李津
- 作品数：18 被引量：38H指数：3
- 供职机构：北京大学基础医学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项留学人员科技活动项目择优资助经费国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 葡萄球菌肠毒素A、B对HBsAg诱导体液免疫的影响被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨超抗原葡萄球菌肠毒素A(SEA)和葡萄球菌肠毒素B (SEB)对HBsAg诱导小鼠产生抗 -HBs抗体水平及阳转率作用。方法 BABL/C小鼠 60只 ,随机分为 5组。组 1小鼠在左腹股沟皮下注射重组HBsAg 4ug ,每周 1次 ,连续 3周。余 4组HBsAg注射情况同组 1,但同时给予SEA或SEB。组 2注射HBsAg 1d后 ,在对侧腹股沟皮下注射SEA 2 5 μg、组 3注射SEB 2 5 μg ;组4第 2周注射HBsAg同时对侧腹股沟皮下注射SEA 2 5 μg、组 5注射SEB 2 5 μg。每周取血一次 ,采用ELISA方法检测小鼠血清抗 -HBs抗体水平。结果 组 1第 3周抗 -HBs阳转率为 41 7% ,抗 -HBs抗体水平 ( 0 75 8± 0 12 6) ;组 2、组 4第 3周抗 -HBs阳转率均为 10 0 % ,抗 -HBs抗体水平与组 1相比均差异显著 (P <0 0 5 )。而组 3、组 5第 3周抗 -HBs抗体水平与组 1相比均无显著性差异(P >0 0 5 )。结论 SEA可显著提高HBsAg免疫后的小鼠抗 -HBs抗体水平及阳转率 ,对HBsAg诱导小鼠体液免疫有明显的增强作用。
- 孙永年黄长形李津徐哲
- 关键词：抗-HBS抗体水平腹股沟SEB
- 免疫复合物型治疗性乙型肝炎疫苗有效成份佐剂吸附率检测初探
- 2010年
- 目的:探索免疫复合物型治疗性乙型肝炎疫苗"乙克"的主要有效成份HBsAg/抗-HBs复合物(IC)及游离HBsAg的佐剂吸附率检测方法。方法:氢氧化铝佐剂经不同转速离心后,用ICP-AES法检测上清中铝残留量。未吸附IC经不同转速离心后,用电化学发光法检测在各离心转速下上清中HBsAg和抗-HBs含量。用电化学发光法检测未吸附IC与同一批次的佐剂吸附IC的HBsAg含量,计算HBsAg回收率;检测佐剂吸附IC样品离心上清及未离心样品的HBsAg含量,计算吸附百分率及检测的精密度。用凯氏定氮法测定佐剂吸附免疫复合物离心上清与离心前样品蛋白含量。结果:氢氧化铝佐剂经6500r/min离心3min,上清中铝的残留量为0;未吸附IC经2000～9000r/min离心3min,所测上清中HBsAg与抗-HBs均未明显下降。佐剂吸附IC经解离后,HBsAg回收率为91.56%,表明经过解离后铝佐剂不会影响HBsAg含量的检测结果。佐剂吸附IC样品与离心上清比较,蛋白含量减少了3.2mg/mL,表明每毫克铝可吸附约2.54mg蛋白,对总蛋白的吸附率为13.5%。佐剂吸附IC及HBsAg的吸附百分率的重复性检测结果为99.87%±0.15%,CV为0.15%。结论:佐剂吸附的IC在6500r/min离心3min的条件下,上清中未被吸附的HBsAg和抗-HBs不会下沉,而氢氧化铝佐剂连同被吸附IC及HBsAg则被沉淀,且铝佐剂不会对HBsAg的测定造成干扰,故通过检测离心样品上清及未离心样品中的HBsAg含量,可有效测定铝吸附百分率,且精密度较好。
- 朱亭玉徐静何亚丽王明莹齐璇周根喜李津
- 关键词：治疗性乙型肝炎疫苗免疫复合物氢氧化铝
- 酵母工程菌细胞高密度发酵的研究进展被引量：2
- 2009年
