张姿
- 作品数:10 被引量:49H指数:3
- 供职机构:泸州医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金四川省杰出青年科技基金四川省学术和技术带头人培养资金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 槲皮素对LPS诱导的中性粒细胞产生白介素6的影响被引量:30
- 2006年
- 目的研究离体培养的人中性粒细胞在被LPS激活的情况下,槲皮素对中性粒细胞产生IL-6的影响。方法运用ELISA法检测槲皮素对LPS诱导的中性粒细胞分泌IL-6的影响;运用流式细胞术检测槲皮素对LPS活化的中性粒细胞内IL-6的蛋白水平的影响;运用逆转录PCR(RT-PCR)技术检测槲皮素对LPS活化的中性粒细胞表达IL-6 mRNA的影响。结果在无刺激的情况下中性粒细胞不产生IL-6,LPS(1μg/mL)以时间依赖性的方式诱导中性粒细胞表达IL-6 mRNA,合成并分泌IL-6,并在16 h达到高峰。然而,预先用槲皮素(40μmol/L)处理中性粒细胞30 min后,LPS诱导的中性粒细胞表达IL-6 mRNA,合成并分泌IL-6则受到了抑制。结论IL-6是炎症早期重要的促炎症因子。因此,槲皮素抑制LPS诱导中性粒细胞产生IL-6,提示槲皮素可能通过对炎症因子负性调控而发挥其抗炎作用。
- 李昕刘佳佳何浩张姿段承刚谢华福何涛
- 关键词:槲皮素中性粒细胞白细胞介素6脂多糖
- 化学发光技术在蛋白质组学研究中的应用被引量:1
- 2008年
- 目的:探讨在蛋白质组学研究中应用化学发光技术分析鉴定蛋白质的方法和价值。方法:采用细胞培养、双向电泳及银染等技术建立小鼠神经元蛋白质组图谱,再用PDQuest 2D分析软件和免疫印迹持久性化学发光技术选择性地鉴定三种小鼠神经元蛋白质-PI3Kr3、MEK1、PKCα。结果:三种蛋白质的双向电泳化学发光图谱上均只出现了1个特异蛋白质斑点,信号强,背景低。结论:利用化学发光技术鉴定蛋白质简单、实用、灵敏、高效,可为蛋白质组学的研究提供有力的技术支持。
- 姚富丽严冬梅尹康张姿李洪
- 关键词:化学发光印迹法蛋白质
- ONO-AE-248诱导中性粒细胞非凋亡性程序化死亡线粒体形态结构的变化被引量:2
- 2007年
- 目的:探讨线粒体形态结构的变化在ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化死亡中的作用及意义。方法:Ficoll法分离健康志愿者外周静脉血中性粒细胞,与ONO-AE-248共同培养,透射电子显微镜观察线粒体形态结构的改变;流式细胞术检测线粒体膜势能的变化。结果:ONO-AE-248刺激6小时,中性粒细胞线粒体显著肿胀,嵴断裂,数目增多;ONO-AE-248早期迅速导致中性粒细胞线粒体膜势能的溃散。结论:线粒体变化是ONO-AE-248诱导中性粒细胞非凋亡性程序化死亡区别于凋亡的早期形态学特征事件之一。线粒体可能在ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡中扮演更为关键性的角色。
- 羊建刘佳佳薛晓婕张姿何浩
- 关键词:线粒体中性粒细胞ONO-AE-248凋亡非凋亡性程序化细胞死亡
- 中性粒细胞凋亡信号转导途径的研究进展被引量:1
- 2004年
- 张姿刘佳佳何延政
- 关键词:中性粒细胞凋亡信号转导
- 一种中性粒细胞新型死亡形式的探索被引量:1
- 2005年
- 刘佳佳羊建何浩张姿李昕何延政
- 关键词:中性粒细胞程序化细胞死亡DEATHDNA片断细胞识别细胞自杀
- ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡、非坏死性死亡中未出现DNA小片断化的分子机制初探被引量:1
- 2009年
- 目的探讨ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡非坏死性死亡中没有出现DNA小片段的分子机制,为进一步确立这种新型细胞死亡形式提供实验室依据。方法体外新鲜分离人外周血中性粒细胞与ONO—AE-248共同培养,TUNEL法结合激光共聚焦扫描显微镜检测凋亡细胞并观察细胞核形态;Westernblotting检测caspase-3的活性;RT—PCR检测DNA断裂因子(DFF40)的表达水平。实验中同时设立空白组、LPS抑制凋亡组和TNF—α.促进凋亡组为对照。结果ONO—AE-248刺激培养的中性粒细胞经TUNEL法检测未见阳性细胞,细胞核染色密度较低,边界不清,分叶不明显,核形较大;Western blotting结果显示ONO—AE-248对caspase一3前体裂解无显著影响;RT—PCR结果显示ONO—AE-248诱导了DFF40表达明显下调。结论ONO-AE-248诱导的中性粒细胞死亡过程中细胞核DNA断裂方式明显不同于自发性凋亡,DFF40表达下调可能是其没有出现DNA小片段化的主要原因之一。
- 李国利胡艳玲刘佳佳张姿何浩
- 关键词:ONO-AE-248中性粒细胞DNA片段化
- ONO-AE-248诱发中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡的生化信号转导初探被引量:2
