臧文巧
- 作品数：40 被引量：127H指数：7
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- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部“211”工程河南省自然科学基金更多>>
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- miR-451对食管癌EC9706细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨miR-451对食管癌EC9706细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响.方法:化学合成miR-451mimics,脂质体包裹转染EC9706细胞为miR-451组,同时设立无关序列(Scramble-miR)对照组、脂质体对照组和空白对照组.转染后48h,荧光定量RT-PCR检测miR-451表达量的变化,Westernblot检测Bcl-2、AKT和磷酸化AKT蛋白表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变;MTT法检测转染后l、2、3、4、5、6d各组细胞增殖率.结果:miR-451组的miR-451表达水平显著上调(P<0.01,F=69.26),为空白对照组的15.84倍;miR-451组细胞Bcl-2、AKT和磷酸化AKT蛋白表达均显著下调(P<0.05,F=5.83);miR-451组细胞凋亡率为12.07%±1.12%,与3个对照组比较显著升高(P<0.01,F=26.72);miR-451组平均侵袭细胞数为47.4±7.4,与3个对照组比较显著降低(P<0.01,F=34.55).miR-451组细胞的生长在转染后2d出现显著抑制(P<0.05,F=5.95),并且随时间的延长而日益显著.结论:上调miR-451表达可抑制食管癌EC9706细胞增殖和侵袭,促进细胞凋亡.
- 冷弘臧文巧王涛王媛媛马晶赵国强
- 关键词：食管癌细胞系增殖凋亡
- 豫医无毛小鼠无毛基因突变部位的定位和分析
- 目的豫医无毛小鼠(Yuyi hairless mice,YYHL)是河南省实验动物中心经10多年培育建立的国内唯一无毛小鼠近交系.说明该段序列在小鼠无毛基因内保守性较高,并同时排除了突变发生在该部位的可能性.该实验为该科...
- 臧文巧
- 关键词：无毛小鼠豫医无毛小鼠昆明小鼠无毛基因基因突变终止密码子
- 文献传递
- 靶向CXCR4的siRNA对人食管鳞癌EC9706细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用被引量：4
- 2009年
- 目的探讨CXCR4siRNA对人食管鳞癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法建立人食管鳞癌细胞株EC9706裸鼠移植瘤动物模型,瘤旁注射化学合成CXCR4siRNA,同时以瘤旁注射阴性对照siRNA和PBS为对照。监测肿瘤生长变化,测量瘤质量。HE染色观察肿瘤病理学变化,RT-PCR、免疫组化方法检测CXCR4mRNA和蛋白变化。结果裸鼠体内实验结果显示,与对照组比较,CXCR4siRNA组肿瘤生长受到明显抑制,瘤质量下降;HE染色显示对照组肿瘤体积大、异形明显;RT-PCR、免疫组化结果表明CXCR4siRNA处理组CXCR4mRNA和蛋白表达下调。结论CXCR4siRNA能抑制人食管鳞癌EC9706细胞株裸鼠皮下移植瘤的形成,且能在体内有效下调CXCR4mRNA和蛋白的表达。
- 臧文巧轩小燕杜英李倩如李敏杨璇
- 关键词：食管鳞癌CXCR4裸鼠RNAI
- CLPTM1L与miR-494靶向关系的双荧光素酶报告实验验证被引量：4
- 2015年
- 目的:确定miR-494与CLPTM1L的靶向关系。方法:采用生物信息学方法预测miR-494与CLPTM1L基因的结合位点。采用PCR技术扩增CLPTM1L基因3'UTR片段,并克隆至pmir GLO载体,构建野生型及突变型重组双荧光素酶报告质粒。将培养的293T细胞分为4组,分别共转染miR-494或阴性对照和pmir GLO-CLPTM1L-W 3'UTR或pmir GLOCLPTM1L-M 3'UTR,检测4组细胞中荧光素酶活性。结果:酶切和测序证实成功构建了野生型及突变型重组双荧光素酶报告质粒pmir GLO-CLPTM1L-W 3'UTR和pmir GLO-CLPTM1L-M 3'UTR;与共转染miR-494 mimics和突变型CLPTM1L3'UTR质粒的293T细胞中荧光素酶活性(1.056 4±0.163 4)、共转染阴性对照序列和突变质粒的293T细胞中荧光素酶活性(0.961 3±0.177 9)或野生型质粒的293T细胞中荧光素酶活性(0.983 4±0.001 2)相比,共转染miR-494 mimics和野生型CLPTM1L 3'UTR质粒的293T细胞中荧光素酶活性(0.651 6±0.136 4)明显降低(F=4.476,P=0.040),其他3组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CLPTM1L与miR-494存在靶向关系。
- 张仁张圣洁张学研李彤臧文巧
