胡艺兰
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 供职机构：武汉大学基础医学院更多>>
- 发文基金：湖北省卫生厅科研基金湖北省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 日本血吸虫保护性抗原模拟表位的筛选及其免疫保护作用的研究被引量：7
- 2005年
- 目的在前期已建立日本血吸虫感染兔新模型的基础上,用该血清从噬菌体随机12肽库中筛选阳性单克隆噬菌体,并鉴定其诱导小鼠的免疫保护效果。方法通过给感染日本血吸虫家兔注射酚氧化酶抑制剂,抑制其体内日本血吸虫雌虫产卵,建立无虫卵肉芽肿的日本血吸虫感染动物新模型,用其血清筛选出阳性多克隆噬菌体,经与可溶性虫卵抗原(SEA)免疫兔血清充分吸附后,从中随机挑取14个单克隆分别纯化、扩增,用常规ELISA法检测阳性单克隆噬菌体的抗原性;挑选出与新模型兔血清呈强阳性反应,但与SEA免疫兔血清呈阴性或弱阳性反应的单克隆噬菌体,按1×1015pfu/次剂量,0-2-4周方案,皮下多点注射免疫小鼠。末次免疫4周后,每鼠经腹部皮肤攻击感染(40±1)条日本血吸虫尾蚴,感染42d后观察减虫率及减卵率。结果所选14个单克隆噬菌体均能与新模型兔血清和常规感染模型兔血清反应,尤其是第8号和第13号2个克隆与新模型兔血清呈强阳性反应,但与SEA免疫兔血清呈阴性反应;8号、13号单克隆噬菌体及原始噬菌体肽库免疫小鼠后诱导抗攻击感染的减虫率及每克肝脏减卵率分别为35.81%和63.32%、32.09%和52.02%、14.90%和30.64%。结论阳性多克隆噬菌体与SEA免疫兔血清免疫吸附后能去除大部分表达SEA抗原模拟表位的克隆。
- 刘湘胡艺兰何立蒋明森杨孟祥
- 关键词：日本血吸虫抗原表位单克隆免疫
- 用日本血吸虫感染新模型兔血清筛选噬菌体随机肽库的初步研究被引量：3
- 2004年
- 目的 在建立一种有成虫寄生但无虫卵肉芽肿形成的日本血吸虫感染小鼠及家兔新模型 ,并观察其具有较高的抗攻击感染保护力的基础上 ,用新模型兔血清筛选噬菌体随机 12肽库 ,并初步鉴定阳性噬菌体克隆诱导小鼠抗日本血吸虫感染的免疫保护作用。方法 用大肠杆菌抗原吸收后的新模型兔血清 ,经抗体捕获法筛选噬菌体 12肽库 ,经 3轮亲和筛选、富集后获得阳性多克隆。用常规 EL ISA法检测阳性多克隆噬菌体的抗原性。用滴度为 1× 10 1 4pfu的阳性多克隆噬菌体按0 - 2 - 4周方案皮下多点注射免疫小鼠 ,末次免疫 4周后 ,用日本血吸虫尾蚴攻击感染 ,同时设立常规感染兔血清筛获的阳性克隆免疫组、原始肽库免疫组、攻击感染对照组。结果 1新模型兔血清筛获的多克隆噬菌体 (滴度为 1× 10 1 4pfu)与新模型兔血清 (稀释度为 1∶ 4 0 0 )反应为强阳性 ,与常规感染兔血清 (1∶ 4 0 0 )反应为弱阳性 ,与正常兔血清 (1∶ 4 0 0 )反应为阴性。 2用新模型兔血清筛获的多克隆噬菌体、常规感染兔血清筛获的多克隆噬菌体及原始肽库分别免疫小鼠后诱导抗攻击感染的减虫率及每克肝脏减卵率分别为 2 7.2 %和 38.8%、17.8%和 35 .0 %、4 .5 %和 6 .0 %。结论 与用日本血吸虫常规感染模型兔血清筛获的多克隆噬菌体比较 。
- 胡艺兰何立蒋明森易新元曾宪芳
- 关键词：日本血吸虫噬菌体肽库抗原表位
