黄永秀
- 作品数：35 被引量：79H指数：5
- 供职机构：武汉大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 由pBR322缺失重组构建的一个小质粒的结构特征
- 1991年
- 我们在构建昆虫杆状病毒转移载体的过程中,发现了一个小质粒pQS145,其长2.0 kb,拷贝数很高,有EcoR I、Pst Ⅰ单一位点和3个Hinf Ⅰ位点,有抗氨苄青霉素基因,能与pBR 322探针杂交。用双酶消化法构建了此质粒3个酶的物理图谱。pQS 145是由pBR322缺失重组而来,实验结果与推导结果完全一致。
- 沈英黄永秀
- 关键词：质粒基因
- 多角体蛋白的结构多样性和杆状病毒的进化研究被引量：9
- 1997年
- 在测定LsMNPV多角体蛋白基因的全序列并推导出多角体蛋白氨基酸顺序的基础上,与22种杆状病毒多角体蛋白的氨基酸顺序进行比较,以氨基酸变异曲线研究蛋白质一级结构中氨基酸的保守性,并推测出一个模式多角体蛋白(MPh)氨基酸顺序;用PROSIS软件对MPh及其它5种代表性病毒的多角体蛋白进行了氨基酸亲水性分析,还对24种多角体蛋白的二级结构作出了推测,指出了特征性结构区与氨基酸高变区、亲水区多样性变化的相互关系;通过多角体蛋白间氨基酸顺序最大同源性分析,绘制了23种杆状病毒的系统进化树,进一步讨论了MPh氨基酸顺序的典型性及多角体蛋白所体现的杆状病毒多样性和宿主依赖性进化。
- 刘子夜齐义鹏王家旺黄永秀
- 关键词：昆虫病毒杆状病毒多角体蛋白进化
- 粘虫核型多角体病毒pdv-e66基因的序列测定及比较研究
- 1998年
- 测定了ＬｓＮＰＶｐｄｖ－ｅ６６基因１８９６ｂｐ序列，与其它杆状病毒ｐｄｖ－ｅ６６基因进行了同源性比较，其与ＡｃＮＰＶｐｄｖ－ｅ６６基因核苷酸同源性为５１．９％，氨基酸同源性为３８．８％，分析指出，ＬｓＮＰＶｐｄｖ－ｅ６６基因中有５个高度保守区和一个ＮＴＳ．５端具有典型的晚期基因启动子特征．
- 金天权齐义鹏金海陵黄永秀苏霏
- 关键词：基因序列粘虫核型多角体病毒病毒
- 双酶消化法组建昆虫病毒DNA物理图谱规则的探讨
- 1990年
- 在用双酶消化法组建 DNA 物理图谱的过程中,我们总结了一套"三三规则"即:三类片段(消失片段 Fd,保留片段 Fr,接头片段 Fl);三种片段关系(Fd_1=Fd_2,Fdi=1/2 Fl,Fl_1=Fl_2),三种排列(Fl 的首尾排列,Fr 的夹心排列,Fd 的相嵌排列).用这一套规则组建了大尺蠖核型多角体病毒4个限制内切酶的物理图谱。其片段顺序分别是:BamHI,HCIDEBGFA;Xhol,AJBCEIHFDG;HindⅢ,AFBCMHLJKGIED;BglⅡ,BEAG-DFC.
- 齐义鹏黄永秀
- 关键词：昆虫病毒DNA物理图谱
- 杆状病毒表达系统及其基因组结构的基础与应用研究
- 齐义鹏黄永秀杨复华李凌云刘青珍
- 该项目属生物学科分子病毒学领域。主要内容包括昆虫杆状病毒载体构建，阳性重组病毒的筛选，基因组序列、结构和功能以及应用基础研究等4部分。该项目从1986年起历经13年，得到国家863、基金委、科委、教委、省市资助14次，科...
