王标
- 作品数：9 被引量：15H指数：3
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- NFATc1与OX40-OX40L在ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化中的表达及意义被引量：3
- 2011年
- 目的探讨活化T细胞核因子c1(NFATc1)与OX40-OX40配体(OX40L)在载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)中的表达及意义。方法选取16只ApoE-/-小鼠作为手术组,应用颈动脉硅胶圈植入法快速制作斑块模型;另选16只C57BL/6J小鼠作为对照组。免疫组化检测颈动脉粥样斑块中NFATc1表达,RT-PCR和流式细胞术分别检测淋巴细胞NFATc1、OX40及OX40L mRNA和蛋白表达。结果 NFATc1在手术组颈动脉斑块中显著表达,而在对照组中不表达;手术组NFATc1、OX40、OX40L mRNA和蛋白表达均明显高于对照组(P<0.01);ApoE-/-小鼠NFATc1与OX40、OX40L表达均呈正相关(r分别为0.938、0.964,P<0.01)。结论 NFATc1与OX40-OX40L在AS发生发展中发挥着重要作用,NFATc1可能是受OX40-OX40L调控的下游分子。
- 徐良洁严金川王标刘培晶龚杰王翠平
- 关键词：OX40OX40配体动脉粥样硬化
- OX40-OX40L在人单核细胞和冠脉斑块中的共同表达被引量：2
- 2010年
- 目的探讨细胞刺激分子OX40及其配体OX40L在人单核细胞及冠状动脉粥样硬化斑块(冠脉斑块)中的表达。方法采用荧光技术、流式细胞术检测OX40、OX40L在单核细胞表面的表达,免疫组化方法检测在冠脉斑块中的表达。结果 OX40、OX40L在人单核细胞能连续表达,且细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α和INF-γ能明显刺激其表达;冠脉斑块中能共同表达OX40L(肩部和底部)和OX40(广泛),而动脉壁其它部分不表达。结论人单核细胞表面及冠脉斑块中能共同高表达OX40和OX40L。
- 严金川王翠平陈广华杨萍刘培晶杜荣增王标
- 关键词：OX40OX40配体动脉粥样硬化单核细胞
- 高效小鼠CD40siRNA基因片段的筛选及对淋巴细胞CD40基因表达的影响
- 2010年
- 目的:应用RNA干扰技术筛选高效小鼠CD40siRNA基因序列片段。方法:体外化学合成小鼠CD40基因为靶标的siRNA3对(siCD40-1、siCD40-2、siCD40-3),通过脂质体瞬时转染小鼠脾淋巴细胞(实验组),并分别以转染无关siRNA片段及未转染细胞作为对照(对照组)。分别采用流式细胞术、实时荧光定量PCR检测转染24 h细胞表面CD40抗原、CD40 mRNA表达,蛋白质印迹检测转染48 h蛋白表达的变化。结果:与对照组相比,实验组CD40抗原表达、CD40 mRNA及蛋白表达明显下降(P<0.01);3对实验组siRNA能明显抑制CD40基因表达,抑制率分别为69%、78%和41%,差异有统计学意义(P<0.05)。而各对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:siRNA可抑制小鼠淋巴细胞表达CD40,并具有良好的特异性,其中siRNA-2为最高效干扰片段。
- 严金川杨萍龚杰王标徐良洁
- 关键词：淋巴细胞CD40
- CD40 siRNA阻断CD40-CD40L轴对HUVEC增殖及迁移的影响
- 2010年
- 目的探讨小干扰RNA(si RNA)阻断CD40-CD40配体轴对体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及迁移的影响。方法采用Ⅱ型胶原酶消化法培养人脐静脉内皮细胞,以3H-胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)、3H-亮氨酸(3H-Leu)掺入法分别测定HUVEC增殖,采用琼脂糖凝胶刮取法,倒置显微镜观察HUVEC迁移。结果 CD40配体能明显促进HUVEC3H-TdR、3H-Leu的掺入并显著增加HUVEC迁移率,CD40si RNA能明显抑制上述效应,且呈浓度依赖效应,而最佳预处理细胞时间在48h。结论 CD40siRNA能明显抑制CD40-CD40L相互作用引起的HUVEC增殖和迁移。
- 严金川王标徐良洁杨萍王翠平
- 关键词：CD40配体内皮细胞小干扰RNA
