龙天柱
- 作品数：8 被引量：21H指数：3
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- 羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂标记大鼠肝脏NK细胞体内转输示踪
- 2010年
- 目的 利用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）标记大鼠肝脏NK细胞进行体内示踪,观察其在受鼠体内的存活.方法 经SD大鼠门静脉转输1×106个/ml CFSE体外标记新鲜分离的SD供鼠肝脏NK细胞,于输人后1、3、7、15 d分别切取肝脏和脾脏行冰冻切片免疫荧光观察,并收集门静脉血监测淋巴细胞和中性粒细胞的比例变化.结果 CFSE对大鼠肝脏NK细胞的标记率为98.63% 转输NK细胞后第1天受鼠肝脏内CFSE荧光最强,7 d时荧光变微弱,15 d时荧光基本消失 脾脏在第1、3天时可见较弱荧光,7 d时荧光消失.转输NK细胞后相同时间点肝脏内CFSE荧光均明显强于脾脏.转输肝脏NK细胞的受鼠门静脉血中性粒细胞比例第1天时最高,随时间延长逐渐下降,第15天时基本回复正常水平,淋巴细胞比例仅一过性降低.结论 转输的肝脏NK细胞在受体内的数量随时间延长而减少,在受体内的存活时间约为15 d.
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- 关键词：示踪免疫荧光
- 大鼠原位肝移植胆道并发症的原因分析被引量：3
- 2009年
- 目的研究胆道并发症的发生原因,建立稳定的大鼠原位肝移植模型。方法"二袖套法"行大鼠原位肝脏移植180例,即肝上下腔静脉(SVC)采用连续缝合法吻合,门静脉(PV)以及肝下下腔静脉(IVC)采用袖套法吻合,胆总管采用内支架胆管端端吻合法。结果模型稳定后,供肝冷缺血时间为(50.1±12.0)min,无肝期为(16.0±3.1)min,受体手术时间为(54.4±10.6)min,术后胆道并发症的发生率为40%,主要表现为肝脓肿、肝内外胆管扩张、胆泥形成等。结论胆管内支架管的选择以及手术技巧是影响大鼠肝移植术后胆道并发症发生发展的重要因素。
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- 关键词：原位肝移植胆道并发症
- 十二指肠假性淋巴瘤一例被引量：1
- 2011年
- 假性淋巴瘤临床上较为罕见,可以发生在不同的脏器,包括皮肤、颅内、眼眶、腺体、肺、胃肠、肝脏、肾、子宫、睾丸等[1-2],但十二指肠假性淋巴瘤国内外文献尚未见报道,现报道一例如下.
- 黄永亨龙天柱肖治宇叶华万云乐王捷
- 关键词：假性淋巴瘤十二指肠
- 大鼠肝脏NK细胞的分离、纯化与超微结构特征被引量：4
- 2009年
- 目的:建立一种稳定而高效的大鼠全肝自然杀伤细胞(NK细胞)的分离方法,并利用该方法获得目的细胞,研究肝脏NK细胞的超微结构特征。方法:通过灌注和消化法分离大鼠肝脏非实质细胞,经大鼠淋巴细胞分离液密度梯度离心后收集单个核细胞层,磁珠分选得到肝脏NK细胞,流式细胞仪检测及免疫荧光鉴定其纯度,并通过光镜、透射电镜及扫描电镜的方法对目的细胞进行形态学特征研究。结果:分离所得NK细胞纯度为(88.64±4.36)%,存活率>95%。肝脏NK细胞具有典型大颗粒淋巴细胞的形态学特征,胞内可见多量与其细胞毒性相关的分泌颗粒及NK细胞特有的囊泡结构。随着其被激活,细胞的形态会发生变化。结论:该方法是大鼠肝脏NK细胞分离的一种简单可行的方法。肝脏NK细胞的超微结构特征为其细胞功能发挥提供可能。
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- 关键词：超微结构
- 大鼠原位肝移植术后胆道并发症的影响因素被引量：1
- 2009年
- 目的研究大鼠原位肝移植术后胆道并发症的各种影响因素，为建立更稳定的大鼠原位肝移植模型提供实验依据。方法雄性SD大鼠87只，完全随机法分组，其中移植组48只、非移植组36只、假手术组3只，实验共分胆管-胆管重建移植组、胆管-十二指肠重建移植组、胆管-胆管重建＋肝动脉结扎非移植组、胆管-胆管重建非移植组、胆管-十二指肠重建＋肝动脉结扎非移植组、胆管-十二指肠重建非移植组和假手术组7组。各手术处理组以出现明显胆道并发症或移植后14d作为观察时间终点。通过肝脏大体标本肉眼观察、病理学检测和血清学分析等判断胆道并发症的发生率及其严重程度并进行各组间比较。结果移植组总胆道并发症发生率为69．6％，明显高于非移植组（25．0％）和假手术组（0％），差异有统计学意义（均P〈0．05）。在移植组和非移植组中，胆管-十二指肠重建组的胆道并发症发生率明显高于胆管一胆管重建组（90．9％比50．0％，38．9％比11．1％，均P〈0．05）。非移植组中，结扎肝动脉组的胆道并发症高于不结扎肝动脉组（38．9％比11．1％，P〈0．05）。结论经典“二袖套法”大鼠原位肝移植模型尚不完善，仍需进一步改进。就大鼠原位肝移植模型而言，胆管一十二指肠重建方式并非理想的选择。
