郭瑞鲜
- 作品数：51 被引量：247H指数：9
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- 硫化氢对抗过氧化氢对PC12细胞的损伤作用被引量：5
- 2008年
- 目的探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对抗过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)对PC12细胞的损伤作用及有关机制。方法应用H2O2在PC12细胞建立氧化应激损伤的实验模型;应用甲氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,碘化丙啶(PI)染色流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率,罗丹明123(Rhodamine 123,Rh123)染色FCM检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),双氢罗丹明123染色FCM检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量。应用硫化氢钠(sodium hydrosulfide,NaHS)作为H2S的供体。结果200μmol和400μmolH2O2作用PC12细胞24h均使细胞的存活率明显降低及凋亡率显著增加,200μmolH2O2引起PC12细胞的MMP明显降低及ROS生成显著增多。当NaHS与H2O2(200或400μmol/L)共同作用于PC12细胞时,NaHS(100～400μmol/L)浓度依赖性的阻断H2O2引起PC12细胞的存活率降低及细胞凋亡率增加。400μmolNaHS明显地阻断200μmolH2O2引起PC12细胞的MMP降低及ROS增多。结论H2S能明显地保护PC12细胞对抗H2O2引起的损伤,阻断MMP降低及ROS生成可能是H2S的细胞保护机制之一。
- 杨春涛郭瑞鲜杨丝丝冯鉴强唐小卿
- 关键词：硫化氢过氧化氢细胞凋亡活性氧线粒体膜电位
- 硫化氢对抗化学性缺氧引起的心肌细胞损伤及其机制被引量：32
- 2009年
- 目的观察H2S对氯化钴（CoCl2）诱导的H9C2心肌细胞缺氧性损伤的影响,探讨其作用机制。方法用CoCl2处理H9C2心肌细胞,建立化学性缺氧诱导心肌细胞损伤的实验模型。NaHS（H2S的供体）在CoCl2处理H9C2心肌细胞前30 min加入培养基中,作为预处理。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测Cleaved Caspase-3的表达;GSSG试剂盒检测GSSG/（GSSG＋GSH）的比值;双氯荧光素（DCFH-DA）染色荧光显微镜照相检测细胞内的活性氧（ROS）;罗丹明123（Rh123）染色荧光显微镜照相检测线粒体膜电位（MMP）。结果在400~800μmol.L-1浓度范围内,CoCl2处理H9C2心肌细胞36 h,呈剂量依赖性地降低细胞存活率。在600μmol.L-1CoCl2处理H9C2心肌细胞前30 min,应用400μmol.L-1NaHS可明显地抑制CoCl2对细胞的损伤作用,使细胞存活率明显升高,细胞凋亡率及CleavedCaspase-3表达降低;并使H9C2心肌细胞内GSSG/（GSH＋GSSG）比值及ROS水平明显降低,同时明显地改善MMP。结论H2S能明显地对抗化学性缺氧诱导的心肌细胞损伤,此保护作用与其降低GSSG/（GSH＋GSSG）比值和ROS水平,改善MMP,抑制Caspase-3活化等机制有关。
- 廖新学杨春涛杨战利李建平王礼春黄雪郭瑞鲜陈培熹冯鉴强
- 关键词：硫化氢心肌保护化学性缺氧氯化钴线粒体膜电位
- 大鼠前额叶锥体神经元的NMDA受体的单通道特性被引量：3
- 2002年
- 【目的】探讨大鼠前额叶皮层神经元N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)受体通道的特性 ,为研究人脑前额叶锥体神经元的NMDA通道提供动物实验依据。【方法】对急性分离的大鼠前额叶的神经元进行细胞贴附式单通道膜片钳记录。【结果】前额叶神经元NMDA受体通道的开放呈现多电导状态 ,表现为 5 5 1,36 5 ,18 6 pS 3种状态 ,以 18 6 pS为优势电导。开放时间主要表现为快时程和慢时程两种状态 ,时间常数均值分别为 :(0 5 5± 0 38)ms和 (13 5 9± 3 2 6 )ms,以短时程为主。关闭时间常数为 (0 34± 0 2 7)ms和 (19 73± 2 4 1)ms。开放概率为 (0 2 5± 0 0 9)。【结论】前额叶神经元NMDA受体通道呈多电导 ,以低电导 18 6pS为优势。开放时程短者占优势 ,关闭时间短暂 ,开放概率高 ,表明前额叶锥体神经元NMDA受体通道的活动以快速短暂样开放为主。
