[目的]以甲醛降解菌宛氏拟青霉菌F1-23为实验菌株,分离纯化得到甲醛脱氢酶的酶液,并考察其酶学性质。[方法]从液体培养液中收集菌体,通过细胞粉碎,采用(NH4)2SO4沉淀、透析、DFAE-Sepharose离子交换层析及Superdex-200凝胶过滤层析,纯化得到电泳纯的FADH。[结果]该酶的分子量约为112.81 k Da;亚基分子量分别为65k Da和42 k Da;纯酶液活力为336.10 U/mg,较纯化前提高了4.02倍。对该酶的酶学性质分析结果表明,该酶最适反应温度为37℃,在25~45℃时稳定性很好;最适反应p H为8.0,在p H 6.5~8.0范围内酶活力较为稳定。底物特异性研究表明FADH最适底物为甲醛,相对偏好短链醛类。金属离子对酶活性的影响试验表明,Zn^(2+)、Mn^(2+)、Ag^+、Fe^(3+)和Hg^(2+)几乎完全抑制FADH酶活力;Ca^(2+)对酶活有促进作用。纯酶液在4℃环境下,在24h内可保存78%的活性。[结论]FADH结构较为特殊,且活性较大,为后期表达和深入研究其生物学功能提供理论和数据支持。
分离研究家酿葡萄汁饮品中的优势酵母菌,为本地葡萄酿酒酵母资源的筛选及其利用奠定基础。从家酿葡萄汁饮品中分离得到一株优势酵母菌(命名为CSLG02),结合显微结构和生理生化试验结果,以及对其26S r DNA D1/D2序列的分析确定该菌株的系统发育地位;通过人为地在葡萄汁中添加试验菌株CSLG02,发酵酿制葡萄汁饮品,考察饮品的各个理化指标。研究结果表明,菌株CSLG02鉴定为酿酒酵母属(Saccharomyces cerevisiae)。添加该菌后的试验组较对照组,饮品中各个理化指标均有不同程度的改变。S.cerevisiae CSLG02的添加,能改善家酿葡萄汁饮品的口感和品质,对形成地域性葡萄汁饮品的研究具有实际帮助意义。
