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HBV-ACLF患者外周血和肝脏NK细胞的表达频率及功能与肝损伤的相关性被引量：2: 2012年; 目的探讨HBV相关慢加急性肝衰竭（HBV-ACLV）患者外周血和肝组织自然杀伤（NK）细胞的表达频率及功能与肝损伤的相关陛。方法利用多色流式技术检测14例HBV-ACLF患者和15例HBV-CHB（慢性乙型肝炎）患者外周血NK细胞（CD3-CD56＋）的表达频率和NK细胞表面CD10Ta的表达，胞内细胞因子染色技术检测NK细胞分泌IFN-γ的水平。收集20例HBV-ACLF患者、10例轻度CHB患者肝组织穿刺标本，利用免疫组织化学双染技术检测肝组织中CD3和CD57抗原的表达。分析轻度CHB和HBV-ACLF患者肝脏NK细胞的表达频率及与肝损伤程度（TBIL水平）的相关性。结果HBV-ACLF患者与轻度CHB患者外周血NK细胞的表达频率和IFN-γ的表达差异均无统计学意义（12．7％±5．3％vs9．6％±3．3％和4．52％±2．52％vs9．06％±7．6％，P均〉0．05），HBV-ACLF患者外周血CD107a表达（NK细胞的杀伤活性）要显著强于轻度CHB患者（52．1％±18．9％vs30．9％±12．4％，P〈0．05）。HBV-ACLF患者肝组织中CD57＋NK细胞的表达频率显著高于轻度CHB患者（95．1±21．3／低倍镜视野V89．5±10．6／低倍镜视野，P〈0．01）。肝脏CD57＋NK细胞的表达频率与TBIL水平显著正相关，相关系数为0．936。结论外周血NK细胞杀伤活性显著增强和肝脏中CD57＋NK细胞大量募集可能是导致HBV-ACLF免疫性肝损伤加剧，肝细胞大量凋亡和坏死的重要因素。; 邹勇周耀勇宋戈; 关键词：乙型肝炎病毒肝衰竭自然杀伤细胞

趋化因子受体CXCR3与其配体在小鼠暴发性肝炎发病中免疫学机制研究被引量：3: 2011年; 目的探讨趋化因子受体CXCR3与其配体（CXCL9／Mig，CXCL10／IP-10）在小鼠暴发性肝炎淋巴细胞迁移和急性肝衰竭中的作用。方法6～8周龄雌性BALB／CJ小鼠腹腔注射100PFU3型鼠肝炎病毒（MHV-3），采用流式细胞术检测感染MHV-3后的BALB／CJ小鼠肝脏、脾脏和外周血T细胞和NK细胞的比例、数量以及其表面趋化因子受体CXCR3的表达频率。实时定量PCR技术检测感染MHV．3后的BALB／CJ小鼠肝内趋化因子CXCL9和CXCL10mRNA的表达水平。Transwell细胞迁移试验评估病毒感染的肝细胞及CXCL10对脾脏淋巴细胞的趋化作用。结果BALB／CJ小鼠感染MHV-3后，肝脏T细胞和NK细胞的数量及CXCR3的表达频率均显著增加，然而在脾脏和外周血均显著减少。实时定量PCR检测证实，感染MHV-348h后，肝内趋化因子CXCL9和CXCL10mRNA的表达比感染前分别上升了15．6和98．8倍。体外Transwell试验表明，病毒感染的肝细胞及重组CXCL10／IP-10蛋白对脾脏T细胞和NK细胞具有明显的趋化作用，并且这种趋化作用能被抗-CXCLIO抗体显著阻断。结论趋化因子受体CXCR3与其配体（CXCL9和CXCL10），尤其是CXCL10的相互作用在小鼠暴发性肝炎肝内淋巴细胞的募集及随后的坏死性炎症和急性肝衰竭中可能发挥着重要作用。; 邹勇鲍俊杰宋戈; 关键词：趋化因子 CXCR3 CXCL10 暴发性肝炎自然杀伤细胞

小鼠肝脏自然杀伤细胞分离纯化及受体表达分析被引量：5: 2008年; 目的：建立一种有效分离纯化小鼠肝脏自然杀伤细胞（NK细胞）的方法,并对其表面几种NK细胞受体（NKP46、NKG2D、NKG2A/C/E和Ly49A/C/I）的表达进行分析。方法：首先利用Percoll不连续密度梯度离心分离小鼠肝脏淋巴细胞,进一步经CD5（Ly-1）磁珠阳性分选清除CD3^＋DX5^＋T细胞,最后利用CD49b（DX5）磁珠阳性分选肝脏NK（CD3^-DX5^＋）细胞。分离后的细胞经台盼蓝染色检测细胞存活率,流式细胞术检测肝脏NK细胞纯度及几种NK细胞受体的表达百分率。结果：不连续密度梯度离心能有效分离出肝脏淋巴细胞,CD5（Ly-1）磁珠清除CD3^＋DX5^＋T细胞后再用CD49b（DX5）磁珠阳性分选出肝脏NK（CD3^-DX5^＋）细胞,纯度可达到（94.8±1.0）%,存活率为92%～95%。NK细胞受体NKP46、NKG2D、NKG2A/C/E和Ly49A/C/I在小鼠肝脏NK细胞上的表达百分率分别为（97.9±0.7）%、（93.2±1.7）%、（57.2±0.9）%和（63.3±1.9）%。结论：成功建立了一种有效分离纯化小鼠肝脏NK细胞的方法,掌握了正常小鼠肝脏NK细胞上几种重要受体的表达情况,为进一步在病毒性肝炎小鼠模型中进行肝脏NK细胞功能学研究及受体基因芯片分析奠定了基础。; 邹勇陈韬严伟明王洪武宋戈肖非罗小平宁琴; 关键词：自然杀伤细胞受体密度梯度离心免疫磁珠分选

趋化因子CXCL10在小鼠暴发型肝衰竭中对NK细胞作用的研究: 目的：在HBV引起的人类暴发型肝衰竭(fulminant hepatic failure，FHF)及慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure，ACLF)中，NK细胞可以通过趋化因子/趋...; 宋戈; 关键词：趋化因子暴发型肝衰竭 NK细胞活化状态; 文献传递

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宋戈

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