宋小凯
- 作品数：135 被引量：101H指数：5
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 预防鸡毒害艾美耳球虫的免疫调节型DNA疫苗
- 本发明涉及一种鸡毒害艾美耳球虫免疫调节型DNA疫苗，属于生物兽药技术领域。利用分子生物学技术将毒害艾美耳子孢子表面抗原NA4基因和鸡白细胞介素－2(chIL－2)基因进行串连，构建了融合表达载体pVAX－NA4－IL－2...
- 李祥瑞严若峰徐立新宋小凯张娜
- 文献传递
- 一种鸡球虫多价重组蛋白亚单位疫苗及其应用
- 本发明涉及生物兽药技术领域，涉及一种鸡球虫多价重组蛋白亚单位疫苗。该疫苗包含4种鸡球虫的重组蛋白成分：TA4（E.tenella）、NA4（E.necatrix）、LDH（E.acervulina）和Em8（E.maxi...
- 李祥瑞严若峰徐立新宋小凯高云路
- 文献传递
- 旋毛虫胶质瘤致病相关蛋白1样蛋白2对宿主免疫功能的影响
- 2023年
- [目的]本文旨在分析旋毛虫胶质瘤致病相关蛋白1样蛋白2(GLIPR1L2)对宿主免疫功能的影响。[方法]用反转录PCR(RT-PCR)方法克隆旋毛虫GLIPR1L2基因,构建表达载体,获得重组蛋白(rGLIPR1L2),用Western blot分析rGLIPR1L2的反应原性。将大鼠外周血单核细胞(PBMC)与rGLIPR1L2共孵育,用免疫荧光检测技术(IFA)检测rGLIPR1L2与大鼠PBMC的结合,分析rGLIPR1L2对细胞增殖、迁移、NO分泌、吞噬功能和细胞凋亡的影响。大鼠腹腔注射rGLIPR1L2后,测定血清中IL-4、IL-9、IL-17、TGF-β、IFN-γ等细胞因子的变化。背部皮下多点注射对小鼠进行免疫后,ELISA检测特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体的变化,收集旋毛虫成虫和肌肉幼虫并计数,分析rGLIPR1L2的免疫保护作用。[结果]体外试验表明,rGLIPR1L2能够促进大鼠PBMC的增殖与迁移,增强细胞NO分泌和吞噬功能,一定浓度下可提高细胞凋亡比例。体内试验显示rGLIPR1L2能促进大鼠IL-4分泌,但对细胞因子IFN-γ、IL-9、IL-17和TGF-β的分泌无显著影响。rGLIPR1L2免疫小鼠可引起其体内特异性IgG抗体水平显著升高,且可显著减少受感染小鼠的肌肉幼虫数。[结论]旋毛虫胶质瘤致病相关蛋白1样蛋白2能通过多种途径影响宿主免疫功能。
- 孙晓轲陆滢滢齐萌陈伟陆明敏徐立新宋小凯李祥瑞严若峰
- 关键词：旋毛虫
- 鸡球虫共同抗原UCE免疫原性分析及其对多种球虫感染的免疫保护效果评估被引量：5
- 2018年
- [目的]在前期研究中,筛选到了存在于多种鸡球虫间的共同抗原泛素缀合酶结构域蛋白(UCE),本研究进一步分析其免疫原性,评估其对多种球虫感染的免疫保护效果。[方法]提取纯化的堆型艾美耳球虫孢子化卵囊总RNA,用反转录PCR(RT-PCR)技术扩增堆型艾美耳球虫UCE基因(EaUCE),插入pVAX1质粒,构建真核表达质粒pVAX-EaUCE,通过RT-PCR和Western blot检测pVAX-EaUCE在鸡体内的转录和表达情况。经流式细胞术和间接ELISA法检测pVAX-EaUCE免疫后鸡体细胞免疫和体液免疫水平变化,分析其免疫原性。分别采用柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫及三者的混合卵囊人工感染雏鸡,观察感染前、后雏鸡体质量变化和排出卵囊减少量,评估其对多种球虫感染的免疫保护效果。[结果]EaUCE基因开放阅读框为444 bp,编码148个氨基酸,BLAST分析显示,柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫UCE氨基酸序列同源性均大于95%。pVAX-EaUCE能够在鸡体内成功转录和表达。pVAX-EaUCE免疫后,鸡体的CD_4^+/CD_3^+和CD_8^+/CD_3^+细胞比例显著升高,IFN-γ、IL-2、IL-4、TNFSF15、IL-17D、TGF-β4 mRNA和IgY抗体水平显著升高,表明免疫该质粒能诱导细胞和体液产生免疫反应(P<0.05)。pVAX-EaUCE免疫后,与对照组相比,免疫组鸡体质量显著增加,卵囊产量明显下降,肠道损伤也相应减轻。[结论]鸡球虫共同抗原UCE具有良好的免疫原性,可对多种球虫感染提供部分免疫保护力,有望成为抵抗多种球虫感染的候选抗原。
- 刘剑华刘连瑞李灵娟徐立新严若峰李祥瑞宋小凯
- 关键词：鸡球虫共同抗原免疫原性
- 一种用于早期诊断捻转血矛线虫感染的抗原及其应用
- 本发明涉及一种用于早期诊断捻转血矛线虫感染的抗原及其应用。本发明鉴定出一种可用作该寄生虫感染的诊断用抗原，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该抗原可以对感染捻转血矛线虫14天后的宿主血清中的抗体进行特异性识别，能...
