陈彬
- 作品数：75 被引量：211H指数：8
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- Grb2在MCF-7乳腺癌细胞中的核定位研究被引量：1
- 2004年
- 目的 构建Grb2的红色荧光蛋白融合表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,并观察Grb2在MCF 7乳腺癌细胞的核定位情况。方法 用PCR方法扩增Grb2cDNA ,与红色荧光蛋白表达质粒pDsRed1 C重组构建融合蛋白表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,酶切、测序鉴定后 ,瞬时转染MCF 7乳腺癌细胞株 ,用荧光显微镜观察Grb2的核定位情况。结果 pDsRed1 C/Grb2质粒有正确的阅读框 ,融合表达蛋白DsRed1 C/Grb2可定位于MCF 7乳腺癌细胞核内。结论 成功构建了Grb2的红色荧光蛋白融合表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,在MCF 7乳腺癌细胞株中 ,Grb2除存在于胞浆外 ,也可定位于细胞核内 ,可能与其参与核内基因的转录调控有关。
- 陈敏陈彬李渝萍陈健李强钟小林周度金
- 关键词：乳腺癌细胞株胞浆红色荧光蛋白
- 乳腺癌细胞中PNRC基因启动子区CpG岛甲基化状态的研究被引量：7
- 2008年
- 目的研究乳腺癌细胞中富含脯氨酸核受体辅活化子(proline-rich nuclear receptor coactivator protein,PNRC)基因启动子CpG岛的甲基化状态及在PNRC转录调节中的作用。方法应用PT-PCR检测PNRC基因在正常乳腺细胞与乳腺癌细胞中的表达情况,并运用"MethPrimer"软件对PNRC启动子区进行分析,预测CpG岛,通过甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测PNRC启动子区CpG岛的甲基化状况;PT-PCR及Northern杂交检测乳腺癌细胞经甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dc)作用后,PNRC基因mRNA的表达情况;Westernblot检测5-Aza-dc干预对PNRC蛋白表达的影响;将含PNRC启动子序列的报告质粒转染乳腺癌细胞,再经5-Aza-dc处理后,检测PNRC基因启动子的活性。结果PNRC基因在乳腺癌细胞中的表达较正常乳腺细胞明显降低;乳腺癌细胞PNRC基因启动子区存在CpG岛甲基化;乳腺癌细胞经5-Aza-dc处理后,PNRC基因mRNA及蛋白表达水平显著增加,其PNRC基因启动子的活性也明显增强。结论PNRC基因启动子区的高甲基化导致PNRC在乳腺癌细胞中表达降低。
- 张艳陈彬李渝萍陈健陈敏娄桂予周度金
- 关键词：DNA甲基化MSP
- Ⅱ型糖尿病发病机制研究进展被引量：9
- 2001年
- NIDDM是一种异质性紊乱 ,遗传和环境因素均参与了该病的发生。胰岛素抵抗是NIDDM的一个早期和主要的特征 ,众多的遗传和代谢因素可导致其产生。胰岛素抵抗与NIDDM许多的代谢紊乱相关。强化的血糖、血压、血脂的治疗对NIDDM患者中、长期并发症的预防十分必要。现已开发出许多NIDDM治疗药物 ,正逐步应用于临床。
- 陈彬董燕麟
- 关键词：发病机制胰岛素抵抗综合征
- 分子生物学实验带教的几点体会被引量：5
- 2003年
- 为适应医学发展需要,培养高素质人才,近几年我们为本科生开设了分子生物学实验,本人根据几年的教学实践,总结出以下几点体会,供同行们共同探讨.①认真准备实验;②重视预实验;③科学的授课方式;④教员做到"三勤";⑤合理的应用辅助教学手段;⑥及时小结;⑦规范的实验报告.
- 陈敏陈彬李强
- 关键词：分子生物学预实验授课方式辅助教学手段
- AF-2结构域突变的SF1酵母表达质粒的构建及其与PNRC相互作用分析
- 2003年
- 目的 探讨激活功能 2 (AF 2 )结构域在孤儿核受体辅活化富含脯氨酸的受体辅调节蛋白 (PNRC)相互作用的意义。方法 采用PCR和DNA重组技术构建了野生型SF1和AF 2结构域突变的SF1的酵母表达质粒pGBT9 SF1/HBDD和pGBT9 SF1/HBD/AF 2del并采用酵母双杂合分析比较了它们与PNRC的相互作用强弱。结果 SF1/HBD能与野生型PNRC及其N 末端缺失突变体PNRC2 70 3 2 7,PNRC2 78 3 0 0产生较强的相互作用 ,而AF 2缺失的SF1/HBD不与这些PNRC片段发生相互作用。结论 功能性的AF 2结构域是SF1与PNRC相互作用所必须的。
- 陈彬陈敏李渝萍陈健周度金
- 人PNRC基因启动子的初步鉴定被引量：4
- 2007年
- PNRC(proline-rich nuclear receptor coactivator)是最近发现的一种新的核受体辅活化子,它是以牛类固醇生成因子-1(SF1)作诱饵,利用酵母双杂系统从人乳腺cDNA表达文库中筛选得到的.为了研究人PNRC基因的表达调控机制,在对人PNRC基因的生物信息分析的基础上,采用5′RACE法确定了PNRC基因的转录起始位点,克隆了人PNRC基因的5′侧翼区,并对该区进行功能分析.分别构建了11种含不同长度启动子序列的荧光素酶报告基因表达质粒,将它们瞬时转染HepG2细胞,检测其荧光素酶活性.结果发现,PNRC的5′侧翼区的-323^+27、-323^+57、-123^+57、-123^+27区域的启动子活性显著升高,其中-323^+27区域的启动子活性最高.研究表明,人PNRC基因启动子的最小区域位于PNRC的5′侧翼区的-123^+27区域.
