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原核表达系统真核化对基因免疫效果的影响: 基因免疫作为一种新的免疫接种手段自问世以来,已在抗感染免疫等方面取得了一系列较为满意的结果,其本质特征主要是将含编码目的基因的表达载体直接注射至机体局部,表达相应抗原,诱导机体产生; 袁志刚熊思东; 文献传递

真核化的原核表达系统增强HBV preS2/S基因免疫的效果被引量：1: 2007年; 目的研究真核化的原核表达系统——pCMV-T7pol/pT7IRES-HBs双质粒共表达体系与常规真核表达质粒相比在真核细胞中的表达差异;基因免疫小鼠诱生特异性体液免疫应答的能力及二者所诱生的抗体亚型的差异。方法运用分子生物学方法构建真核化的原核表达系统,将构建的质粒进行基因免疫,应用DOT-EIA和ELISA等检测其所产生的抗体水平。结果①真核化的原核表达系统在真核细胞中的表达能力明显强于常规真核表达质粒。②真核化的原核表达系统基因免疫小鼠不仅可诱生特异性体液免疫应答,且具有明显增强效应(P<0·05)。③真核化的原核表达系统与常规真核表达质粒相比不仅可诱生同等程度的Th1型免疫应答,而且能够诱生更强的Th2型免疫应答(P<0·01)。结论真核化的原核表达系统——pCMV-T7pol/pT7IRES-HBs双质粒能诱导较强的体液免疫应答。; 袁志刚张进平王缨储以微徐薇熊思东; 关键词：基因免疫 HBV

原核表达系统真核化中的核定位信号对乙肝病毒(HBV)基因免疫效果的影响被引量：1: 2003年; 研究核定位信号对真核化的T7表达系统在真核细胞及基因免疫中表达HBsAg基因效率的影响。结果发现 ,在体外培养细胞中 ,无核定位信号的T7系统表达效率比有核定位信号组明显要高。基因免疫时 ,无核定位信号组诱发小鼠产生了针对HBsAg的特异性免疫应答 ,而含核定位信号的T7表达系统则未能诱发小鼠发生明显的免疫应答。提示T7系统是一种胞浆表达系统 ,将T7RNA聚合酶引入核定位信号后该系统的表达效率降低 ,甚至不能诱发特异性免疫应答。; 李永念熊思东袁志刚; 关键词：核定位信号乙肝病毒基因免疫

原核表达系统的真核化: 基于T7噬茵体RNA聚合酶(T7 RNAP)及其启动子之间识别的特异性和高效性而建立的表达系统,为目前在大肠杆菌中克隆和表达重组蛋白的最强大表达系统之一。其中,T7噬菌体启动子属于组成型的强启动子,被T7RNAP(约10...; 袁志刚熊思东; 文献传递

原核表达系统T7RNA聚合酶/启动子在真核细胞中表达目的基因的实验研究被引量：4: 2005年; 将目前高表达水平强大的原核表达系统之一T7RNA聚合酶启动子表达系统通过一系列改进引入真核细胞。通过转染真核细胞实验表明 ,采用真核启动子CMV调控T7RNA聚合酶的表达和在T7启动子下游插入EMCVIRES序列两种解决方案能使该原核表达系统在真核细胞高效表达目的基因 ,且能适应不同的真核细胞环境 ,是一良好的细胞类型非依赖的表达体系。; 袁志刚张进平储以微王缨徐薇熊思东; 关键词：T7 RNA聚合酶 T7启动子原核表达系统真核细胞

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袁志刚