李彩梅
- 作品数：8 被引量：5H指数：2
- 供职机构：北京生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 表达乙型肝炎表面抗原重组汉逊酵母细胞破碎方法的比较被引量：2
- 2012年
- 目的比较球磨法、低温超高压破碎法和Yeast Buster酵母细胞裂解液法破碎表达乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的重组汉逊酵母(Hansenula polymorpha,HP)细胞的效果。方法分别采用球磨法、低温超高压破碎法和细胞裂解液法破碎表达HBsAg的重组HP细胞和重组酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiea,SC)细胞,测定其细胞破碎率、细胞破碎后蛋白和HBsAg释出量,比较3种方法破碎细胞的效果。结果球磨法使球磨罐和磨球中少量杂质渗入样品,其中氧化锆罐-氧化锆珠组合破碎重组HP细胞形成的杂质较少,破碎率约为60%,氧化锆罐-玻璃珠组合破碎重组HP细胞后蛋白浓度最高达2.71 mg/ml,HBsAg释出量最高为180.04μg/ml;低温超高压破碎法破碎重组HP细胞破碎率最高为71.18%,细胞破碎后蛋白浓度最高可达6.72 mg/ml,HBsAg释出量最高为350.63μg/ml;细胞裂解液法破碎细胞平均破碎率为60.30%,破碎不同次数的蛋白浓度及HBsAg释出量差异较大。结论低温超高压破碎法更适合破碎表达HBsAg的重组HP细胞。
- 王曦李彩梅劳文燕许宁刘英微张德有马锐杨旭琴朱亭玉李津
- 关键词：球磨
- 疏水层析纯化乙型肝炎表面抗原峰形规律研究
- 目的:探讨疏水层析纯化重组汉逊酵母表达的HBsAg的提取率及疏水层析分部收集样品紫外监测峰形图谱与蛋白和HBsAg量间的关系。方法:以EIA法测定疏水层析精制纯化重组汉逊酵母表达HBsAg前后样品中HBsAg量,计算HB...
- 许宁李彩梅张德有马锐杨旭琴柳蔷沈永才刘闯李津
- 关键词：疏水层析汉逊酵母HBSAG
- 文献传递
- Workbeads系列介质及C4介质层析精制纯化HBsAg研究
- 目的:研究瑞典Bio-Work公司Workbeads 40/10000 Bus low系列3146VL、3147L、3148H、3149VH四型疏水层析柱及BIACIM mono.ithsC4用于汉逊酵母表达HBsAg精...
- 李彩梅张德有马锐许宁杨旭琴沈永才王曦刘英微李津
- 文献传递
- 美国授权乙型肝炎疫苗相关专利分析被引量：1
- 2011年
- 专利是世界上最大的技术信息源,目前,各国每年出版的专利文献占科技出版物的1/4,内容包含了世界科技信息的91%～95%[1]。专利是一项发明的首次公开,其披露的技术信息有80%～94%是从其他途径无法得到的,
- 苏锦锋李彩梅许宁
- 表达乙型肝炎表面抗原重组汉逊酵母细胞破碎率的检测被引量：2
- 2010年
- 目的建立快速检测表达乙型肝炎表面抗原(HBsAg)重组汉逊酵母细胞破碎率的方法。方法分别以显微镜计数法和染色后毛细管离心法检测表达HBsAg的重组汉逊酵母细胞破碎率,并采用Lowry法检测细胞破碎前后上清液中蛋白质含量,以间接评价细胞破碎率。3种方法均以表达HBsAg的重组酿酒酵母细胞作为对照。结果显微镜计数法可直接计算出细胞的破碎率,结果可靠,但不同人员检测数据存在差异;毛细管离心法检测细胞破碎率结果与显微镜计数法接近,且较显微镜计数法稳定,汉逊酵母细胞破碎悬液经考马斯亮蓝染色效果较好;Lowry法检测细胞破碎后的蛋白释出度与细胞破碎率呈对应性。结论 3种实验方法均可评价细胞破碎率,毛细管离心法快速简便,在实际生产过程中较为实用。