- 张艳陈彬陈敏李渝萍陈健娄桂予周度金
- HEPC1和HEPC2基因的稳定转染促进RAW264.7细胞铁滞留被引量：1
- 2006年
- 目的观察HEPC1和HEPC2基因稳定转染对RAW264.7细胞铁滞留的影响。方法用脂质体将HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体分别稳定转染RAW264.7细胞,以转染空载体为对照,RT-PCR鉴定后,分别给予FeCl3和59FeCl3处理,然后测定各组细胞及培养上清中59Fe的放射活性,分别以105细胞的cpm和培养上清cpm/(细胞cpm+培养上清cpm)作为衡量铁贮存和铁释放的指标。结果RT-PCR鉴定HEPC1和HEPC2基因的稳定转染均获得成功;稳定转染HEPC1和稳定转染HEPC2的RAW264.7细胞组铁贮存分别是稳定转染空载体的RAW264.7细胞组的1.65倍(P<0.01)和1.71倍(P<0.01),而铁释放率则分别是稳定转染空载体的对照组的67.6%(P<0.01)和57.9%(P<0.01)。结论HEPC1和HEPC2基因的稳定转染具有促进RAW264.7细胞铁滞留的作用。
- 王元忠陈彬廖荣霞周建新
- 关键词：HEPCIDIN巨噬细胞铁代谢
- hERR1/HBD酵母表达质粒的构建及初步鉴定被引量：3
- 2003年
- 目的 构建酵母双杂合系统诱饵蛋白表达质粒pGBT9 hERR1 HBD。方法 PCR扩增hERR1 HBD(激素激活域 )cDNA ,与酵母Gal4 DBD(DNA结合域 )表达质粒pGBT9重组构建融合蛋白表达质粒 ,酶切、测序鉴定后 ,用于酵母双杂合分析 ,检查其自主转录激活作用及与已知hERR1辅活化子PNRC的相互作用。结果 该质粒有正确的阅读框 ,其表达蛋白不具有自主转录激活作用 ,与已知核受体辅活化子PNRC有明显的相互作用。结论 成功构建了表达质粒pGBT9 hERR1 HBD ,并证实该质粒可作为酵母双杂合系统的诱饵蛋白质粒 ,用于乳腺组织中与hERR1有相互作用的蛋白质基因的筛选。
- 陈敏李渝萍陈健陈彬周度金
- 关键词：乳腺癌酵母双杂合系统乳腺肿瘤聚合酶链反应
- 睾酮对乳腺癌细胞中FEN1表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨睾酮(testosterone,T)在乳腺癌细胞中对瓣状核酸内切酶(flap endonuclease 1,FEN1)表达的影响及其机制。方法以MCF-7作为研究对象,采用RT-PCR观察雌二醇(17β-estradiol,E2)单独作用以及分别与雌激素受体(estrogen receptor,ER)拮抗剂ICI182,780(ICI)和MAPK途径抑制剂U0126共同作用时FEN1表达的变化。以MCF-7aro(芳香化酶过表达的MCF-7)作为研究对象,采用RT-PCR观察加入单独的睾酮以及睾酮和芳香化酶抑制剂来曲唑(letro-zole)共同作用时FEN1表达的变化;采用Western blot观察睾酮单独作用以及分别与来曲唑和U0126共同作用时FEN1、p-ERK和p-Elk的变化。结果与对照组比较,加入雌二醇后MCF-7细胞中FEN1 mRNA的表达升高2.04倍(P<0.01),加入ICI和U0126后分别降低10.63倍和2.17倍(P<0.01)。加入睾酮后MCF-7aro细胞中FEN1 mRNA的表达升高1.66倍(P<0.01),蛋白的表达升高1.80倍(P<0.01);加入来曲唑后FEN1 mRNA的表达下降2.38倍,蛋白的表达降低1.84倍,加入U0126后蛋白的表达降低2.28倍(P<0.01);加入睾酮后ERK和Elk-1的磷酸化水平分别升高2.28倍和2.60倍(P<0.01),加入来曲唑后ERK和Elk-1的磷酸化水平分别降低2.60倍和2.37倍(P<0.01),加入U0126后ERK和Elk-1的磷酸化水平分别降低10.38倍和119.50倍(P<0.01)。结论睾酮可通过MAPK途径上调MCF-7 aro细胞中FEN1的表达。
- 王杨陈彬姜晓梅王越付晓红何凤田
- 关键词：乳腺肿瘤睾酮
- 过氧亚硝基阴离子的研究进展被引量：10
- 2003年
- 过氧亚硝基阴离子 (peroxynitriteanion ,ONOO- )是一氧化氮 (NO)和氧自由基 (O- ·2 )结合生成的。它可能是NO产生病理损伤作用的重要环节。它在休克、缺血 再灌注损伤、败血症、胰岛素依赖性糖尿病、动脉硬化及感染炎症等疾病中的作用已愈来愈受到重视。加强对ONOO- 生成途径和NO、O- ·2 与ONOO- 的相互作用的基础研究 ,以及ONOO- 的病理生理作用的研究 ,特别是开展针对抗ONOO- 损伤作用和有效清除体内ONOO- 的新药研制 ,不仅有助于揭示NO的细胞毒作用的分子机制 ,还有助于为治疗某些临床危征提供启示性思路。
- 陈敏李强陈彬
- 关键词：过氧亚硝基阴离子氧自由基病理损伤细胞毒作用分子机制
