个７１４ｂｐ的开放阅读框（ＯＲＦ），根据其与多种ＮＰＶ多角体蛋白基因（ｏｃｕ）同源性的比较和５＇端典型的１４ｂｐ保守序列，说明此ＯＲＦ即为ＬｓＮＰＶ的ｏｃｕ基因。根据核苷酸序列预测的多角体蛋白有２４６个氨基酸，其中酸性和碱性氨基酸数相等，疏水氨基酸含量很高，氨基酸组成中以谷氨酸（Ｇｌｕ）含量最高，谷氨酰胺和半胱氨酸含量最低。编码区碱基同源性与ＭｂＮＰＶ最高，为９７．０％；氨基酸同源性与ＭｂＮＰＶ最高，为９７．５％。密码子偏爱选用以第三个碱基为嘧啶的密码子。二级结构分析表明，α－螺旋（Ｈ）和β－折叠（Ｓ）相等，β－转角含量是Ｈ和Ｓ含量之和。
- 王家旺齐义鹏
- 关键词：粘虫核型多角体病毒多角体蛋白基因
- 多角体蛋白的结构多样性和杆状病毒的进化研究被引量：9
- 1997年
- 在测定LsMNPV多角体蛋白基因的全序列并推导出多角体蛋白氨基酸顺序的基础上,与22种杆状病毒多角体蛋白的氨基酸顺序进行比较,以氨基酸变异曲线研究蛋白质一级结构中氨基酸的保守性,并推测出一个模式多角体蛋白(MPh)氨基酸顺序;用PROSIS软件对MPh及其它5种代表性病毒的多角体蛋白进行了氨基酸亲水性分析,还对24种多角体蛋白的二级结构作出了推测,指出了特征性结构区与氨基酸高变区、亲水区多样性变化的相互关系;通过多角体蛋白间氨基酸顺序最大同源性分析,绘制了23种杆状病毒的系统进化树,进一步讨论了MPh氨基酸顺序的典型性及多角体蛋白所体现的杆状病毒多样性和宿主依赖性进化。
- 刘子夜齐义鹏王家旺黄永秀
- 关键词：昆虫病毒杆状病毒多角体蛋白进化
- 杆状病毒基因前导小顺反子的序列特征及其翻译衰减调控模型
- 1997年
- 在杆状病毒许多基因的ｍＲＮＡ前导序列中存在一类小顺反子（Ｍｉｎｉｃｉｓｔｒｏｎ）结构．发现某些昆虫基因和苜蓿尺蠖核型多角体病毒的基因在密码子的使用偏向上各不相同．而小顺反子一般偏向于使用少数密码子，具有重复密码子．小顺反子与大顺反子同框；多数小顺反子的ＡＴＧ上下游符合Ｋｏｚａｋ序列；有的小顺反子起始密码子后紧跟着就是终止密码子．这些特征暗示小顺反子可能是一类独特的有别于其它杆状病毒基因而具有特殊功能的“基因”．小顺反子的作用可能与原核生物氨基酸衰减调控子Ａｔｅｎｕａｔｏｒ有相似之处，但它不是在转录水平，而在翻译水平上减弱其后大顺反子的表达．
- 齐兵王家旺齐义鹏
- 关键词：杆状病毒
- 一株生物农药武夷菌素的高产菌株W-273及其应用
- 本发明公开了一株武夷菌素高产菌株及其应用。本发明所提供的武夷菌素高产菌株具体为不吸水链霉菌武夷变种(Streptomyces ahygroscopicus var.wuyiensis)W-273，它在中国微生物菌种保藏管...
- 葛蓓孛张克诚王家旺刘艳刘炳花
