谭孟群
- 作品数:54 被引量:119H指数:7
- 供职机构:中南大学湘雅医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金湖南省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- Hu联合GM-CSF对K562细胞生长-凋亡相关基因表达的影响被引量:7
- 2000年
- 目的:探讨羟基脲(hydroxyurea,Hu)及Hu联合粒系-巨噬系集落刺激因子(granulocyticmacrophagecolony-stimulatingfactor,GM-CSF)对慢性粒细胞白血病(chronicmyelogenousleukemia,CML)细胞株K562细胞生长及凋亡相关基因表达的调节效应。方法:以Hu及Hu联合GM-CSF培养K562细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)来分析培养48小时后bcr-abl、bax、c-myc基因表达水平。结果:Hu显著抑制bcr-abl基因表达,促进bax基因表达,但对c-myc基因表达无影响。GM-CSF可部分桔抗Hu对bcr-abl、bax基因表达的调节效应,显著上调c-myc基因表达水平。结论:除直接细胞毒作用外,Hu可通过下调bcr-abl和上调bax基因表达水平而诱导细胞死亡或凋亡。由于GM-CSF有部分持抗化疗药物的效应,故临床上在采用Hu治疗CML患者的同时,宜慎重使用GM-CSF。
- 陈汉春public.cs.hn.cn罗志勇罗赛群汤立军王吉伟谭孟群
- 关键词:羟基脲慢性粒细胞白血病GM-CSF
- 小鼠骨髓内皮细胞株的建立
- 2006年
- 【目的】对小鼠骨髓内皮细胞株的特性进行研究。【方法】用本室配制的含刺激内皮细胞生长因子的培养基(Endo-M)培养小鼠骨髓内皮细胞,经过长期传代培养后,获得表达vWF阳性的内皮细胞株。本文用传代培养、集落培养、不同的血清浓度对内皮细胞集落生成的影响以及生长曲线和流式细胞仪检测等方法对其进行了研究。【结果】vWF表达阳性的内皮细胞按1∶8传代,已传代20次。内皮细胞具有形成集落的能力,加入15%、20%的血清浓度时,集落的产率最高。通过流式细胞仪检测了第6代和第20代细胞的细胞周期,细胞进入S期的比例分别为11.5%和10.9%。【结论】小鼠骨髓内皮细胞经过长期培养后,已转化为内皮细胞株,已传代20次,其增殖能力没有减退。
- 王峰王绮如谭孟群
- 关键词:骨髓细胞小鼠
- 骨髓基质细胞条件培养液对体外培养条件下巨核细胞的扩增作用及对环磷酰胺处理小鼠血小板的促恢复作用
- <正>分离纯化骨髓成纤维细胞、内皮细胞和巨噬细胞,收集无血清骨髓成纤维细胞条件培养液(F-CM)、骨髓内皮细胞条件培养液(E-CM)和骨髓巨噬细胞条件培养液(M—CM), 分别离心、超滤,获得原液、分子量(mw)>101...
- 黄艳红周小莹王绮如谭孟群
- 文献传递
- 间质干细胞的生物学特征与临床应用
- <正> 在众多干细胞的研究中,间质干细胞(mesenchylhal stem cells,MSCs)以其体外分离、纯化简易,扩增迅速,并拥有向中胚层及神经外胚层来源的多种组织细胞分化的能力,已成为当今研究的热点。我们采用...