- CD40-RNAi阻断CD40-CD40L轴对ApoE^(-/-)小鼠血小板功能的影响
- 2011年
- 目的:观察CD40-RNAi抑制CD40-CD40L相互作用对ApoE-/-小鼠血小板功能的影响。方法:将ApoE-/-小鼠分为anti-CD40L抗体组、CD40-RNAi组及对照组,应用流式细胞术分别检测血小板膜上表达P-选择素(CD62P)水平及血小板-单核细胞聚集率。结果:ApoE-/-小鼠anti-CD40L抗体组(15.6±3.3,MFI)及CD40-RNAi组(10.7±2.7,MFI)血小板膜表达CD62P水平明显较对照组低(21.8±3.6,MFI);同时发现血小板-单核细胞聚集率anti-CD40L抗体组(11.2±2.3)%及CD40-RNAi组(6.2±2.7)%较对照组低(19.3±2.6)%。ApoE-/-小鼠CD40-RNAi干预前血小板表达CD40水平(67.3±11.3,MFI)明显高于干预后(6.5±1.9,MFI)。结论:CD40-RNAi通过阻断CD40-CD40L相互作用抑制血小板活化功能。
- 严金川杨萍徐良洁王标
- 关键词：动脉粥样硬化CD40血小板RNA干扰
- SiRNA阻断CD40-CD40L对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨阻断CD40-CD40L相互作用对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响。方法:采用ApoE-/-小鼠颈动脉硅胶圈植入法快速制作斑块模型,分别应用特异性CD40L抗体及高效siRNACD40慢病毒基因片段干预小鼠,4周后观察斑块形成(HE染色法)。结果:CD40L抗体100μg/100μl PBS注射ApoE-/-小鼠组颈动脉斑块面积较对照组减少48.3%,siRNACD40慢病毒基因片段组小鼠颈动脉斑块面积减少58.6%。结论:高效siRNACD40基因片段能通过阻断CD40-CD40L抑制ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成。
- 严金川杨萍徐良洁王标袁伟
- 关键词：CD40动脉粥样硬化小鼠
- 小鼠动脉粥样硬化斑块模型的快速制作及CD40在斑块中的表达被引量：3
- 2011年
- 目的探讨颈动脉硅胶圈植入法制作小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块模型及斑块中白细胞分化抗原40(CD40)表达。方法 36只雄性载脂蛋白E(ApoE)-/-小鼠随机分为模型组和对照组:模型组小鼠采用颈动脉硅胶圈植入法快速制作AS斑块模型;对照组不予干预。苏木精-伊红(HE)染色检测斑块,免疫组化法检测斑块中CD40表达。结果模型组HE染色右颈动脉可见明显AS斑块形成,术后6周可见坏死中心区域和纤维帽形成,并且CD40表达阳性。结论颈动脉硅胶圈植入法能快速制作小鼠AS斑块模型,斑块中CD40高表达。
- 王标严金川徐良洁李梅付先利钱晖何远清许文荣
- 关键词：动脉粥样硬化动物模型
- 共刺激分子OX40-OX40L相互作用对ApoE-/-小鼠淋巴细胞活化T细胞核因子C1表达的影响被引量：6
- 2011年
- 目的 探讨共刺激分子OX40-OX40L相互作用对载脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）小鼠淋巴细胞中活化T细胞核因子C1（NFATc1）表达的影响.方法 采用未经治疗的ApoE-/-小鼠颈动脉粥样斑块模型,取其脾脏淋巴细胞,以不同浓度刺激型OX40抗体或抑制型OX40L抗体体外特异性刺激或阻断OX40-OX40L相互作用,不同时间点收获细胞,分别应用实时荧光定量PCR和流式细胞技术检测小鼠淋巴细胞NFATc1 mRNA和蛋白表达.结果 （1）抗OX40抗体特异性刺激OX40-OX40L轴后,小鼠淋巴细胞NFATc1 mRNA及蛋白表达明显上调,anti-OX40浓度为20 μg/ml时刺激作用最强,刺激时间24 h最佳（P〈0.01）.（2）抗OX40L抗体特异性阻断OX40-OX40L轴能明显抑制NFATc1 mRNA及蛋白表达,anti-OX40L为20 μg/ml时抑制作用最强,抑制时间24 h最佳（P〈0.001）.结论 OX40-OX40L相互作用能调控ApoE-/-小鼠淋巴细胞NFATc1的表达.
- 徐良洁严金川王标刘培晶龚杰王翠平
- 关键词：动脉粥样硬化OX40OX40配体
- OX40-OX40L在人单核细胞和冠脉斑块中共同表达的意义
- 严金川王翠平陈广华杨萍刘培晶杜荣增王标
