安会灵
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中央民族大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金国家教育部“985工程”更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 盐芥EhKCR1基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2013年
- 以山东生态型盐芥(EutremA halophilum)为试材,采用电子克隆及RT-PCR的方法,从中获得一个β-酮脂酰-CoA还原酶基因全长cDNA,命名为EhKCRI,GenBank登录号为JQ389855。EhKCR1cDNA长1 152 bp,含954 bp开放阅读框架,编码318个氨基酸。采用生物信息学的手段对EhKCR1蛋白的保守结构域、疏水性和二级结构等进行了分析。EhKCR1蛋白具有NADH结合结构域[G(X)3GXG(X)3A(X)3A(X)2G]负责裂解的关键结构域[Y(X)3K]。序列比对和系统进化分析表明,盐芥EhKCRl基因与来源于拟南芥和油菜的KCR1亲缘关系最近,与单子叶植物来源的KCR1亲缘关系较远。Real-time PCR分析表明EhKCRI受ABA和干旱明显诱导。推测EhKCRI与盐芥的抗逆有关。
- 徐小静安会灵韦百阳周宜君冯金朝
- 关键词：盐芥电子克隆生物信息学分析PCR
- 盐芥和拟南芥蜡质代谢对比分析及盐芥EhKCR1基因的初步研究
- 安会灵
- 文献传递
- 盐芥ThMSD基因在大肠杆菌中的表达及特性研究被引量：1
- 2013年
- 超氧化物歧化酶(SODs)是真核生物中广泛存在的含金属抗氧化酶,包括Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和Fe-SOD 3种。植物线粒体中的Mn-SOD在植物抗逆中发挥重要作用。ThMSD是前期工作中从极度抗逆植物盐芥中克隆到的Mn-SOD编码基因。将ThMSD连接到原核表达载体pET30a(+),转化到BL21,获得重组菌BL21(pET30a-ThMSD)。SDS-PAGE分析表明,重组菌在32kDa处有明显的诱导条带,与理论大小一致。Western blotting分析表明,诱导的条带能和抗His标签的单克隆抗体发生特异性反应。对3个重组子的可溶性全蛋白进行SOD活性分析,发现均高于空白对照菌。选择能大量表达ThMSD的重组子进行大量诱导表达,通过镍亲和层析纯化目的蛋白。对纯化的ThMSD重组蛋白进行热稳定性分析,结果表明,55℃下ThMSD仍有50%以上活性,42℃处理40 min后仍保持60%以上活性。在重组菌BL21(pET30a-ThMSD)对NaCl的抗性分析实验中,当培养基中盐浓度高于正常值时,在所测定阶段重组菌的生长速度均高于对照菌。可见,经原核表达的重组蛋白ThMSD具有较强的SOD活性及热稳定性,表达ThMSD基因的BL21菌株提高了对NaCl的耐受力。推测盐芥ThMSD基因与盐芥极强的抗逆性有密切联系。
- 徐小静安会灵陈宁美杨婧周宜君
- 关键词：盐芥原核表达
- 盐芥愈伤组织的诱导及悬浮细胞的培养特性
- 2013年
- 为建立稳定的盐芥悬浮细胞系,以盐芥(山东生态型)为材料,研究了不同激素及其不同质量浓度配比下叶柄及叶片愈伤组织的诱导情况,并初步探讨了盐芥悬浮细胞的培养特性。结果表明:6-BA与2,4-D、NAA不同质量浓度组合均能诱导出愈伤,其中叶柄诱导率为100%,叶片诱导率偏低且出愈时间晚于叶柄。并且6 BA与NAA组下2种外植体均能分化出芽,2.0 mg/L6 BA+0.1mg/L NAA组合下盐芥叶柄的分化率高达57%。按照通常每7d继代1次,50mL液体培养基中盐芥悬浮细胞接种量以10.0mL比较合适。
- 安会灵徐小静张瑾韦善君周宜君
- 关键词：盐芥叶片叶柄愈伤组织悬浮细胞
