殷娴
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：江苏省普通高校研究生科研创新计划项目国家科技重大专项转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 调控黑曲霉葡萄糖转运系统增强柠檬酸的合成被引量：2
- 2019年
- 柠檬酸是目前世界上需求量最大的有机酸,年产量达到170万吨,主要由黑曲霉进行深层有氧发酵来生产。强化葡萄糖的吸收是增强柠檬酸合成的重要策略。对黑曲霉基因组中预测到的葡萄糖转运蛋白进行进化树分析和多序列比对,鉴定到与KlHGT1亲缘关系较近的高亲和力葡萄糖转运蛋白基因,其编码的蛋白质序列含11个跨膜区,命名为AnHGT1。在葡萄糖限制性培养基上进行生长测定,发现HGT1转化子的菌落直径比H915-1增加了50%~150%。通过在发酵后期添加30 g/L葡萄糖,发现HGT1的葡萄糖消耗速率比H915-1快12 h。最终HGT1转化子的柠檬酸产量比野生型菌株H915-1增加14.7%,发酵时间减少6 h,最大比产酸速率增加了29.5%。
- 殷娴李江华刘龙堵国成陈坚
- 关键词：柠檬酸黑曲霉
- 美洲商陆抗病毒蛋白基因（PAPs）与异戊烯基转移酶基因（ipt）共表达的初步研究
- 美洲商陆抗病毒蛋白(pokeweed antiviral proteins，PAPs)是在美洲商陆(Phytolacca amercana)的不同组织或不同生长阶段合成的一类具酶功能的核糖体单链失活蛋白(RIP)，兼具抗...
- 殷娴
- 关键词：美洲商陆抗病毒蛋白异戊烯基转移酶PAPSIPT
- 文献传递
- 转基因烟草中过量生长素对叶片生长发育的影响被引量：3
- 2013年
- 分别构建了iaaM、iaaM和ipt共表达植物转化载体,农杆菌介导转化烟草,RT-PCR鉴定转基因株系,ELISA方法分析叶片IAA、IPA和ZR含量.结果表明:叶片IAA含量高低依次为株系iaaM10、iaaM_ipt3和野生型;而细胞分裂素含量高低依次为iaaM_ipt3、野生型和iaaM10.随着内源IAA水平升高,气孔密度减小、保卫细胞长度增加、栅栏组织细胞增大和叶片厚度增加.讨论了生长素和细胞分裂素含量对叶片细胞生长发育的影响.
- 李朝霞殷娴江一希姜洋肖尊安
- 关键词：烟草异戊烯基转移酶基因生长素细胞分裂素
- 信号肽序列修饰的PAP cDNA克隆及高频率转基因烟草的获得被引量：3
- 2007年
- 通过RT-PCR从美洲商陆叶片中获得PAPN端氨基酸修饰的cDNA克隆PAP-sp1。构建携带PAP-sp1的植物转化载体pBPAP,利用农杆菌介导将PAP-sp1导入烟草品种K326叶片细胞,通过抗性筛选、组织化学和PCR鉴定获得了转基因烟草植株,按形成转基因不定芽的外植体数统计,烟草K326的转化率高达8.1%。攻毒实验表明,与对照植株相比,转基因烟草株系发病推迟,感病程度较低,开花结果提早。
- 万多荣殷娴陈晓博姜洋张海燕陈正华肖尊安
- 关键词：美洲商陆美洲商陆抗病毒蛋白烟草病毒抗性
- 优化黑曲霉柠檬酸生产菌株原生质体形成条件及表达系统的建立被引量：2
- 2016年
- 优化了黑曲霉柠檬酸生产菌株的原生质体形成条件并建立基因表达系统。利用酶解法制备原生质体,最优的酶解液配比为5 mg/m L溶壁酶、0.2 U/m L几丁质酶和460 U/m L葡萄糖醛酸酶。最优的渗透压稳定剂为0.7 mol/L KCl,菌丝层厚度50μm,菌体量为0.003 g/m L。在培养基中添加1 mmol/L Mn2+有助于减少原生质体形成所需的酶量,在培养基中添加葡萄糖醛酸酶有助于得到独立的孢子进行萌发,从而促进原生质体的形成。利用共转化的方式,可以同时将两个表达框整合到基因组上并实现基因表达。
- 殷娴庞冬洽韩瑞枝李江华刘龙堵国成陈坚
- 关键词：黑曲霉柠檬酸原生质体共转化
- ipt与PAPⅡ基因在烟草中共表达减轻PAPⅡ细胞毒性的初步研究
- 2011年
- 利用农杆菌介导方法,分别将PAPⅡ单基因、PAPⅡ基因和异戊烯基转移酶基因(ipt)共表达的双基因(PAPⅡ-ipt)导入烟草品种K326叶细胞中,半定量RT-PCR分析了转基因植株中PAPⅡ、ipt和核糖体蛋白大亚基基因(RPL3A)的表达,并进行了TMV攻毒实验。结果表明:双基因PAPⅡ-ipt对烟草的转化频率高达45.55%,为单基因PAPⅡ的转化频率(13.3%)的3.4倍;50%的转基因植株没有检测到转基因的表达,PAPⅡ-ipt表达的转基因植株中RPL3A基因的表达水平为PAPⅡ表达植株中的1.25倍,且生长发育正常,对TMV病毒的抗性有较大程度的提高。因此,ipt与PAPs基因共表达可作为克服PAPs细胞毒性的有效途径。
- 殷娴李朝霞吴国智程伟王晴陈正华张海燕肖尊安
- 关键词：美洲商陆抗病毒蛋白异戊烯基转移酶细胞毒性
- 转基因烟草的pap基因表达及其抗病毒生理的初步研究被引量：2
- 2008年
- 农杆菌介导将美洲商陆抗病毒蛋白基因(pap)导入烟草云烟87品种的叶肉细胞,经过抗性筛选和鉴定,获得转基因植株.利用RT-半定量法分析了Y1、Y2和Y3转基因株系的pap表达,以及攻毒前后叶片多酚氧化酶(PPO)、超氧物歧化酶(SOD)活性和可溶性蛋白质含量.结果表明:pap在Y1和Y2植株中表达,Y3植株中未检测到pap表达;攻毒后,Y1和Y2叶片中可溶性蛋白质含量、PPO和SOD活性较高,而Y3叶片中可溶性蛋白质含量、PPO和SOD活性在三者中最低,与对照相似.讨论了转基因植株中pap表达与其生理变化和病毒抗性的关系.
- 万多荣殷娴江一希陈晓博张海燕肖尊安
- 关键词：超氧物歧化酶可溶性蛋白质
- pap和ipt共表达与提高转基因烟草抗病性的初步研究被引量：1
- 2010年
- 通过构建pap与ipt共表达的双元载体,利用农杆菌介导,将pap与ipt共表达基因导入烟草K326品种的叶肉细胞,经过抗性筛选和鉴定,获得高表达的转基因植株,并对其进行了攻毒实验.结果表明:pap与ipt共表达基因转化烟草的转化率明显提高(25%),证实转基因细胞中ipt基因表达可降低PAP细胞毒性;接种烟草花叶病毒(TMV)后,pap高表达的转基因植株出现病症的时间延迟20 d,叶片失绿程度较轻,表明该转基因植株对病毒的抗性有一定程度的提高.
- 殷娴李朝霞张海燕吴国智程伟肖尊安
- 关键词：异戊烯基转移酶烟草花叶病毒