- 关键词：
- 关键词：杆状病毒表达系统基因组结构毒力测定分子病毒学病毒杀虫剂
- 用重组杆状病毒在昆虫细胞中表达苏芸金杆菌的δ-内毒素基因被引量：3
- 1993年
- 昆虫杆状病毒(IBV)是防治农林害虫的生物杀虫剂,由于其杀虫速度慢、宿主范围窄,限制了它的使用。从80年代初开始,人们不得不转向利用IBV的多角体蛋白基因(ocu)构建转移载体,表达外源基因。80年代后期,学者们再次用基因工程技术把IBV的研究转到了杀虫剂方面。
- 齐义鹏黄永秀沈英谭业平
- 关键词：苏云金杆菌毒素重组基因病毒
- 银染色测定粘虫核多角体病毒多角体基因序列被引量：1
- 1995年
- LsMNPV DNA用EcoRV酶切进行基因组克降,用AcMNPV的部分多角体基因顺序DNA片段作探针,菌落原位杂交法结合测序筛选到分别含LsMNPV部分多角体基因的重组质粒pLsEV1和pLsPH5。用银染色PCR线性扩增双脱氧法测序,发现LsMNPv的完整基因即位于这两个片段上。LsMNPV多角体基因长741bp,编码区碱基同源性与AcMNPV和MbMNPV分别为80.0％和97.0％,氨基酸同源性分别为89.8和97.5％。氨基酸组成中以谷氨酸(Glu)含量最高,谷氨酰胺和色氨酸含量最低。密码子选用以第三个碱基为嘧啶的密码子频率最高。多角体蛋白N端有一类似信号肽结构的26个氨基酸的疏水区。
- 王家旺黄永秀齐义鹏杨复华
- 关键词：粘虫核型多角体病毒昆虫病毒
- 昆虫杆状病毒衣壳主蛋白基因的PCR扩增、克隆和定位被引量：2
- 1994年
- 用ＰＣＲ技术成功地扩增了苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒（ＡｃＮＰＶ）的衣壳主蛋白基因（ｖｐ３９基因），并克隆了该基因，利用纯的ｖｐ３９基因探针，在低严谨杂交条件下，已将粘虫核型多角体病毒（ＬｓＮＰＶ）的ｖｐ３９基固定位在ＰｓｔＩ－Ｆ，ＢａｍＨＩ－Ｃ，ＥｃｏＲＩ－Ｃ，ＸｈｏＩ－Ｄ，Ｉ，ＥｃｏＲＶ－Ｈ，Ｘ等片段上。ＰＣＲ反应时，在扩增出预期的包括完整ｖｐ３９基因的１４０６ｂｐ片段的同时也扩增出一条Ｃａ．４００ｂｐ的片段，本文讨论了ＰＣＲ的特异性扩增和非特异性扩增。
- 王家旺黄永秀谭业平李寿东齐义鹏
- 关键词：昆虫杆状病毒基因
- 绿色荧光蛋白基因在昆虫细胞中的克隆与表达被引量：14
- 1997年
- 将绿色荧光蛋白(GFP)基因亚克隆到转移载体pVLneo的多角体蛋白基因(ocu)启动子下游,与杆状病素AcNPV DNA共转染昆虫细胞,通过同源重组和G418筛选,构建了整合有GFP基因的重组病毒。在昆虫细胞中表达的GFP,MW为30kDa,在荧光显微镜下呈现美丽的绿色,荧光光谱表明其激发波长395nm,发射波长509nm。Southern blot杂交证明,重组病毒的1kb EcoRI片段与GFP cDNA探针有很强的杂交信号,这是GFP基因在杆状病毒基因组中整合的直接证据。
- 朱反修齐义鹏黄永秀胡建红
- 关键词：绿色荧光蛋白基因昆虫细胞基因克隆基因表达
- 脱落酸应答基因的结构、表达调控及信号转导被引量：13
- 1996年
- 许多脱落酸应答的基因已被克隆，并已研究了一些基因的调控。其启动子有G－box和ABARE顺式元件。ABARE与Leuzippier（亮氨酸拉链蛋白）互相作用，ABA与某些基因产物结合以及蛋白质磷酸化在基因表达调控中起重要作用。ABA涉及的信号转导是多途径或单途径的。文中讨论了ABA应答基因的结构、表达调控及信号转导的研究方向。
- 彭艳华黄永秀齐义鹏
- 关键词：植物激素脱落酸信号转导