- 王福顺冯鉴强郭瑞鲜王艳陈培熹
- 关键词：前额叶皮层N-甲基-D-天冬氨酸膜片钳技术
- 50Hz磁场长期暴露对大龄大鼠学习记忆及脂质过氧化反应的影响
- 2008年
- 目的 探讨长期0．1mT50Hz磁场暴露对大龄大鼠学习记忆及海马组织的超氧化物歧化酶（SOD）、Na^＋K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性与丙二醛（MDA）水平的影响。方法应用Morris水迷宫方法测定动物的空间学习记忆能力；应用试剂盒分别测定SOD、Na^＋K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性及MDA水平。结果10d0．1mT50Hz磁场暴露对大龄大鼠的学习记忆功能无明显影响。长期（4个月或8个月）0.1m T50Hz磁场暴露能使大鼠的逃避潜伏期明显延氐，穿环系数显著减少，表明大鼠的空间学习记忆能力受损。长期磁场暴露也使大龄大鼠海马组织及其线粒体的SOD活性降低，MDA水平升高，Na^＋K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性降低。结论长期0．1mT50Hz磁场暴露可损伤大龄大鼠的学习记忆能力，此作用可能与其增强海马组织的脂质过氧化反应有关。
- 廖新学李平阳郭瑞鲜孟金兰胡芬陈培熹冯鉴强
- 关键词：超氧化物歧化酶丙二醛磁场
- MPP＋对PC12细胞内源性H2S生成的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:观察1-甲基4-苯基吡啶离子(MPP+)对PC12细胞内源性硫化氢(H2S)生成的影响,以探讨MPP+损伤PC12细胞的新机制。方法:RT-PCR方法检测PC12细胞胱硫醚-β-合酶(CBS)mRNA的表达;亚甲基蓝分光光度计法检测PC12细胞内源性H2S的含量及PC12细胞CBS活性;台盼蓝拒染色法观察PC12细胞的存活率。结果:MPP+可以抑制PC12细胞CBS的表达及其活性,减少内源性H2S的生成;MPP+可以明显地降低PC12细胞的存活率;H2S的供体硫氢化钠(NaHS)对MPP+诱导的PC12细胞损伤具有显著的拮抗作用。结论:MPP+能抑制CBS的表达和活性,减少内源性H2S生成,这可能与其损伤PC12细胞的机制有关。
- 唐小卿范黎黎杨春涛申新田赵静李玉娟郭瑞鲜冯鉴强
- 关键词：硫化氢胱硫醚Β合酶PC12细胞
- 热休克蛋白参与NF-κB介导的H_2O_2预处理的细胞保护作用
- 2007年
- 目的探讨热休克蛋白(HSP)是否参与核因子-κB(NF-κB)介导的H2O2预处理的细胞保护作用。方法应用碘化丙啶(PI)染色流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率,免疫印迹法(Westernblot)测定NF-κB的表达水平,免疫细胞化学染色法测定NF-κB的核转移。结果100μmol/LH2O2预处理PC12细胞90min可显著地抑制300μmol/LH2O2引起的细胞凋亡,并可明显地上调PC12细胞NF-κB的表达及促进NF-κB的核转移,同时也能上调HSP70和HSP90的表达。NF-κB的抑制剂TPCK阻断NF-κB表达,并显著地阻断H2O2预处理的细胞保护作用及HSP70和HSP90的表达。结论HSP70和HSP90参与NF-κB介导的H2O2预处理的适应性细胞保护作用。
- 张梅郭瑞鲜莫利球崔宇刘微陈培熹冯鉴强
- 关键词：预处理细胞保护
- 多巴胺对大鼠前额叶皮层锥体神经元NMDA受体通道的影响
- 2005年
- 【目的】探讨多巴胺(DA)对前额叶皮层锥体神经元谷氨酸/N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体的调节作用。【方法】使用细胞贴附式膜片钳技术进行单通道记录,观察不同浓度DA对急性分离的前额叶皮层锥体神经元NMDA受体通道电流的影响。【结果】结果表明:当DA浓度为0逐渐升高到60!mol/L时,NMDA受体通道的电流幅度由(2.78+0.68)pA升高到(5.42+1.26)pA;短开放时间常数变化不明显,但长开放时间常数由(13.59+1.26)ms升高到(36.19+1.17)ms;长关闭时间常数由(19.73+1.46)ms降低到(2.67+0.75)ms;通道开放概率由0.25+0.09升高到0.56+0.25;当DA浓度继续由60!mol/L升高到100!mol/L时,NMDA受体通道的电流幅度回落到(3.56+0.79)pA,长开放时间常数回落到(14.40+1.37)ms;长关闭时间常数恢复为(17.74+1.79)ms,与对照组比较无显著性变化;通道开放概率由0.56+0.25降低到0.17+0.08。【结论】DA可以影响前额叶皮层锥体神经元NMDA受体通道的活动,而且具有浓度依赖性,低浓度有明显促进作用,高浓度则促进作用减弱,甚至有抑制作用。