- 2007年
- 目的:研究ONO-AE-248诱发中性粒细胞(PMN)非凋亡性程序化细胞死亡过程中,细胞死亡相关的蛋白分子caspase-3、caspase-8、p-38MAPK和PKC的作用,探讨这种细胞死亡的分子机制。方法:运用光镜和DNA电泳对PMN形态学变化和生化特征进行观察和评估;通过Western blot显示PMN中caspase-3、caspase-8活性改变和p-38MAPK磷酸化改变;运用MTS法检测PKC抑制剂对PMN活性的影响。结果:PMN经ONO-AE-248刺激,绝大多数分叶核融合成单叶核(12小时),DNA琼脂糖电泳结果显示缺乏梯状条带(24小时),而且ONO-AE-248对caspase-3、caspase-8活性和p-38MAPK磷酸化水平无明显影响。然而,PKC抑制剂STS和H-7能显著抑制ONO-AE-248对PMN的促死亡效应。结论:ONO-AE-248所诱导的PMN死亡可能是一种非凋亡性的主动性细胞死亡,即非凋亡性程序化细胞死亡。该死亡过程不依赖caspase-3、caspase-8的活化和p-38MAPK的磷酸化,但是PKC可能发挥正向的调控作用。
- 何浩刘佳佳张姿李昕段承刚谢华福刘晓燕何涛何延政
- 关键词:ONO-AE-248中性粒细胞CASPASEPKC
- ONO-AE-248诱发的中性粒细胞非凋亡、非坏死性死亡被引量:8
- 2005年
- 目的:观察前列腺素E2受体亚型3(EP3)激动剂ONO-AE-248对中性粒细胞的影响。方法:运用电子显微镜、MTS法、RT-PCR和流式细胞术等技术,对中性粒细胞的形态变化、生物学活性及凋亡进行观察和评估,并对EP3受体进行分析。结果:中性粒细胞存在EP3受体基因的表达,以5mmol/L的ONO-AE-248作用12h后,其多叶核融合为单叶核,核膜起泡、破裂,核质溢出,细胞死亡;但其快速死亡不具有细胞凋亡和坏死的形态特征且需要能量(ATP)供应。结论:ONO-AE-248所致这种新型细胞主动死亡的形式,可能为“非凋亡性程序化细胞死亡”的一种,这对于重新认识和定位中性粒细胞在非特异性免疫中的作用和地位提出了新的思路。
- 刘佳佳张姿何浩李昕何延政
- 关键词:ONO-AE-248非凋亡性程序化细胞死亡中性粒细胞凋亡坏死
- ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡的形态学变化被引量:5
- 2007年
- 目的研究前列腺素E受体亚型3(EP3)激动剂ONO-AE-248诱导的中性粒细胞(PMN)非凋亡性程序化细胞死亡的形态学变化,探讨PMN死亡形式的多样性和复杂性。方法运用透射电镜、荧光显微镜及激光共聚焦扫描显微镜观察PMN在自发性凋亡与ONO-AE-248刺激下亚细胞微结构的变化。结果以5mmol/L的ONO-AE-248刺激PMN12h后,电镜观察绝大多数PMN的多叶核融合为单叶核,核质疏松,核膜分层、起泡甚至破裂,核质溢出,但细胞膜较完整,细胞器无明显改变。以荧光染料DAPI标染活细胞核,ONO-AE-248刺激后,PMN表现为多叶核融合成大而模糊的球形,核染色密度较低;ONO-AE-248刺激的PMN死亡仍有细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)的外翻。ONO-AE-248刺激组与自发性凋亡组PMN在线粒体的形态结构、分布和细胞质内的染色性均有明显差异。结论ONO-AE-248在体外能刺激人PMN发生非凋亡性程序化细胞死亡,这一刺激过程不影响自发性凋亡的PMN细胞膜PS的外翻,并且细胞核和线粒体的改变是其早期最为显著的形态学改变,提示二者可能是ONO-AE-248刺激的靶标和早期的药物反应中心。
- 张姿刘佳佳姚富丽何浩羊建谢华福何涛
- 关键词:ONO-AE-248中性粒细胞线粒体凋亡非凋亡性程序化细胞死亡
- ONO-AE-248诱发线粒体膜势能降低导致中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡被引量:2
- 2006年
- 目的研究线粒体在ONO-AE-248诱导中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡中形态结构及功能的变化情况,为进一步确立这一新的死亡形式和找寻其独特的死亡信号转导途径提供实验依据。方法体外新鲜分离人外周血中性粒细胞与ONO-AE-248共同培养,流式细胞术检测其线粒体膜势能的变化;激光共聚焦扫描显微镜观察线粒体形态结构和分布情况。结果ONO-AE-248迅速导致中性粒细胞线粒体膜势能的溃散;ONO-AE-248刺激后中性粒细胞在线粒体形态、结构、分布和胞浆内染色特性等方面均与阴性对照有明显差异。结论线粒体变化是ONO-AE-248诱导中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡早期形态学上区别于凋亡的显著变化之一。线粒体膜通透性转变以及线粒体膜势能下降可能是ONO-AE-248诱导的非凋亡性程序化细胞死亡的主要原因。
- 张姿刘佳佳何浩黄奕俊李娟谢华福何涛赵静
- 关键词:线粒体中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡凋亡