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大鼠骨髓来源树突状细胞成熟过程中微小RNA表达谱变化被引量：2: 2013年; 目的观察树突状细胞（Dc）成熟过程中微小RNA（miRNA）表达谱的变化。方法将大鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞（imDC）用脂多糖（LPS）刺激，分别于O、12、24h后提取总RNA，进行miRNA芯片杂交，应用生物信息学方法进行miRNA表达谱数据分析。结果与未受LPS刺激的imDC比较，刺激12h之后的DC有54种miRNA的表达出现显著改变，其中44种miRNA表达下调2倍以上，10种表达上调2倍以上；与未刺激的imDC比较，刺激24h之后的DC有92种miRNA的表达出现显著改变，其中52种miRNA表达下调2倍以上，40种表达上调2倍以上。挑选不同时相表达变化显著的19个miRNA做靶基因预测，发现同时被3个miRNA作用的靶基因有4个（WEEl、CHKA、CDC37L1、RGDl359108）。结论DC的成熟过程中，miRNA表达谱出现显著变化，推测其中某些miRNA在DC成熟过程中扮演重要角色。; 周亚星杨晓俊徐泽宽吴文溪; 关键词：骨髓树突状细胞

microRNA-27a对树突状细胞表型及功能的影响被引量：5: 2015年; 目的:研究microRNA-27a(miR-27a)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激的小鼠树突状细胞(Dendritic cell,DC)的成熟和细胞因子分泌的影响。方法:小鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞(immature dendritic cell,im DC)转染miR-27a的模拟物(miR-27a mimics)后,用LPS刺激24 h,采用流式细胞仪检测其表面共刺激分子CD80、CD86及MHCⅡ表达,ELISA方法检测其上清中的IL-12p70及IL-10蛋白水平,RT-PCR方法检测其细胞内IL-12p40及IL-10 mRNA水平,混合淋巴细胞反应(MLR)检测其刺激T细胞增殖能力。结果:与未处理的im DC比较,LPS刺激24 h后的DC表面的共刺激分子CD80、CD86及MHCⅡ表达均显著增高(均P<0.001);LPS刺激24 h后,与对照组比较,转染miR-27a mimics细胞的共刺激分子CD80、CD86及MHCⅡ表达均显著降低(均P<0.001),且显著抑制IL-12分泌(P<0.01)、促进IL-10分泌(P<0.05),并显著减弱LPS刺激的DC促CD4+T细胞增殖的能力(P<0.01)。结论:miR-27a影响小鼠树突状细胞的成熟以及细胞因子的分泌。; 刘信攸周阳春王瑶杨晓俊沈历宗吴文溪; 关键词：骨髓来源树突状细胞细胞因子

大鼠骨髓来源树突状细胞外泌体的提取及功能研究被引量：2: 2010年; 目的:探讨在不同成熟状态下树突状细胞(dendritic cell,DC)分泌的外泌体(exosomes,Dex)的制备、提取及体外功能鉴定。方法:F344大鼠骨髓来源DC培养6后分为2组,一组为未成熟树突状细胞组(immature DC,imDC):直接收集上清;一组为成熟树突状细胞组(mature DC,mDC):每孔加入终浓度为1μg/ml的LPS培养48h后,收集上清。然后用多步离心法分离得到Dex,流式细胞术检测两组Dex的表型,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测两组Dex与Wistar大鼠骨髓来源的imDC共培养上清的白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素12(IL-12p70)的含量,混合淋巴细胞实验(MLR)检测共培养DCs刺激T细胞增殖能力。结果:与mDC分泌的exosomes相比,imDC分泌的exosomes表面中度表达MHC-Ⅱ类分子、低表达CD80、CD86、CD40共刺激分子,而且与Wistar大鼠骨髓来源的imDC共培养后刺激IL-12p70分泌能力较低(P<0.05),刺激T淋巴细胞增殖的能力也较mDC分泌的exosomes组弱(P<0.05)。结论:不同成熟状态下的DC分泌的exosomes功能各异,可能在宿主的免疫反应中发挥不同的作用。; 孟松杨晓俊徐皓朱春富姜红吴文溪; 关键词：树突状细胞外泌体混合淋巴细胞反应免疫反应

