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PCR-SBT法HLA基因分型模棱两可结果的判读及解决对策: 2009年; 目的研究PCR-SBT法HLA基因分型结果判读中出现的模棱两可问题并提出解决策略。方法对306名随机抽取的组织配型患者的DNA采用PCR-序列特异性引物(Sequence Specific Primer,SSP)低分辨方法检测,同时采用PCR-SBT法进行HLA-A,B,DRB1高分辨基因分型。PCR-SBT法模棱两可结果用PCR-SSP高分辨方法复核确认。结果所有306例检测标本的高低分辨血清学抗原一致,经PCR-SBT基因测序方法检测有111份模棱两可结果,占36.3%(111/306)。其中HLA-A座位有30对等位基因存在模棱两可结果,占所有检测标本等位基因总数的3.3%;HLA-B座位有66对,占7.2%;HLA-DRB1座位有36对,占3.9%。所有模棱两可标本经PCR-SSP HLA基因高分辨分型试剂PCR-SSP等方法复核确认。结论针对PCR-SBT法进行HLA-A,B,DRB1高分辨基因分型模棱两可结果所建立的解决策略,对于提高HLA数据分型的速度和分型准确性有重要意义。; 刘嬿季芸孙瑛杨剑豪毛臻杜可明; 关键词：人类白细胞抗原

推荐HL-A、B特异性指定的复核表: 2004年; 张工梁嵇月华季芸杨剑豪谢军华郭晓俊孙继丽傅敏杨颖; 关键词：HLA-A HLA-B 特异性抗原人类白细胞抗原血清学检测

PCR-SSP在HLA低分辨中常见问题及解决措施被引量：4: 2007年; 目的探讨PCR-SSP在HLA低分辨分型中常见问题的原因,提出解决的措施。方法应用盐析法提取基因组DNA,用PCR-SSP法对参加造血干细胞资料库志愿者的血样进行HLA分型,琼脂糖凝胶电泳后紫外光灯下分析判读,并进行统计学分析。结果在4800份血样标本中,4187份标本能够准确判读出结果,检出率为87.2%,其余613份样本无法判读出确定的基因型。在这613份血样标本中所遇到的问题包括有漏检占41.9%(其中单孔漏检多达90.2%);假阳性及非特异性所占比例也较大,为29.2%;模棱两可的结果所占比例为23.2%;人为因素影响分析的占4.4%;仪器因素影响分析的占1.3%。结论SSP法用于HLA分型时,有99.5%问题可找到其原因所在,并通过相应的方法加以解决。; 孙瑛傅敏金晔谢军华季芸杨剑豪杜可明; 关键词：HLA PCR-SSP 假阳性

HLA-B40组等位基因多态性和血清学分型不明确标本分析被引量：4: 2002年; 目的利用DNA分型技术调查上海汉族人群HLA-B40组等位基因多态性并比较配型标本中HLA-B40抗原血清学和DNA分型的结果。方法采用反向PCR-SSOP技术进行DNA分型,可检出HLA-B＊4001-4011等11个等位基因。结果所有样本DNA分型均获成功,无假阳性和假阴性结果出现。质控DNA分型结果与UCLA结果相符。上海地区汉族人群共检出B＊4001-4003、4005-400、4011等等位基因,未检出B＊4004、4008-4010等等位基因。296名无关个体中HLA-B40＊组等位基因频率为0.140 2。血清学方法检测HLA-B40组抗原错误率为12.82％（10/78）。结论该技术用于HLA-B40分型分辨率高,分型结果较血清学方法更加精确,可确保HLA分型的准确。; 冯明亮马俊季芸陆琼稽月华杨颖; 关键词：DNA分型血清学分型基因多态性等位基因

广东汉族人群MICA和MICB微卫星多态性分布被引量：5: 2004年; 目的　调查广东地区汉族人群 MICA基因第 5外显子和 MICB基因第 1内含子微卫星多态性分布。方法　应用聚合酶链反应和荧光 ( 6 - FAM)自动化检测技术 ,对广东地区共 10 6名无亲缘关系样本进行 MICA和 MICB微卫星基因分型 ,并计算这两个微卫星的基因频率、基因型频率、个体鉴别力、期望杂合性、多态性信息含量和非父排除率。结果　MICA和 MICB微卫星基因型分布符合 Hardy- Weinberg平衡。MICA A5基因频率最高为 0 .2 877,A4基因频率则最低为 0 .132 1;A5 - 5 .1( 14 .15 % )和 A5 - 5 ( 10 .38% )基因型分布频率较高。 MICB CA14等位基因频率最高为 0 .32 5 5 ,CA19、CA2 8等位基因频率最低为0 .0 0 4 7,未检出 CA2 7。 CA14 - CA14 ( 14 .15 % )基因型分布频率较高。结论　 MICA基因第 5外显子和MICB基因第 1内含子微卫星适合作为中国人群的遗传标志 ,用于人类学、遗传疾病基因连锁分析。; 冯明亮张景怡谢军华季芸陆琼陈亮杨剑豪郭晓俊; 关键词：汉族人群 MICA基因微卫星

