王银
- 作品数：6 被引量：28H指数：3
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划长江学者和创新团队发展计划江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 哺乳动物肽聚糖识别蛋白抗菌作用及其机制的研究进展被引量：2
- 2013年
- 哺乳动物肽聚糖识别蛋白(PGRPs)是一类可识别肽聚糖的免疫激活分子,具有抗菌活性。它的抗菌机制与其他抗菌肽明显不同。最新研究发现,哺乳动物PGRPs通过与肽聚糖结合,激活在细菌中识别胞浆外错误折叠蛋白质分子的CssR-CssS或CpxA-CpxR双部件系统,最终导至细菌死亡。文中总结了肽聚糖识别蛋白的抗菌作用及其机制的相关研究进展。
- 郭睿王银
- 关键词：肽聚糖识别蛋白杀菌
- 牛疱疹病毒I型gB基因的原核表达
- 2013年
- 根据GenBank中BHV-1 Colorado 1毒株的全基因组序列,针对gB基因的主要B细胞免疫区域设计一对引物。提取BHV-1 Colorado 1毒株的基因组DNA,PCR扩增大小为585 bp的gB片段,将其克隆至pET-22b(+)原核表达载体并测序分析,同时用Nde I和Not I酶切鉴定。SDS-PAGE和Western blot试验结果证明,获得的可溶性gB重组蛋白能与牛传染性鼻气管炎病毒标准阳性WEI血清发生特异性反应,为ELISA等免疫诊断方法的建立奠定了物质基础。
- 李艳莉陶洁张信军王银朱国强
- 关键词：牛疱疹病毒GB基因包涵体蛋白免疫印迹
- 猪瘟疫苗中牛病毒性腹泻病毒2型的检测被引量：7
- 2012年
- 为对上海某猪场送检的一份猪瘟疫苗进行牛病毒性腹泻病毒(BVDV)检测,本研究将猪瘟疫苗样品接种于MDBK细胞,盲传15代后仍无致细胞病变效应,但间接免疫荧光试验表明接种该疫苗后的MDBK细胞能够被单克隆抗体BZ-53(BVDV-2)识别。采用BVDV-1和BVDV-2的5'-UTR的通用检测引物和针对BVDV E2的引物,对样品RNA进行RT-PCR检测,结果显示,样品能够扩增出约288 bp的BVDV特异性片段;此外,5'-UTR和E2基因片段的测序分析结果表明分离株属于BVDV-2,并且其E2基因与牛源XJ-04株(BVDV-2)的E2基因同源性最高(92.3%),而与猪源ZM-95株(BVDV-1)的E2基因同源性较低(64.5%)。由此证明,该猪瘟疫苗中的确污染有一株BVDV-2株。
- 陶洁王银王娟周虹李艳莉朱国强
- 关键词：猪瘟疫苗RT-PCR
- 猪源牛病毒性腹泻病毒SH-28分离株的全基因组序列及遗传进化分析被引量：3
- 2013年
- 为了解猪源牛病毒性腹泻病毒(BVDV)与牛源BVDV在遗传特性上的差异,本试验对实验室分离保存的1株猪源BVDV(SH-28)进行了全基因组测序。利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分段扩增了SH-28分离株的18条cDNA片段,分别克隆于pGEM-T质粒载体并进行测序,用CLUSTX(1.8)和Lasergene软件进行序列的剪切和拼接,最终获得SH-28基因组序列全长为12 279个核苷酸(nt),开放阅读框(ORF)长11 685nt,编码3 895个氨基酸(aa),5′-UTR和3′-UTR分别长385nt和206nt。全基因组进化树结果表明,虽然SH-28与HLJ-10同处于一个分支上,但其与XJ-04的全基因组核苷酸同源性最高(92.3%),而与另外2株猪源BVDV-1(ZM-95、SD0806)的亲缘性较远(70.0%、70.1%)。5′-UTR进化树结果显示,SH-28分离株属于BVDV-2a2基因亚型,而HLJ-10和XJ-04株属于BVDV-2a1。由此,我们推测SH-28很有可能是由牛源BVDV-2进化而来的,但不同于已发表的BVDV-2分离株。
- 陶洁王银廖金虎杨颖羊扬朱国强
- 关键词：BVDV同源性
- 抗牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的制备及双抗夹心ELISA检测方法的建立被引量：12
- 2012年
- 为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)双抗夹心ELISA检测方法,本研究将BVDV 890病毒株(BVDV-2)浓缩并纯化后免疫BALB/c小鼠,经常规技术进行细胞融合并筛选得到一株稳定分泌IgG的杂交瘤细胞株,命名为3F9。以BVDV单克隆抗体(MAb)IgM为捕获抗体,生物素标记的3F9为检测抗体,初步建立BVDV特异的双抗体夹心ELISA检测方法(BAS-ELISA)。采用建立的BAS-ELISA方法检测35份临床病牛血清样品,检出阳性样本13份;与RT-PCR的符合率达到94.29%;表明本研究所建立的BAS-ELISA方法可用于BVDV感染的临床诊断,为BVDV的免疫学研究奠定了基础。
- 蒋颖林燕清陶洁孟祥升段小丽王娟王银张信军王建业朱国强
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E2蛋白双抗体夹心ELISA
- 表达可溶性猪唾液酸黏附素重组腺病毒的构建和鉴定被引量：5
- 2014年
- 猪唾液酸黏附素(pSn)是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染宿主的重要受体。采用RT-PCR和基因合成方法构建能够表达猪Sn蛋白前4个Ig样结构域(Sn4D)和IgG1Fc片段融合蛋白的穿梭载体pShuttle-Sn4D-Fc,利用AdEasyTMAdenoviral Vector System制备重组腺病毒。透射电子显微镜观察表明,构建重组病毒rAd-Fc和rAd-Sn4DFc具有典型腺病毒形态;在重组腺病毒感染的细胞中,RT-PCR能检测到预期的Fc和Sn4D-Fc转录子;在重组腺病毒转导细胞裂解物及培养上清中,Western-blot能检测到预期的28ku Fc或72ku Sn4D-Fc蛋白;从重组病毒转导细胞培养上清中纯化的Fc和Sn4D-Fc蛋白为单一的条带,能被抗猪IgG或Sn抗体识别。结果表明:成功构建了分泌表达猪Fc片段和Sn4D-Fc融合蛋白的重组腺病毒,为用Sn可溶性受体阻断抗PRRSV感染研究打下基础。
- 郭睿陈阳何珊王银张鑫宇夏晓莉孙怀昌
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒重组腺病毒分泌表达