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- 关键词：肝移植手术后并发症动物血清学分析
- 大蒜素对大鼠NK细胞肿瘤杀伤活性的影响被引量：13
- 2010年
- 目的:研究大蒜素对体外培养的大鼠NK细胞肿瘤杀伤活性的影响,并初步分析其可能机制。方法:免疫磁珠分选法分离大鼠脾脏NK细胞,流式细胞仪检测不同浓度的大蒜素对NK细胞的增殖和凋亡的影响,ELISA检测大鼠脾脏NK细胞IFN-γ的分泌水平,乳酸脱氢酶(LDH)法检测大鼠脾脏NK细胞对小鼠淋巴瘤Yac-1细胞的杀伤活性。结果:大蒜素对体外培养的NK细胞有明显的促进增殖和抑制NK细胞自然凋亡的作用,并能提高NK细胞分泌IFN-γ的水平和增强对Yac-1细胞的杀伤毒性,且在一定的浓度范围内呈剂量依赖性,其中30mg/L是大蒜素的相对适宜浓度。结论:大蒜素可能通过上调NK细胞分泌IFN-γ的水平,增强其体外肿瘤杀伤能力。
- 徐丽吕丽虹俞建东龙天柱黄永亨闵军万云乐
- 关键词：大蒜素干扰素Γ
- 酸性微环境下大蒜素增强大鼠自然杀伤细胞的功能活性
- 2011年
- 目的观察体外酸性培养环境下大蒜素对自然杀伤（NK）细胞功能活性的影响，并探讨其机制。方法以pH5．6、pH6．5和pH7．2的完全RPMI1640培养基对大鼠脾脏CD3-NKR—P1＋NK细胞进行悬浮培养，并给予30mg／L浓度的大蒜素进行处理。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养液中干扰素（IFN）-1的分泌水平，流式细胞仪检测NK细胞的增殖和凋亡率，乳酸脱氢酶法检测NK细胞的功能活性。结果酸性培养环境下大鼠脾脏NK细胞的增殖能力明显下降，NK细胞功能活性明显受阻。在pH7．2、pH6．5和pH5．6三种不同的培养条件下，大蒜素对NK细胞增殖率的影响表现为随培养环境的pH降低反而升高，以pH5．6、培养16h时达最高33．3％。与之相对应，NK细胞分泌的IFN-1达（64．59±0．09）ng／L，较培养4h时升高28％，且对小鼠淋巴瘤Yac-1细胞的杀伤活性也达到最高水平。结论大蒜素可通过提高NK细胞IFN-γ分泌水平明显改善酸性培养环境下NK细胞的功能活性。
- 徐丽俞建东吕丽虹龙天柱黄永亨闵军万云乐
- 关键词：大蒜素自然杀伤细胞
- 供肝自然杀伤细胞通过上调精氨酸酶-1表达减轻肝移植急性排斥反应
- 2014年
- 目的 探讨供体肝脏自然杀伤（NK）细胞减轻大鼠肝移植急性排斥反应的作用机制.方法 以Lewis大鼠为肝移植供体、BN大鼠为受体,采用改良“二袖套”法建立大鼠肝移植模型,并应用60Co射线照射清除供体免疫细胞以及经门静脉回输供肝NK细胞等技术,设立3个实验组：A：急性排斥组（Lewis-BN）,n=18;B：单纯60Co照射排斥组（Lewis-BN＋供体60Co照射）,n=18;C：60Co照射＋供肝NK门静脉回输排斥组（Lewis-BN＋供体60Co照射＋受体门静脉输注供肝NK细胞）,n=18.分别于术后第7天收集外周血清,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测转化生长因子-β1（TGF-β1）分泌水平,同时切取移植肝行病理学检查,Western blot法检测移植肝精氨酸酶-1（Arg-1）蛋白的表达.结果 与A组比较,B组移植肝组织急性排斥反应程度明显加重,外周血TGF-β1分泌水平[（28.00±6.08） μg/L比（11.00±0.57） μg/L）,P＜0.01]和移植肝组织Arg-1表达[（0.687±0.040）比（0.487 ±0.030）,P＜0.05]均降低;但是,经供肝NK细胞门静脉输注后的C组移植肝组织急性排斥反应程度较B组明显减轻,外周血TGF-β1分泌水平[（11.00±0.57）μg/L比（27.60±1.45） μg/L,P＜0.05]和移植肝组织Arg-1表达[（0.487±0.030）比（0.605±0.080）,P＜0.05]均升高.结论 供肝NK细胞可以减轻大鼠肝移植术后急性排斥反应,其机制可能与Arg-1蛋白的表达上调有关.
- 黄永亨钟东佳龙天柱俞建东林泽宇李文滨万云乐
- 关键词：急性排斥反应肝脏移植
