臧丽娜
- 作品数：16 被引量：36H指数：4
- 供职机构：东北林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 杨树类锌指基因ZFL的功能分析
- 2013年
- 以毛果杨叶片cDNA为模板,采用PCR技术分离出杨树ZFL基因,序列分析结果表明该基因序列开放读码框315 bp,共编码104个氨基酸,推导的蛋白质分子量为11.202 kDa,理论等电点9.83,命名为PtrZFL。对ZFL基因进行实时荧光定量PCR表达分析,结果表明:甘露醇、NaCl、H2O2、ABA、低温胁迫都能诱导PtrZFL基因的表达,且PtrZFL表达量在ABA处理3 h时达到最高,然后随处理时间延长而逐渐降低;低温(4℃)胁迫在6 h后能显著诱导PtrZFL基因表达,并随着低温处理能一直保持较高水平的表达。根据毛果杨基因组信息设计引物,获得了PtrZFL基因上游1 000 bp的启动子序列,序列分析结果表明该启动子包含有多个与胁迫相关的元件,如抗冻、缺水、抗寒、脱落酸响应元件ABRE、MYB和WRKY。GUS活性检测发现,该启动子在转基因拟南芥整株中都有表达,但在根部和成熟叶片中表达较强,其他位置表达微弱。
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- 关键词：杨树QRT-PCR启动子胁迫
- 毛果杨Eukaryotic translation initiation factor 5A(eIF5A)同源基因的生物信息学分析被引量：4
- 2014年
- 为研究毛果杨eIF5A基因间的同源性及其进化关系,以毛果杨的eIF5A基因为研究对象,利用生物信息学软件及网站对其进行碱基分布、氨基酸组成、亲疏水性、保守区以及二级结构和三级结构的预测与分析,并与其他物种的eIF5A氨基酸序列进行多重比对与进化分析。结果表明,4个毛果杨eIF5A基因定位于不同染色体上,且都只含有5个外显子;研究还发现不同成员间氨基酸数目、氨基酸序列间的疏水性存在一定的差异;亚细胞定位分析表明,4个eIF5A蛋白均定位于细胞质上;二级结构预测结果显示,4个eIF5A氨基酸序列以无规则卷曲、扩展链和α-螺旋为主要组成部分,且4条氨基酸序列三维结构十分相似。上述结果均为毛果杨eIF5A基因家族的进一步功能分析提供了一定基础。
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- 关键词：EIF5A生物信息学
- 白桦BpMADS3基因的功能分析被引量：3
- 2014年
- 利用RT-PCR技术,揭示了BpMADS3基因在白桦不同组织中的差异表达模式:BpMADS3基因仅在花器官中强烈表达,在茎、叶组织中不表达。采用染色体步移法克隆BpMADS3基因上游启动子,获得1 426 bp长度启动子序列,构建BpMADS3基因启动子驱动GUS基因植物表达载体,在拟南芥转基因植株中GUS染色表明,GUS活性集中在萼片和心皮中。在拟南芥ap1突变体中过量表达BpMADS3基因,能恢复拟南芥ap1突变体花器官的正常发育。BpMADS3基因转化烟草发现,转基因植株出现早花表型,且转基因烟草植株中相关开花基因表达水平均上调。
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- 关键词：白桦突变体早花启动子
- 小黑杨PsnAP1-1及PsnAP1-2基因的克隆及原核表达分析被引量：3
- 2014年
- 植物由营养生长向生殖生长的过程中,APETALA1(AP1)基因在其中起重要作用。我们采用RT-PCR方法克隆了2个杨树AP1同源基因全长cDNA,暂时命名为PsnAP1-1(GenBank No.KC866354)和PsnAP1-2(GenBank No.KC866355)。PsnAP1-1编码241个氨基酸,开放阅读框长度为726 bp,蛋白质分子量为28.1 kD,等电点为8.19;PsnAP1-2编码249个氨基酸,开放阅读框长度为750 bp,蛋白质分子量为28.7 kD,等电点为9.07。同源性分析表明,PsnAP1-1的核苷酸序列与拟南芥AP1同源基因的一致性为71%,而PsnAP1-2的同源性为67%。半定量RT-PCR分析表明,杨树PsnAP1-1和PsnAP1-2基因在根、茎、叶中均不表达,仅仅在花芽组织中表达。分别构建了原核表达质粒pET-PsnAP1-1和pET-PsnAP1-2,并转化大肠杆菌BL21,以IPTG诱导该融合蛋白体外表达,结合SDS-PAGE分析,证实这2个基因均表达了约35 kD的蛋白,该结果为深入研究AP1与其他MADS-box蛋白的互作机制及花分生组织的分子调控奠定了基础。