- 构建重组酵母工程菌表达抗原或细胞因子等,是研发新生物制品的趋势之一,实现酵母工程菌的高密度发酵是维持制品生产规模和降低成本的重要技术途径。本文就影响酵母工程菌高密度发酵的因素,包括菌株的生物学特性和发酵工艺特点、培养基种类及配方、发酵罐结构及性能、发酵过程各项重要工艺参数或变量的控制等及在生物制品和生物制药行业中酵母工程菌细胞高密度发酵的进展作一综述。
- 朱亭玉马民强李津张博润
- 关键词：高密度发酵酿酒酵母汉逊酵母毕赤酵母
- 高效液相色谱法分析重组酿酒酵母表达的乙型肝炎表面抗原病毒样颗粒的结构性状被引量：3
- 2013年
- 目的采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析重组酿酒酵母表达的乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)的结构性状。方法采用HPLC法,分别以磷酸盐缓冲液和含去垢剂SDS的磷酸盐缓冲液为流动相,分析3批重组酿酒酵母表达的纯化HBsAg VLP的出峰规律。结果 3批纯化的HBsAg样品在不含SDS的流动相条件下,均只在(15.39±0.01)min处出现单一的相对分子质量2 000 000的HBsAg VLP峰,峰面积积分百分含量为(100.00±0.0)%。3批纯化的HBsAg样品在含SDS的流动相条件下,在(15.07±0.02)min处出现相对分子质量2 000 000的HBsAg VLP峰,峰面积积分百分含量为(55.07±0.05)%;在(28.62±0.04)min处出现1个相对分子质量24 000的P24亚基多肽峰,峰面积积分百分含量为(44.93±0.04)%。结论 HBsAg在常规保存条件下为P24亚基通过非共价键或(和)共价键聚合形成的相对分子质量为2 000 000的大分子蛋白颗粒,在含SDS的条件下,HBsAg颗粒可部分解聚为P24亚基。
- 孙玉杰马锐马晓宇刘旭王瑜盛玉博王辉黄浩陈兴赵铠李津
- 关键词：高效液相色谱法乙型肝炎表面抗原病毒样颗粒
- 表达乙型肝炎表面抗原重组酿酒酵母工程菌发酵培养基配方的优化
- 2009年
- 目的优化重组酿酒酵母工程菌发酵培养基的配方,提高其表达HBsAg的水平。方法采用正交试验法对培养基配方进行优化,并对最佳培养基配方进行验证。结果最佳培养基配方为:在每50ml基础培养基中添加50%的甘油0.9ml和50%的蔗糖0.4ml,维持pH值为5.0。与基础培养基相比,以此培养基培养的工程菌表达HBsAg的水平平均可提高26%。结论在发酵过程中适当补充甘油和蔗糖,可以提高重组酿酒酵母工程菌表达HBsAg的水平。
- 王树毅朱亭玉齐璇纪云李贺王明莹周根喜李津
- 关键词：重组酿酒酵母发酵培养基HBSAG正交试验
- 乙型肝炎疫苗2针免疫程序的研究进展被引量：3
- 2012年
- 随着疫苗免疫计划的扩大和接种疫苗种类的增多,免疫注射的总接种针次增加,乙型肝炎（乙肝）疫苗免疫程序接种针次较多的不足逐渐凸显。美国18～49岁的乙肝高危人群和普通人群中,常规3针乙肝疫苗免疫的全程接种率仅为41.8%和31.2%[1]。
- 李津沈永才庄辉
- 关键词：乙型肝炎病毒疫苗
- 表达乙型肝炎表面抗原重组汉逊酵母细胞破碎方法的比较被引量：2
- 2012年
- 目的比较球磨法、低温超高压破碎法和Yeast Buster酵母细胞裂解液法破碎表达乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的重组汉逊酵母(Hansenula polymorpha,HP)细胞的效果。方法分别采用球磨法、低温超高压破碎法和细胞裂解液法破碎表达HBsAg的重组HP细胞和重组酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiea,SC)细胞,测定其细胞破碎率、细胞破碎后蛋白和HBsAg释出量,比较3种方法破碎细胞的效果。结果球磨法使球磨罐和磨球中少量杂质渗入样品,其中氧化锆罐-氧化锆珠组合破碎重组HP细胞形成的杂质较少,破碎率约为60%,氧化锆罐-玻璃珠组合破碎重组HP细胞后蛋白浓度最高达2.71 mg/ml,HBsAg释出量最高为180.04μg/ml;低温超高压破碎法破碎重组HP细胞破碎率最高为71.18%,细胞破碎后蛋白浓度最高可达6.72 mg/ml,HBsAg释出量最高为350.63μg/ml;细胞裂解液法破碎细胞平均破碎率为60.30%,破碎不同次数的蛋白浓度及HBsAg释出量差异较大。结论低温超高压破碎法更适合破碎表达HBsAg的重组HP细胞。