- 雷军谭孟群黄艳红王绮如
- 文献传递
- 2型腺相关病毒载体介导正常人β珠蛋白基因在重型地贫流产胎儿造血细胞中的表达被引量:4
- 2010年
- 目的:探讨2型重组腺相关病毒(recombin antadeno-associated virus 2,rAAV2)载体介导人β-珠蛋白基因转染地贫患者造血细胞治疗β-地中海贫血的可行性。方法:分离β41-42/β654杂合子型重型β-地贫流产胎儿造血细胞,经rAAV2-β-globin病毒转染(MOI=50)后移植入经X射线照射的BALB/c裸小鼠体内,分别于移植后14d、21d处死受体小鼠,RT-PCR及等位基因特异性PCR法检测人珠蛋白基因在受体小鼠体内的表达。结果:RT-PCR方法于3只受体小鼠骨髓样本中成功检测到人β-actin和人β-珠蛋白基因的表达,而21d处死的转染与对照小鼠外周血样本中未检测到人β-珠蛋白基因表达;等位基因特异性PCR方法在所有受体鼠体内同时检测到β41-42和β654突变基因,以及正常β-珠蛋白基因的表达,但rAAV2-β-globin转染组小鼠体内正常人β-珠蛋白基因表达水平明显高于对照组。结论:rAAV2可有效转染β41-42/β654杂合子型重型地中海贫血患者造血细胞,并通过exvivo途径介导β-珠蛋白转基因的体内表达,提高红系细胞内正常β-珠蛋白基因的表达水平。
- 田晶王峰薛金凤赵霏宋柳江谭孟群
- 关键词:重组腺相关病毒Β-地中海贫血
- rAAV-NGF-GFP载体的构建及鉴定
- 2016年
- 目的:构建携带神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的重组腺相关病毒载体(recombinant deno-associated virus,rAAV),为临床利用神经生长因子治疗阿尔兹海默病(Alzheimer’sdisease,AD)提供实验依据。方法:采用基因重组技术构建含有NGF基因的AAV-NGF载体,将pAAV-NGF-GFP、pRC、pHelper 3种质粒共转染HEK293细胞,包装获取重组腺相关病毒,采用SDS-PAGE胶和Dot-blot检测病毒纯度和滴度;重组腺相关病毒转染人类神经母细胞瘤细胞(SK),荧光显微镜下观察GFP表达。结果:成功构建rAAV-NGF-GFP载体,滴度为1.7×1010v.g/ml,将病毒转染SK细胞48 h后细胞中有荧光表达。结论 :构建的rAAV-NGF-GFP病毒载体可成功转染SK细胞。
- 薛金凤谭孟群田晶
- 关键词:神经生长因子腺相关病毒转染
- 晚期激活抗原-4在CD34^+造血干/祖细胞宫内移植早期归巢中的作用
- 2006年
- 目的探讨黏附分子晚期激活抗原-4(VLA-4)在脐血CD34+造血干/祖细胞小鼠宫内移植早期归巢中的作用。方法用密度剃度离心的方法分离脐血CD34+细胞,经SCF和IL-6扩增24h,在BALB/c母鼠怀孕第15天经胎鼠腹腔注射CD34+细胞,每只胎鼠约注射1×105个细胞。用PKH26标记细胞的方法追踪早期归巢情况。在VLA-4阻断实验中,CD34+细胞注射前用20μg/ml抗VLA-4单抗孵育30min。分别于注射后48h用流式细胞仪检测小鼠胎肝细胞中的人CD45+细胞。结果SCF+IL-6扩增后脐血CD34+细胞VLA-4表达由原来的(26·34±5·37)%增高至(65·67±8·72)%(P<0·01)。扩增的细胞经胎鼠腹腔移植48h后,在胎肝中可以见到PKH26标记的CD34+细胞,流式细胞仪检测胎肝中人CD45+细胞百分率为(26·54±9·56)%。CD34+细胞移植前经抗VLA-4单抗预处理后胎肝中人CD45+细胞检出率显著降低(3·57±1·25)%,P<0·01。结论VLA-4对CD34+造血干/祖细胞宫内移植早期归巢有重要作用。
