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人乳头瘤病毒多肽与人免疫球蛋白G融合表达被引量：1: 2004年; 目的　将人乳头瘤病毒 16型 (Humanpapillomavirustype 16 ,HPV 16 )的晚期表达蛋白E7上的抗原 2 4肽 (从第38位氨基酸到第 6 1位氨基酸 )与人免疫球蛋白G的重链恒定区融合表达 ,并以此融合蛋白作为抗原 ,可能为HPV 16病毒感染防治提供免疫治疗方法。方法　利用PCR方法分别扩增HPV 16E7(38- 6 1) 2 4肽的DNA片段和人免疫球蛋白G的重链恒定区DNA片段 ,并构建到pET2 1a表达载体上 ,转化入E .coli中表达 ,利用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质免疫印迹 (Western blotting)的方法对表达结果进行鉴定。结果　构建的表达载体HPV16E7e hIgGHCCR pET2 1a经酶切鉴定和测序显示序列正确 ;通过SDS PAGE和Western blotting的鉴定 ,重组融合蛋白Mr 约 4 0 0 0 0 ,表达量可占菌体蛋白的 2 0 %左右。结论　成功构建HPV16 E7的抗原多肽片段和人免疫球蛋白G的重链恒定区的融合蛋白 ,并可在E .coli中高效表达。; 秦焱胡美浩; 关键词：人乳头瘤病毒16型子宫颈癌免疫球蛋白G 重组蛋白

线虫中的小分子热休克蛋白HSP12.1具有类分子伴侣活性被引量：4: 2007年; 很多种类的小分子热休克蛋白(small heat shock protein,sHSP)都能在胁迫条件下抑制蛋白质的聚集,显示出了类分子伴侣活性,这种活性是ATP非依赖型的.从已经进行的实验发现,线虫C.elegans中最小的小分子热休克蛋白家族成员HSP12.1具有类分子伴侣活性,以胰岛素、乙醇脱氢酶和溶菌酶做底物发现HSP12.1能够一定程度地抑制底物的热聚集,虽然这种活性较一些经典的分子伴侣蛋白(线虫中的HSP16.1)要低.与此不同,另外3种和其分子质量相近的sHSP12s(HSP12.2、HSP12.3和HSP12.6)却没有检测出这样的类分子伴侣活性,虽然它们在一级结构上有很高的相似性.另外,在大肠杆菌中表达HSP12.1蛋白能够提高细菌在高温环境下的生存率,45℃处理后的生存率比未表达HSP12.1的菌高4倍左右,不过在线虫中是否发挥同样的功能还不是很清楚.从研究结果来看,C端“尾巴”结构域对sHSP发挥类分子伴侣活性不是必要的,在HSP12.1中没有C端“尾巴”结构域也有类分子伴侣活性就证明了这一点.N端结构域可能在发挥类分子伴侣活性中发挥比较重要的作用,当然α-crystallin结构域也可能参与到发挥这样的功能当中.; 秦焱王慧昌增益; 关键词：线虫

人16型乳头瘤病毒“假病毒”的制备被引量：1: 2006年; 利用杆状病毒表达体系,在sf9细胞中表达人16型乳头瘤病毒(Human Papillomavirus type16,HPV16)的晚期表达蛋白L1,通过超速离心的方法得到HPV16病毒样颗粒(virus like particles,VLPs)。VLPs经过DTT和EDTA处理解聚成L1蛋白,将构建好的真核表达载体E6E7-pcDNA3.1+与解聚的L1蛋白混合,透析除去DTT和EDTA并逐渐升高Ca2+的浓度,解聚的L1能够重新聚集成VLPs,其中一部分VLPs包裹了真核表达载体,和天然的人乳头瘤病毒的构成很相似,作者称之为“假病毒”。; 秦焱崔红莲胡美浩; 关键词：杆状病毒表达系统假病毒

人乳头瘤病毒疫苗的研究: 人乳头瘤病毒(Humanpapillomavirus,HPV)，能够引起人类皮肤或粘膜形成多种良性疣甚至诱发产生恶性肿瘤，尤其是某些类型的HPV病毒，例如HPV16、HPV18可以引起人宫颈癌(humancervical...; 秦焱; 关键词：人乳头瘤病毒疫苗免疫治疗抗原决定簇核酸疫苗假病毒

人16型乳头瘤病毒“假病毒”免疫保护作用的研究被引量：2: 2006年; 目的评价构建的人16型乳头瘤病毒“假病毒”的免疫保护作用。方法利用杆状病毒表达系统在sf9昆虫细胞中表达组装了人16型乳头瘤病毒病毒样颗粒,将病毒样颗粒解聚后与真核表达质粒混合,重聚集成“假病毒”。用这种“假病毒”对小鼠进行免疫保护作用研究。结果小鼠经“假病毒”免疫后,可以在血清中检测到特异性的IgG,在阴道分泌物中检测到特异性的IgA,脾淋巴细胞可以检测特异性的CTL活性。结论“假病毒”; 秦焱崔红莲胡美浩; 关键词：假病毒 IGG IGA

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秦焱