- 王曦杨旭琴刘英薇许宁马锐张德有程晔李彩梅李津
- 关键词：酵母菌汉逊酵母酿酒酵母着色剂
- 重组汉逊酵母表达的乙型肝炎病毒表面抗原疏水层析图谱的峰形规律分析
- 2013年
- 目的探讨疏水层析纯化重组汉逊酵母(Hansenula polymorpha,HP)表达的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)层析图谱与蛋白含量及HBsAg含量的相关性。方法采用疏水层析纯化8批HP-HBsAg小量试验样品和5批小量验证试验样品及5批酿酒酵母表达的HBsAg对照试验样品,采用Lowry法和电化学发光法(Electrochemiluminescentimmunoassay,ECLIA)分别检测纯化样品中蛋白含量和HBsAg含量,并计算HBsAg的回收率;通过几何法封闭紫外监测图谱特征峰图形,用数字求积仪采用积分法求出各封闭特征峰的图形面积,并进行分析;取小量验证试验1批样品的层析主峰和副峰收液进行电镜观察。结果 8批HP-HBsAg小量试验和5批HP-HBsAg小量验证试验HBsAg的平均回收率分别为70%和54%。HP-HBsAg疏水层析图谱由两部分构成:穿透峰和目标峰(HBsAg峰),目标峰可见高低不同的两个峰(主峰与副峰);对照图谱中有穿透峰和目标峰。对目标峰进行量化分析,主峰、副峰与目标峰的面积比值分别与其所对应的收集量、蛋白含量和HBsAg含量比值相关。电镜观察可见小量验证试验样品主峰收液中HBsAg颗粒大小均一,副峰收液中HBsAg颗粒大小不均一。结论疏水层析纯化重组HP表达的HBsAg效果良好,通过峰形之间面积比值,可获得峰形所对应的收集量、蛋白量和HBsAg量比值,为HBsAg的进一步纯化提供了参考。
- 许宁张德有马锐冯潇磊张旭杨旭琴李彩梅柳蔷沈永才李津
- 关键词：疏水层析汉逊酵母峰形
- WorkBeads系列介质与C4介质层析纯化汉逊酵母表达的HBsAg效果的比较
- 2012年
- 目的比较WorkBeads 40/10000 Bus low系列3146VL、3147L、3148H、3149VH 4型不同丁基密度的疏水层析柱与BIA CIM Monoliths C4纯化汉逊酵母表达的HBsAg的效果。方法将HBsAg溶于不同的上样缓冲液中,分别上样于4型WorkBeads预装层析柱和C4丁基层析柱,用不同的洗脱缓冲液洗脱,分别收集上样流穿峰和洗脱峰,测定HBsAg含量,并计算HBsAg的流穿率和洗脱率,筛选最佳上样缓冲液和洗脱缓冲液。结果 3147L型柱最适于HBsAg纯化工艺,含4%硫酸铵的20 mmol/L PB是理想的上样缓冲液,20 mmol/L PB和含30%异丙醇的20 mmol/L PB均不是理想的洗脱缓冲液。CIMMonoliths C4最佳上样缓冲液是含3%硫酸铵的50 mmol/L MOPS和含4%硫酸铵的20 mmol/L PB;含0.1%Triton-100的50 mmol/L MOPS是最佳的洗脱缓冲液。结论可多次重复使用的WorkBeads系列介质和可耐受高流速的快速纯化介质CIMMonoliths C4均可用于汉逊酵母表达的HBsAg的纯化。
- 李彩梅张德有马锐许宁杨旭琴沈永才王曦刘英微陈兴李津
- 关键词：CIMMONOLITHSC4汉逊酵母
- 重组汉逊酵母细胞破碎技术研究
- 目的:比较分析球磨法、低温超高压破碎法和YeastBuster细胞裂解液法三种技术破碎重组汉逊酵母细胞的适用性。方法:用球磨法、低温超高压破碎法和YeastBuster细胞裂解液法分别破碎表达HBsAg的重组汉逊酵母细胞...
- 王曦李彩梅劳文燕张德有马锐许宁杨旭琴朱亭玉刘英微李津
- 关键词：球磨
- 文献传递