- 王福顺郭瑞鲜冯鉴强李平阳陈培熹
- 关键词：前额叶皮层多巴胺NMDA受体通道膜片钳
- 跨颅磁刺激观察前额叶皮层在学习记忆中的作用被引量：2
- 2002年
- 目的为了探讨前额叶皮层的功能。方法在被试进行联合搜索作业(conjunction search task)时,使用跨颅磁刺激干扰被试者右侧前额叶皮层的活动,观察被试者在训练前后反应时间的变化。结果发现磁刺激干扰前额叶的活动,明显地延长了被试者在训练前的反应时间,对训练之后的反应时间几乎没有变化。结论这说明右侧前额叶参与了记忆的编码,对记忆的提取没有作用。
- 王福顺冯鉴强郭瑞鲜王艳叶美红Vincent Walsh
- 关键词：前额叶皮层跨颅磁刺激学习记忆
- CFTR氯通道在硫化氢诱导的心肌保护及细胞增殖中的作用被引量：14
- 2009年
- 目的:探讨囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)氯通道在硫化氢(H2S)诱导的心肌保护及细胞增殖中的作用。方法:应用氯化钴(CoCl2)在大鼠H9c2心肌细胞建立化学性缺氧损伤心肌细胞实验模型;CCK-8试剂盒检测心肌细胞存活率;Hoechst 33342核染色法检测心肌细胞凋亡。结果:在400-2 000μmol/L浓度范围内,CoCl2呈剂量依赖性地抑制H9c2心肌细胞的存活率,600μmol/L CoCl2能诱导H9c2心肌细胞产生明显的凋亡;在100-800μmol/L浓度范围内,硫氢化钠(NaHS)呈剂量依赖性地促进H9c2心肌细胞增殖;NaHS能保护H9c2心肌细胞对抗CoCl2引起的细胞损伤作用,使细胞存活率升高,凋亡率降低;100μmol/L CFTR氯通道拮抗剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)-苯甲酸(NPPB)能明显地阻断NaHS对CoCl2的细胞毒性的抑制作用,但不能阻断NaHS抗心肌细胞凋亡作用及促进心肌细胞增殖作用。结论:CFTR氯通道可能参与H2S的抗CoCl2引起的心肌细胞毒性作用。
- 李建平杨春涛杨战利廖新学王礼春黄雪郭瑞鲜陈培熹冯鉴强
- 关键词：氯通道硫化氢心肌保护细胞增殖氯化钴
- 硫化氢对化学性缺氧诱导PC12细胞凋亡的影响被引量：9
- 2010年
- 【目的】探讨硫化氢(H2S)对抗二氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的作用及其初步机制。【方法】应用化学性缺氧模拟剂CoCl2在PC12细胞建立化学性缺氧损伤模型;以硫氢化钠(NaHS)作为H2S的供体;应用CCK-8比色法检测细胞存活率;碘化丙啶(PI)染色流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率;Hoechst33258染色检测细胞凋亡的形态学变化;罗丹明123(Rh123)染色荧光显微镜照相检测细胞线粒体膜电位(MMP);2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色荧光显微镜照相检测细胞内的活性氧(ROS)水平。【结果】CoCl2引起PC12细胞的存活率显著降低及凋亡率明显增加,同时引起PC12细胞的MMP明显降低及ROS生成显著增加。在600μmol/L CoCl2处理PC12细胞前,应用100～400μmol/L NaHS预处理30min,呈浓度依赖性地阻断CoCl2引起PC12细胞的存活率降低;200μmol/L、400μmol/L NaHS预处理能显著地降低600μmol/L CoCl2引起PC12细胞的凋亡率增加并阻断CoCl2引起的MMP降低及ROS升高。【结论】H2S具有神经细胞保护作用,能明显地对抗CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,此作用可能与其减少ROS生成,提高MMP有关。
- 孟金兰兰爱平郭瑞鲜杨春涛杨战利黄雪冯鉴强
- 关键词：硫化氢二氯化钴缺氧PC12细胞凋亡