- 严若峰李祥瑞徐立新宋小凯卡力比夏提.艾木拉江陆明敏
- 文献传递
- 山羊IFN-γ基因的克隆与表达
- 以山羊外周血淋巴细胞RNA为模板,通过RT-PCR方法,获得了山羊γ干扰素(IFN-γ)基因,并将该基因克隆入pMD-18-T载体。序列测定结果表明,山羊IFN-γ基因的开放阅读框为501bp,编码167个氨基酸;该基因...
- 徐立新袁橙严若峰宋小凯李祥瑞
- 关键词：山羊IFN-Γ克隆
- 文献传递
- 一种基于LAMP技术的旋毛虫快速检测方法及引物组合物
- 本发明公开了一种基于LAMP技术的旋毛虫快速检测方法及引物组合物。一种用于检测旋毛虫的特异性的LAMP引物组合物，由F3、B3、FIP和BIP四条引物组成，F3、B3、FIP和BIP引物序列分别如SEQ ID NO.1‐...
- 严若峰李祥瑞徐立新宋小凯黄芸
- 文献传递
- Induction of protective immunity against Eimeria tenella,Eimeria necatrix,Eimeria maxima and Eimeria acervulina infections using multivalent epitope DNA vaccines
- Avian coccidiosis is mostly caused by mixed infection of several Eimeria species under natural conditions and ...
- 宋小凯Zhe RenRuofeng YanLixin Xu李祥瑞
- 关键词：EIMERIA
- 文献传递
- 全蛋白组水平预测旋毛虫分泌蛋白及其功能分析被引量：1
- 2017年
- 从蛋白组水平预测并分析旋毛虫分泌蛋白的特征。利用软件预测旋毛虫蛋白组范围分泌蛋白,并统计和分析其序列特征,最后利用数据库信息注释分析分泌蛋白功能。结果:预测得到414个经典途径分泌蛋白和245个非经典途径分泌蛋白,占蛋白组2.40%。MEME统计经典分泌蛋白信号肽中存在可能的3个基序。氨基酸组成分析表明,旋毛虫分泌蛋白及其信号肽主要由疏水性氨基酸组成,而信号肽剪切位点主要由亲水性氨基酸组成,信号肽剪切位点-3和-1两个位点氨基酸保守性高,可能是相关酶识别关键点。在对分泌蛋白的功能进行注释分析中发现,与核酸酶活性和蛋白酶活性相关的蛋白比例较高。研究结果为旋毛虫致病机制的深入研究提供理论基础。
- 费宏秦玉兰吴玲燕徐立新宋小凯李祥瑞严若峰
- 关键词：旋毛虫蛋白组分泌蛋白功能注释
- 巨型艾美耳球虫微线蛋白3结构域蛋白的免疫保护作用被引量：1
- 2021年
- 巨型艾美耳球虫是4种严重危害养禽业的鸡球虫之一。实验室前期研究发现,巨型艾美耳球虫微线蛋白3 (EmMIC3)能够与肠上皮细胞结合,经细胞ELISA、间接免疫荧光及子孢子侵入抑制试验发现,EmMIC3的5个结构域中EmMAR2与小肠上皮细胞结合能力最强,EmMAR5与小肠上皮细胞结合能力最弱。本研究经原核表达和纯化获得重组蛋白EmMIC3、EmMAR2和vMAR5,并制备了这3种蛋白的抗血清。通过分别注射重组蛋白和多克隆抗体评估3种蛋白抵抗巨型艾美耳球虫感染的免疫保护作用。结果显示:免疫EmMIC3、EmMAR2和EmMAR5均能够提高抗原特异性IgY抗体水平;重组蛋白免疫组中,EmMIC3和EmMAR2的抗球虫指数分别为180.70和70.82,而EmMAR5的抗球虫指数为137.69;重组蛋白抗血清免疫组中,EmMIC3和EmMAR2的抗球虫指数分别为180.49和164.60,而EmMAR5的抗球虫指数为137.37。上述结果表明,不管是重组蛋白免疫组还是重组蛋白抗血清免疫组,与对照组相比,EmMIC3和EmMAR2都具有明显的免疫保护效果,且MIC3的免疫保护效果最好,而EmMAR5则不具有免疫保护效果。结构域蛋白EmMAR2的免疫保护效果不及EmMIC3,启示虽然EmMAR2具有较好的免疫保护效果,但是要发挥更好的抵抗巨型艾美耳球虫感染的免疫保护效果,可能需要其他4种结构域蛋白的协同作用。
- 刘佳斌张杨王茗悦黄剑眉靖传旭宋小凯徐立新严若峰李祥瑞
- 关键词：巨型艾美耳球虫免疫保护效果
