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基因Ⅳ型戊型肝炎病毒衣壳蛋白表达及性质的研究: 戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus,HEV）是引起全球多地区大规模流行和散发病例的急性病毒性肝炎的病原体。我国属于戊型肝炎（Hepatitis E,HE）的高发区。基因Ⅳ型HE是一种人畜共患病,能在人和牲畜...; 吴俊文; 关键词：戊型肝炎病毒重组抗原免疫原性; 文献传递

一种分泌抗人β-actin蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞及其制备方法: 本发明公开了一种分泌抗人β-actin蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，通过在大肠杆菌中原核表达人β-actin融合蛋白，以纯化的人β-actin蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠。经过细胞的融合及筛选获得能稳定分泌抗人β-ac...; 刘如石吴俊文邱义兰许凤刘胜姿李小曼; 文献传递

戊型肝炎病毒研究新进展被引量：5: 2011年; 戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)是引起全球多地区大规模流行和散发病例的急性病毒性肝炎的病原体,发展中国家尤为突出;我国是戊型肝炎(hepatitis E,HE)流行的高发区.HE是一种人畜共患病,猪是人HEV病毒的主要储库,因而HE已成为一个全球性的的公共卫生问题.对HEV的病毒学和基因组特征、临床表征、流行病学、主要抗原表位以及HEV诊断试剂和疫苗研制的进展进行了综述.; 吴俊文刘胜姿李烨许凤吴莎莎邱义兰刘如石; 关键词：戊型肝炎病毒人畜共患病流行病学诊断试剂疫苗

人β-actin蛋白原核表达及其单克隆抗体制备: 2012年; 为获得分泌抗人β-actin蛋白单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,通过在大肠杆菌中原核表达人β-actin蛋白,以纯化的人β-actin蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠。经过细胞的融合及筛选获得1株能稳定分泌抗人β-actin蛋白McAb的杂交瘤细胞,命名为2B4。采用间接ELISA和Western blot方法对McAb的特异性、稳定性和适用范围进行鉴定。结果显示:蛋白的相对分子质量为43 kDa,可溶于8 mol/L尿素;杂交瘤细胞上清的抗体效价为1×105,腹水的抗体效价为1×107;间接ELISA结果表明,杂交瘤细胞在体外传20代或液氮冻存3个月后,分泌的抗体效价不变;37℃保存24 h后,抗体的效价开始下降。Western blot结果显示,单克隆抗体识别人、鼠、兔和鱼的β-actin蛋白,与其发生特异性反应。2B4分泌的单克隆抗体可以广泛的应用于细胞生物学和免疫学试验,具有良好的应用价值。; 吴俊文许凤熊璎珞鲁健邱义兰刘胜姿李烨刘如石; 关键词：原核表达电洗脱单克隆抗体 Β-ACTIN

宏基因组学在胃肠道微生物研究中的应用被引量：3: 2012年; 动物胃肠道中普遍存在大量共生微生物群,对于它们的研究一直受制于纯培养技术。随着分子生物学的快速发展及其在微生物学及生态学上的应用,针对未培养微生物研究的一门新型学科——宏基因组技术应运而生并迅速发展。通过提取胃肠道粘膜表面以及内容物中微生物DNA,构建总DNA文库的方法,利用基因组学的研究策略,来研究胃肠道中微生物遗传组成及群落功能。宏基因组技术在胃肠道微生物研究中广泛的应用,对于医学、生态学、生物能源利用等领域的研究具有重大的价值。; 吴莎莎卢向阳许源许凤吴俊文田云方俊刘如石; 关键词：宏基因组胃肠道微生物

戊型肝炎病毒IV型衣壳蛋白缺失突变体原核表达与性质: 2014年; 采用PCR技术扩增基因IV型HEV(Hepatitis E Virus,HEV)开放阅读框2(Open Reading Frame 2,ORF2)的缺失突变体(aa384-606),亚克隆到表达载体后,转化到大肠杆菌中进行诱导表达,表达蛋白命名为rP24。SDS-PAGE和免疫印迹实验表明,rP24获得了高效表达,且和单克隆抗体15B2具有强的反应活性。rP24经过包涵体洗涤、溶解复性、离子交换层析和分子筛层析纯化后,免疫印迹实验表明,纯化rP24能与抗HEV ORF2中和单克隆抗体8C11以及HE(Hepatitis E,HE)阳性血清发生很强的免疫反应性,说明rP24上具有构象型中和表位,模拟了HEV衣壳蛋白的空间结构。动态光散色测量结果表明,rP24的平均水化半径为7.48 nm;纯化rP24免疫动物实验表明,rP24具有强的抗原性,小鼠阳转周期短,抗体持续时间长;纯化rP24作为包被抗原检测HE阳性血清和阴性血清,结果显示rP24对HE阳性血清和阴性血清检出率与北京万泰公司的抗HEV-IgG检测试剂盒的检出率一致。这些实验结果说明,具有较好免疫反应性和免疫原性的rP24获得了高效表达,该蛋白模拟了天然病毒衣壳蛋白的中和表位,为进一步研究基因I型和基因IV型HEV感染不同宿主细胞差异的分子机制奠定了基础。; 邱义兰吴俊文邱果李桑李烨刘胜姿刘如石; 关键词：戊型肝炎病毒衣壳蛋白原核表达免疫反应性免疫原性

一种分泌抗人β-actin蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞及其制备方法: 本发明公开了一种分泌抗人β-actin蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，通过在大肠杆菌中原核表达人β-actin融合蛋白，以纯化的人β-actin蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠。经过细胞的融合及筛选获得能稳定分泌抗人β-ac...; 刘如石吴俊文邱义兰许凤刘胜姿李小曼

沼气池污泥微生物总DNA提取方法的比较被引量：6: 2011年; 沼气发酵系统是一个复杂的生态系统,其污泥微生物超过99%是不可培养的。为了优化沼气池纤维素的转化效率、沼气的产率和开展污泥微生物多样性研究,本研究采用化学裂解法、溶菌酶裂解法和QIAampDNA Stool Mini Kit提取了沼气池污泥样品中微生物的总DNA,对三种方法的DNA得率、纯度、大片段提取效果以及是否含有PCR反应抑制剂进行了研究,最后对16S rRNA基因V3区的扩增产物进行了PCR变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)分析。与化学裂解法和QIAamp DNA Stool Mini Kit法相比,溶菌酶裂解法得到的DNA量大、片段长、片段分布广、PCR扩增效率高;同时PCR-DGGE图谱显示,溶菌酶裂解法可更好地展示沼气池污泥中微生物的多样性。该结果为进一步提高沼气池中纤维素的转化效率和沼气生产优势菌种的质和量打下了一定的前期基础。; 张琳熊格生吴莎莎卢向阳吴俊文许凤颜亨梅刘如石; 关键词：总DNA提取 PCR-DGGE 微生物多样性

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吴俊文

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