- 区文超鲁树坤张芳婷王丹军聂李平柳金周小莹谭孟群
- 关键词:造血干细胞黏附分子归巢宫内移植
- 2型腺相关病毒载体介导的apoAⅠ和SR-BⅠ双基因表达对动脉硬化模型鼠保护效应的研究(英文)被引量:2
- 2011年
- 重组腺相关病毒载体(AAV)具有很多安全方面的特性,有利于其在动脉硬化方面的治疗研究.尽管如此,传统的介导单个基因的治疗效果并不是很理想,这都归因于动脉硬化疾病的发生是由于多种基因的缺陷而不是单单某一特定基因.为了克服这个问题,尝试了重组腺相关病毒载体介导的双基因对动脉硬化的治疗研究.实验大鼠分为动脉硬化模型鼠和正常饮食组(即正常对照组),动脉硬化组大鼠被随机分为3组,分别进行AAV-apoAⅠ/SR-BⅠ,AAV-apoAⅠ,与AAV-GFP尾静脉注射,同时正常饮食组尾静脉注射PBS作为对照.其中目的基因mRNA检测采用RT-PCR方法,蛋白质表达的检测采用Western blotting和ELISA.由饮食诱导的动脉硬化和高胆固醇的大鼠模型在尾静脉注射后8周进行冰冻切片的荧光检测.重组AAV载体显示出较强的表达活性.尾静脉注射治疗8周后,AAV-apoAⅠ/SR-BⅠ与AAV-apoAⅠ治疗组血浆总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇浓度与AAV-GFP治疗组相比有了明显下降(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇浓度各组之间没有明显差异,彩色多普勒超声检测发现,AAV-apoAⅠ/SR-BⅠ与AAV-apoAⅠ治疗组的腹主动脉的内中膜厚度相对于AAV-GFP治疗组有了明显下降(P<0.05),血清hs-CRP和SOD的水平有了明显上升(P<0.01),血清MDA的水平有了明显的下降(P<0.01).同时也检测了动脉硬化相关基因mRNA水平的表达.结果显示,rAAV-hapoAⅠ-IRES-hSR-BⅠ治疗后可能是通过抑制NF-κB的活性发挥抗炎作用减少炎症因子的释放,增加动脉硬化板块的稳定性以及降低血浆胆固醇含量的.总之,利用2型腺相关病毒载体介导的基因转移过度表达人载脂蛋白AⅠ和SR-BⅠ可能对饮食诱发大鼠高胆固醇血症和动脉硬化的产生有利影响.这些结果可能为动脉粥样硬化基因治疗提供了一种新的研究思路.
- 栗炳南李志艳张娟刘珍清谭孟群
- 关键词:载脂蛋白AB族I型清道夫受体胆固醇逆向转运
- 基质细胞条件培养液中TGF-β对体外扩增巨核系细胞的影响
- <正> 骨髓基质细胞是造血微环境的重要组成部分,分泌多种正性和负性造血因子,对造血细胞的发生、发育、成熟、凋亡产生直接或间接调节作用。本实验从骨髓中分离、纯化两种骨髓基质细胞(bone marrow-derived st...
- 黄艳红谭孟群王绮如
- 文献传递
- siRNA阻断猪内皮细胞组织因子表达对异种移植中抗凝作用影响的研究被引量:1
- 2011年
- 目的探讨在异种移植中,siRNA阻断猪内皮细胞组织因子表达后对细胞抗凝作用的影响。方法 siRNA转染猪内皮细胞后,real-time PCR及流式细胞仪分别检测组织因子的基因及蛋白表达水平;并将转染与未转染siRNA的内皮细胞分别与人血液共孵育60 min,检测凝血块生成及血液中血细胞数量。结果 re-al-time PCR及流式细胞仪检测siRNA转染后,猪内皮细胞组织因子的基因及蛋白表达水平明显降低,与人血液共同孵育60 min后,siRNA转染组和未转染组的凝血块生成和血液中血细胞计数没有明显的差异。结论在异种移植中,猪内皮细胞组织因子表达的降低没有明显的增强内皮细胞抗凝作用。
- 暨明易受南谭孟群
- 关键词:抗凝作用异种器官移植