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- 关键词：原核表达
- 白桦开花抑制因子BpFLC与BpSVP酵母表达载体的构建及互作验证被引量：2
- 2015年
- 为深入研究白桦开花抑制因子FLC与SVP的相互作用的分子机理,利用PCR技术从白桦幼叶cDNA中克隆出BpFLC和BpSVP基因序列,利用NdeⅠ和EcoRⅠ限制性内切酶将BpFLC和BpSVP分别整合进酵母表达载体pGBKT7和pGADT7中。pGBKT7-BpFLC及pGBKT7-BpSVP转化酵母Y2Hgold菌株显示无自激活与毒性作用。酵母Y2Hgold[pGBKT7-BpFLC×pGADT7-BpSVP]、Y2Hgold[pGADT7-BpFLC×pGBKT7-BpSVP]均可在QDO/A/X平板上生长,并显示蓝色,说明能激活报告基因HIS3、ADE2、AUR1-C、MEL1,由此表明BpFLC与BpSVP蛋白能够结合,存在互作关系。
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- 关键词：白桦酵母双杂交
- 拟南芥类锌指基因AT3G02790/AT5G16470纯合双突变的筛选及其表型分析被引量：2
- 2012年
- 以拟南芥T-DNA插入突变体AT3G02790和AT5G16470为亲本,通过人工杂交技术获得杂合体后,结合基因分离定律和PCR技术筛选出拟南芥纯合双突变株,并对拟南芥纯合突变体的表型进行了初步分析,结果显示:突变体与野生型植株表型无明显差异,推测该基因为功能未知的新基因。
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- 关键词：拟南芥表型胁迫
- 白桦成花调控因子BpFLC及BpSVP协同调控晚花的作用机理研究
- 开花是植物由营养生长向生殖生长转变的开关，是植物生命周期重要组成部分。植物成花调控研究主要集中在一年生模式植物拟南芥中，多年生植物成花诱导是更为复杂的遗传调控过程，其调控开花的分子机制仍不清楚。鉴于草本植物与木本植物在发...
- 臧丽娜
- 关键词：白桦
- 白桦BpFLC基因的克隆及遗传转化
- 开花植物从营养生长向生殖生长的转变是由内因和外因共同作用的结果。FLC是抑制花期转变的关键因子，是多种调控途径的作用因子。本文从白桦中分离出FLC基因，命名为BpFLC。对其进行初步研究，主要结果如下: 1.从白桦叶片...
- 臧丽娜
- 关键词：基因克隆
- 文献传递
- 小黑杨PsnAP1基因转化烟草的研究被引量：4
- 2014年
- [目的]研究杨树APETALA1基因的功能,为缩短林木育种周期及杨树成花机理的研究提供参考。[方法]以杨树为研究对象,构建植物表达载体,利用农杆菌介导法转化烟草叶盘,并对转基因烟草进行分子水平鉴定。[结果]杨树APETALA1基因已经整合入烟草基因组中,且转基因烟草比野生型提早开花。[结论]杨树APETALA1基因能促进转基因植株开花,为研究杨树成花机理奠定了基础。
- 李爽郑唐春臧丽娜曲冠证
- 关键词：杨树烟草早花
- 小黑杨PsneIF5A2/4基因植物表达载体的构建及在烟草中的转化研究
- 2014年
- [目的]研究杨树eIF5A基因的功能,为林木抗性育种研究提供参考。[方法]构建植物表达载体,利用农杆菌介导法转化烟草叶盘,并对转基因烟草进行分子水平鉴定。[结果]杨树eIF5A基因已经整合入烟草基因组中,且转基因烟草比野生型烟草叶片抗重金属能力提高。[结论]杨树eIF5A基因能促进转基因烟草的抗胁迫能力,为林木抗逆育种机理奠定了理论基础。
- 赵思雯郑唐春臧丽娜曲冠证
- 关键词：SPPEIF5A烟草