- 奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶与亚叶酸钙治疗大肠癌的临床分析被引量：2
- 2006年
- 目的研究奥沙利铂（L-OHP）与氟尿嘧啶（5-Fu）及亚叶酸钙（CF）联合应用治疗晚期大肠癌的疗效和毒副反应。方法采用L-OHP130mg／m^2，静脉滴入4h，d1；CF200mg／m^2，静脉滴入2h，d1-5；5-Fu300mg／m^2（≤500mg／d），静脉滴入6h，d1-5（CF滴完后）；21d为1个周期。结果总有效率为53．3％，毒副反应以骨髓抑制、感觉神经毒性为主，白细胞下降发生率为46．7％，神经毒性发生率60％，本组无Ⅳ度毒副反应。结论L-OHP、5-Fu、CF联合应用治疗晚期大肠癌疗效肯定，毒副反应能耐受。
- 杨晓丽臧文巧
- 关键词：奥沙利铂亚叶酸钙5-氟脲嘧啶晚期大肠癌
- 多媒体教学之利弊分析被引量：7
- 2007年
- 目的探讨多媒体教学优势、弊端以及改进措施。方法对比不同多媒体教学方法对教学效果的影响。结果多媒体教学存在明显优势以及不可忽视的弊端。结论利用多媒体教学的优势,克服其弊端,使更有利于辅助教学,提高教学效果。
- 李倩如王娜臧文巧
- 关键词：多媒体教学
- 豫医无毛小鼠无毛基因部分内含子突变研究被引量：3
- 2006年
- 目的研究豫医无毛小鼠突变的分子机制。方法对豫医无毛小鼠和昆明小鼠的基因组DNA进行PCR扩增,对二者扩增片段克隆后测序,对结果进行比较,以确定豫医无毛小鼠无毛基因的特异性程度。结果本实验共测出豫医无毛小鼠DNA序列1 746 bp和昆明小鼠DNA序列1 733 bp,两者不同之处有32处,均位于内含子,突变形式包括插入、缺失和点突变。结论无毛性状的产生可能与内含子中的插入、缺失和点突变有关。
- 臧文巧马一君杨璇周晓丽李敏李倩如
- 关键词：豫医无毛小鼠基因突变内含子
- 人肠道病毒71型VP1和VP4的抗原融合表达及鉴定
- 2012年
- 目的:构建人肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)VP1-VP4重组融合蛋白表达体系.方法:构建EV71 VP1-VP4重组融合蛋白原核表达载体转化大肠杆菌DH5α,诱导表达融合蛋白VP1-VP4,SDS-PAGE和Western blot法进行鉴定.用融和蛋白包被ELISA板检测41例已知血清.结果:重组片段VP1-VP4测序结果与设计目的片段序列相符,重组载体构建成功;SDS-PAGE显示融合蛋白约42.8kDa,与预期值一致;Westernblot提示该融合蛋白可以和EV71 VP1、VP4抗体特异性结合.融合蛋白包被ELISA板能准确检测出41例血清中16例EV71阳性血清,与CA16无交叉反应.结论:表达的EV71 VP1-VP4融合蛋白具有良好的抗原性,可作为EV71感染检测抗原,为EV71诊断试剂和疫苗的研究奠定实验基础.
- 冷弘王娜王媛媛臧文巧李敏赵国强
- 关键词：EV71融合抗原融合PCR
- polβ高表达与食管癌细胞耐药的相关性被引量：8
- 2007年
- 目的:建立人食管癌顺铂耐药细胞系及稳定高表达人野生型DNA聚合酶beta(polβ)的食管癌细胞系,分析polβ高表达与食管癌细胞耐药的相关性.方法:顺铂(cDDP)中等浓度、间歇作用法历时9mo建立耐药细胞系Ec9706/cDDP;同时脂质体转染法将人野生型polβ重组绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-AC3转染入Ec9706细胞,经G418筛选得到稳定转染细胞系.荧光显微镜观察转染效果,普通倒置显微镜观察细胞形态变化.RT-PCR方法分别检测耐药细胞与转染细胞中polβmRNA的表达水平,MTT法检测各组细胞对cDDP的敏感性.结果:荧光显微镜下转染细胞荧光强,转染效率高,倒置显微镜下耐药细胞与转染前后细胞形态无明显改变.RT-PCR结果表明耐药细胞Ec9706/cDDP中polβ表达较亲本细胞增加,转染细胞的polβ表达较空载体转染细胞、对照细胞也增加.Ec9706/cDDP细胞耐药指数为15.70;转染后细胞对cDDP的敏感性降低,耐药指数为1.78.结论:成功建立了耐药细胞系Ec9706/cDDP与稳定高表达人野生型polβ的Ec9706细胞系,polβ的高表达可引起耐药性的产生,耐药细胞中polβ的表达也增高.polβ的表达与食管癌细胞的耐药性有一定相关性.
- 李敏臧文巧付庆李文涛董子明
- 关键词：DNA聚合酶Β转染食管肿瘤抗药性肿瘤四甲基偶氮唑蓝
- 人血管内皮生长因子mRNA靶向siRNA表达载体的构建和表达被引量：3
- 2007年
- 目的:构建人血管内皮生长因子(VEGF)mRNA靶向siRNA表达载体,观察其表达情况。方法:设计人VEGF靶向的发夹样siRNA,依据设计,合成2条互补的寡核苷酸链,退火后连接入pSUPERneo-GFP载体,转化扩增后得到重组载体pSUPERneo-GFP-siVEGF,进行序列测定。用脂质体转染法将重组载体转染食管癌细胞株Eca109,采用RT-PCR检测转染细胞VEGF mRNA的表达水平。结果:经过酶切鉴定与测序,pSUPERneo-GFP-siVEGF构建成功。稳定转染该重组体的Eca109细胞VEGF mRNA表达水平明显降低。结论:成功构建了针对VEGF mRNA的siRNA载体,转染细胞后可显著抑制VEGF mRNA的表达。
- 丁培杰杨书钦曹明瑞臧文巧陈宗德赵国强
- 关键词：RNA干扰VEGF
