宋天一
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
- 供职机构：吉林大学白求恩医学部更多>>
- 发文基金：吉林省省校合作技术开发项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 奇异变形杆菌噬菌体的分离鉴定及其生物学特性分析被引量：8
- 2012年
- 目的分离鉴定奇异变形杆菌噬菌体,并分析其生物学特性。方法以奇异变形杆菌为宿主菌,采用双层琼脂噬斑法从居民区生活污水中分离针对奇异变形杆菌的噬菌体;噬菌体经纯化后,通过负染法电镜观察其形态及大小;将噬菌体和宿主菌以10∶1的比例混合共培养,测定噬菌体的一步生长曲线;提取噬菌体核酸并进行酶切分析。结果共分离出4株噬菌体,分别命名为PrM-01、PrM-02、PrM-03和PrM-04,在双层琼脂平板上可形成圆形、透明、边界清晰、直径约2～3 mm的噬斑,经反复纯化后,其滴度范围在(1.2～2.3)×1012PFU/ml;电镜观察显示,噬菌体的头部呈二十面体立体对称,直径约40 nm,尾部长约30 nm;PrM-04的一步生长曲线表明,噬菌体在裂解宿主菌时,潜伏期为15 min,暴发时间为25 min,裂解量为3.2×104;酶切分析显示,其基因组大小约为26 000 bp,且具有EcoRⅠ、HindⅢ和BamHⅠ多个酶切位点。结论成功分离出4株针对奇异变形杆菌的噬菌体,其表现出特异性高、裂解性强的毒性噬菌体特征。
- 孙盟盟宋天一胡士华刘悦孙延波
- 关键词：奇异变形杆菌噬菌体生物学特性
- 蜱传森林脑炎病毒非结构蛋白1原核表达载体的构建被引量：1
- 2013年
- 目的:构建蜱传森林脑炎病毒(TBEV)非结构蛋白1(NS1)的原核表达载体,以期获得其高纯度的表达,为制备多克隆抗体及其功能的研究奠定实验基础。方法:根据目的基因序列设计PCR引物,利用基因重组技术构建原核表达载体pEASYTM-E1-NS1。将重组后质粒pEASYTM-E1-NS1转化至BL21细胞,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后进行镍离子亲和纯化,利用Bradford法测定蛋白浓度。采用SDS-PAGE和Western blotting法分析融合蛋白的表达水平。结果:含TBEV NS1的原核表达载体pEASYTM-E1-NS1经诱导后,可获得以包涵体形式存在的融合蛋白,通过亲和纯化得到较高纯度的蛋白质。SDS-PAGE和Western blotting,在相对分子质量约40 000处有特异性蛋白条带。结论:成功构建重组pEASYTM-E1-NS1原核表达载体,获得高纯度的重组TBEV NS1的融合蛋白。
- 宋天一李菁华张哲史红艳孙延波
- 关键词：原核表达融合蛋白