经脾脏注射未成熟树突状细胞对大鼠小肠移植免疫耐受的诱导作用被引量：2: 2009年; 目的:研究经脾脏注射未成熟树突状细胞(iDC)对大鼠小肠移植免疫耐受的诱导。方法:健康成年F344大鼠为供体,SD大鼠为受体。随机分为4组(n=10),A组(阴性对照组):移植前7天,受体经阴茎背静脉注射生理盐水1ml;B组(阴性对照组):移植前7天,受体经脾脏注射生理盐水1ml;C组(iDC阴茎背静脉注射组):移植前7天,受体经阴茎背静脉注射供体的iDC,细胞数为2×106个;D组(iDC脾脏注射组):移植前7天,受体经脾脏注射供体的iDC,细胞数为2×106个。4组1周后行大鼠异位节段性小肠移植术。观察各组受体存活情况,移植小肠采用病理学检查及细胞凋亡检测。结果:D组大鼠移植小肠存活时间为(17.50±1.05)天,较A组(7.17±1.17)天、B组(7.33±1.51)天、C组(12.83±2.79)天显著延长;D组移植小肠炎性细胞浸润、黏膜组织结构破坏程度和黏膜细胞的凋亡数目明显低于A、B、C组。结论:经脾脏注射供体来源的iDC,可在一定程度上诱导受体产生免疫耐受,显著延长受体大鼠小肠移植术后的存活时间。; 张国强吴文溪朱春富徐皓杨晓俊魏尉朱正才; 关键词：树突状细胞免疫耐受小肠移植

骨髓来源半成熟树突状细胞诱导大鼠小肠移植免疫耐受被引量：3: 2010年; 目的观察髓样分化因子88（MyD88）沉默的半成熟树突状细胞（DC）诱导大鼠小肠移植模型免疫耐受.方法供体乃44大鼠,受体Wistar大鼠.随机分为3组（n=6）.A组（半成熟DC组）移植前7d经阴茎背静脉注射半成熟MyD88沉默DC（2×106细胞数）,B组（未成熟DC组）移植前7 d经阴茎背静脉注射未成熟DC（2×106细胞数）和C组（阴性对照组）移植前7 d经阴茎背静脉注射1 ml生理盐水.3组均于注射7 d后行大鼠异位节段性小肠移植术,观察统计各组受体存活情况,检测受体血清中的促炎症因子白细胞介素（IL）-2、干扰素（IFN）-γ等的变化.结果半成熟MyD88沉默DC组[（13.7±1.2）d,n=6]较未成熟DC组[（8.0±1.0）d,n=6,P〈0.05]和阴性对照组[（6.0±0.8）d,n=6,P〈0.05）存活时间显著延长,同时受体血清中IL-2和IFN-γ等促炎症因子的表达明显降低（P〈0.05）,病理改变亦较轻微.结论 MyD88沉默的半成熟DC具有独特的表形和功能,能够诱导受体产生特异性免疫耐受,显著延长受体术后的存活时间.; 孟松杨晓俊朱春富姜红吴文溪; 关键词：树突状细胞免疫耐受 MYD88 小肠移植

小干扰RNA抑制大鼠不成熟树突状细胞MyD88基因的表达: 2011年; 目的观察小干扰RNA（siRNA）对大鼠骨髓来源不成熟树突状细胞（iDC）MyD88基因表达的抑制作用。方法采用粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子体外培养大鼠骨髓来源iDC；设计并合成针对MyD88基因的siRNA，阳离子脂质体作为转染介质；siRNA转染iDC48h后，分别检测iDC活力、转染效率、表面分子表达、吞噬能力、MyD88基因mRNA转录水平及蛋白表达。结果培养6d后收集iDC。采用适当浓度siRNA（1ug／500ul）和阳离子脂质体（3ug/500ul）转染48h，转染iDC活力平均（98．50±1．04）％，转染效率平均（85．60±3．50）％，转染iDC表面分子与未转染iDC比较无显著差异，转染前后iDC吞噬能力无湿著变化，MyD88基因mRNA转录水平和蛋白表达分别为内参的0．098±0．012和0．087±0．015。结论化学合成MyD88-siRNA是诱导iDCMyD88基因沉默的一种有效、可行的方法。; 朱春富王仕忠杨晓俊徐皓吴文溪; 关键词：树突状细胞 MYD88 RNA干扰 TOLL样受体

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杨晓俊