- 王曦李彩梅劳文燕许宁刘英微张德有马锐杨旭琴朱亭玉李津
- 关键词：球磨
- UniJect注射器预充注乙型肝炎疫苗冷链外使用可行性研究被引量：1
- 2006年
- 目的为了观察UniJect注射器预充注乙型肝炎(乙肝)疫苗的热稳定性,以探讨其冷链外使用的可行性。方法将常规安瓶分装与UniJect预充注重组乙肝疫苗(酵母)在37℃放置14、30、45d,检测两种分装疫苗的体外相对效力(RP)。将配合疫苗保存使用的温度敏感指示标签(VVM30)在37℃放置30d,其间对其颜色变化进行连续检测。结果5批常规分装重组乙肝疫苗(酵母)及其同批半成品UniJect注射器分装乙肝疫苗,37℃放置14d内所有疫苗RP仍符合要求;37℃放置30d,有1批常规分装乙肝疫苗的RP不符合要求;37℃放置45d,5批常规分装乙肝疫苗的RP均不符合要求。而UniJect注射器预充注乙肝疫苗37℃放置14、30、45d,RP均符合要求。3批VVM30标签37℃干燥和1批VVM30标签37℃水浸放置30d内,其颜色变化线性良好,颜色变化指示临界期均为21d。结论UniJect注射器预充注重组乙肝疫苗(酵母)热稳定性良好,配合使用VVM30标签,可确保脱离冷链运输和保存的乙肝疫苗在效力符合要求的条件下使用。
- 李津朱亭玉洪云何雅利许毅王明莹齐璇董小曼赵铠
- 关键词：乙型肝炎疫苗热稳定性
- 重组汉逊酵母表达的HBsAg纯化工艺中内毒素的去除效果被引量：3
- 2012年
- 目的分析重组汉逊酵母表达的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)各纯化工序样品中内毒素的去除效果。方法采用鲎试剂法检测重组汉逊酵母表达的HBsAg小量工艺探索、中量工艺验证、中试纯化工艺中破碎细胞、微滤、超滤、硅胶吸附、层析、除菌过滤各工序样品的内毒素含量,计算内毒素去除率,分析各纯化工序与内毒素去除率的关系,并以重组酿酒酵母表达HBsAg各纯化工序中样品作为对照。结果重组汉逊酵母表达的HBsAg纯化过程中内毒素含量由细胞破碎样品的241 EU/ml以上降至除菌过滤样品的1.0 EU/ml以下。微滤和超滤样品内毒素去除率平均可达56%和86%,占总体纯化工艺中内毒素去除率的90%以上。结论重组汉逊酵母表达HBsAg纯化工序微滤、超滤和疏水层析均可有效去除内毒素,以超滤去除内毒素效果最明显,为重组汉逊酵母纯化工艺去除内毒素的研究提供了技术参数和实验依据。
- 刘英微王曦张德有杨旭琴许宁张昀苏锦锋何亚丽王树毅李津
- 关键词：汉逊酵母内毒素类纯化
- 冷冻干燥对重组酵母乙型肝炎疫苗效力(抗原性)的影响被引量：7
- 2003年
- 重组酵母乙型肝炎疫苗 (酵母乙肝疫苗 )加入保护剂后冷冻干燥 ,观察是否影响疫苗抗原性和稳定性。按 5 %和 1%的比例 ,在酵母乙肝疫苗原液中分别加入蔗糖和明胶 ,低温冷冻干燥 ,制备 3批冻干疫苗 ,分别进行体外相对效力和小鼠ED50 测定。加保护剂冻干后酵母乙肝疫苗体外相对效力和小鼠ED50 值较冻干前改变不大 ,而 4℃放置和热加速后的稳定性均优于液体疫苗。因此现有酵母乙肝疫苗加入保护剂冻干后 ,显著提高了疫苗的稳定性 ,为进一步制备稳定的疫苗参考品打下了初步基础。
- 张弛梁争论李津胡忠玉钟熙星海唐巧英张华远李河民
- 关键词：乙肝疫苗参考品冷冻