中国南方汉族人群MICA和MICB微卫星和HLA-B基因座单体型研究: 利用聚合酶链反应和荧光(6-FAM)自动化检测技术对中国南方汉族无亲缘关系样本进行MICA基因外显子5和 MICB基因内含子1微卫星基因座和HLA-B多态性及其单体型分布调查。根据群体资料估算两者间的单体型频率、连锁不平...; 冯明亮张景怡谢军华陈亮陆琼郭晓俊杨剑豪季芸; 文献传递

HLA-A,B,DRB1单体型频率计算及其在骨髓库中的应用被引量：20: 2005年; 目的从群体资料计算HLAA,B,DRB1三座位单体型频率,并用于骨髓库寻找HLA匹配供者。方法根据HLA表型群体资料,使用最大数学预期值算法(ExpectationMaximization,EM)计算HLA三座位单体型频率。通过实例运算介绍HLA表型频率以及发现HLA匹配无关供者的概率。结果①使用DNA基因分型技术鉴定12193例无关汉族健康个体HLA表型,计算求得HLAA,B,DRB1单体型频率。②预期概率与观察结果吻合,并用于评估骨髓库的最适大小。结论使用EM算法估计大样本汉族群体HLAA,B,DRB1三座位单体型频率,结果可靠,可用于评估骨髓库的最适大小和组份。; 孙继丽杜可明傅敏季芸谢军华孙瑛金晔杨剑豪稽月华刘达庄钱开诚赵桐茂; 关键词：EM算法

中华(上海)骨髓库的HLA分布报告被引量：37: 2001年; 目的　报告中华 (上海 )骨髓库中HLA血型资料 ,了解中国人群HLA分布特点。方法　用微量淋巴细胞毒试验检测 11995名志愿者的HLA A、B抗原 ,并用序列特异引物聚合酶链反应(PCR SSP)进行DNA水平的质控和对有疑问结果作复查。结果　共检出A座位特异性 2 5种 ,B座位抗原特异性 5 2种 ,有显著意义的连锁不平衡单型有 6 2种 ,其中以A2 B46、A30 B13、A33 B5 8、A11.1 B6 0、A2 4 B6 2、A2 4 B6 0等为最常见 ;检索HLA A、B、DR抗原 (基因 )匹配志愿者的“命中率”约为 1‰。结论　中国人群HLA分布有自身特点 ,而现有骨髓库HLA A、B基因的遗传特征介于南、北方汉族之间。; 张工梁杨颖冯喆张雁征冯明亮嵇月华陆琼马俊季芸毛昕张钦辉杨钧仪张瑾袁惠章; 关键词：骨髓 HLA抗原基因频率数据收集

慢性粒细胞白血病和HLA基因的关联性研究: 目的探讨慢性粒细胞白血病与HLA等位基因多态性的遗传相关性。方法采用PCR-SSOP分型技术对266 位慢粒病人进行HLA-A,B,DRB1基因分型,并以9996位上海骨髓库志愿捐献造血干细胞的健康供者作为对照,对 2组...; 季芸杨剑豪傅敏杜可明孙瑛孙继丽金晔谢军华嵇月华张铮毛臻; 文献传递

PCR-SSP在HLA低分辨中常见问题及解决措施: 目的探讨PCR-SSP在HLA低分辨分型中常见问题的原因,提出解决的措施。方法应用盐析法提取基因组 DNA,用PCR-SSP法试剂盒对参加造血干细胞资料库志愿者的血样进行HLA分型,琼脂糖凝胶电泳后紫外光灯下分析判读,并...; 孙瑛杜可明傅敏金晔谢军华季芸张铮杨剑豪孙继丽嵇月华毛臻; 文献传递

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季芸