柳丽平
- 作品数：4 被引量：24H指数：3
- 供职机构：郑州大学生物工程系更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 杜氏盐藻cDNA文库的构建与KCBP基因的克隆及功能分析
- 近年来，随着对莱茵衣藻等研究的广泛开展，运用藻类基因工程的手段可以构建高产、优质、抗逆的藻类新品种，还可以生产燃料、降解污染物以及构建藻类表达系统生产大量廉价的蛋白和药物来研究并治疗人类疾病。作为单细胞生物的杜氏盐藻具有...
- 柳丽平
- 关键词：杜氏盐藻CDNA文库功能分析基因克隆
- 产高温碱性蛋白酶菌株筛选及酶学性质研究被引量：12
- 2010年
- 从高温堆肥土样中筛选到一株高产蛋白酶的菌株,经鉴定为Bacillus subtilis,命名为I15.对最适产酶发酵条件进行了优化,并研究了发酵产蛋白酶的酶学性质.结果表明,玉米淀粉和豆饼粉是该菌发酵产蛋白酶的最适经济碳氮源;该蛋白酶属高温碱性蛋白酶,具有很强的热稳定性和酸碱稳定性.另外,突出的性质是该蛋白酶对表面活性剂和温和型去垢剂具有超强的耐受性,将具有广阔的市场前景.
- 翁海波敬蔚然杨丹丽柳丽平王志强
- 关键词：酶学性质
- 杜氏盐藻寡糖基转移酶亚基STT3a功能结构域的克隆与表达分析被引量：9
- 2010年
- 为了研究STT3a基因在杜氏盐藻耐盐及鞭毛再生方面的作用,根据衣藻、拟南芥等STT3a蛋白的氨基酸高度保守序列VCVFTA、DVDYVL设计一对简并引物,采用RT-PCR及3'RACE的方法扩增杜氏盐藻STT3a蛋白功能结构域的cDNA序列。序列分析显示克隆的cDNA全长1650bp,具有一定保守性,与衣藻、拟南芥和人的相似性分别为48%、50%和46%。实时荧光定量PCR结果显示杜氏盐藻STT3amRNA水平随着盐浓度的升高而逐渐增加,其水平在3.5mol/LNaCl浓度时比在1.5mol/LNaCl浓度时升高了11倍(P<0.01)。另外,与没有脱鞭毛的杜氏盐藻相比,STT3amRNA在鞭毛再生过程中持续高表达。本研究显示杜氏盐藻STT3a基因的高表达可以增强其盐适应和鞭毛再生能力。
- 王翠李杰柳丽平曾磊薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻耐盐
- 杜氏盐藻cDNA文库的构建及KCBP基因的克隆被引量：4
- 2010年
- 目的:构建杜氏盐藻cDNA文库并从该文库中筛选类驱动蛋白钙调素结合蛋白(KCBP)基因cDNA序列。方法:取对数生长期的杜氏盐藻细胞,提取总RNA并分离纯化mRNA,反转录合成双链cDNA,连接到pAP3neo载体上,采用电转化法将重组质粒转化大肠杆菌DH10B。计算平板上单菌落数,测定文库的滴定度和重组率。运用PCR法筛选含有KCBP基因特异片段的质粒。结果:文库滴定度为5.6×106pfu/mL,重组率在90%左右,插入片段长度在0.4～6.0kb,平均长度为1.9kb。利用PCR法从该文库中筛选到了含有新基因KCBP特异片段的单菌落,经测序与cDNA末端快速扩增(RACE)-PCR获得的杜氏盐藻KCBP基因cDNA序列相符,此序列属于kine-sin-14家族。结论:成功构建杜氏盐藻cDNA文库,并从该文库筛选出一个kinesin样cDNA序列。
- 柳丽平李杰王翠阎赟梦薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻CDNA文库
