邢秀梅 作品数:23 被引量:13 H指数:2 供职机构: 深圳市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 湖南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 环境科学与工程 更多>>
高剂量三氯乙烯对L-02肝细胞中Rho GDIα表达的影响 被引量:1 2008年 背景与目的:观察高剂量三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)对L-02肝细胞中Rho GDIα基因在mRNA及蛋白水平表达的影响。材料与方法:以β-actin为内参,采用蛋白印迹(western blot)和实时荧光定量RT-PCR技术对分别40μmol/L TCE(实验组)和DMSO(溶剂对照组)处理的正常L-02肝细胞中的Rho GDIα蛋白和mRNA水平进行检测。结果:高剂量TCE处理后Rho GDIαmRNA表达量显著下降而蛋白含量明显升高。结论:Rho GDIα基因表达在高剂量TCE处理后发生了特异性改变,为揭示TCE对机体的损伤作用机制提供了重要线索。 邢秀梅 张坚松 刘建军 席仁荣 黄海燕关键词:三氯乙烯 RHO BLOT 实时定量RT-PCR 低剂量三氯乙烯诱导下谷胱甘肽转移酶Ω-1的表达变化 2010年 目的分析低剂量三氯乙烯(TCE)诱导的细胞兴奋效应时,谷胱甘肽转移酶Ω-1(GSTO-1)的表达变化。方法利用前期的双向电泳和质谱结果,参照前期兴奋效应的剂量设计,提取染毒细胞的mRNA和总蛋白,进一步使用实时定量RT-PCR和Western blotting分别从mRNA和蛋白水平上验证GSTO-1的表达变化。结果 Western blotting分析发现,0.1mmol/LTCE剂量组能诱导GSTO-1蛋白表达是对照组的2倍,但随着剂量的增加,蛋白表达改变不明显(与对照组相比,P<0.05)。RT-PCR结果提示:低剂量TCE能诱导GSTO-1基因表达增加,随着剂量的增加,表达反而有所减少。结论低剂量TCE能诱导GSTO-1基因及蛋白表达增加。 黄海燕 庄志雄 刘建军 席仁荣 邢秀梅关键词:三氯乙烯 三氯乙烯致L-02肝细胞损伤血清蛋白质组分析及对Rho GDIα表达的影响 目的:①筛选三氯乙烯(TCE)致L-02肝细胞损伤相关蛋白。②研究TCE对肝细胞蛋白Rho GDIα表达的影响。方法:①收集TCE接触者血清(正常对照)、TCE中毒病人急性期和恢复期血清(均伴随严重肝损伤)。以40μmo... 邢秀梅关键词:三氯乙烯 L-02肝细胞 文献传递 三氯乙烯对L-02肝细胞Rho GDI α、ANXA3及GLO1表达的影响 目的:本文对我们前期利用比较蛋白质组学筛选出的差异蛋白Rho GDIα(Rho GTPases调节蛋白)、ANXA3(细胞凋亡及信号转导相关蛋白)及GLO1(细胞解毒修复系统相关蛋白)在三氯乙烯(trichloroeth... 席仁荣 邢秀梅 黄海燕 刘建军 庄志雄关键词:三氯乙烯 蛋白质印迹 差异蛋白 文献传递 双色红外荧光在蛋白检测中的优势 被引量:1 2008年 目的:通过比较Western blot的两种不同显色方法,了解双色红外荧光检测技术在蛋白检测中的优势。方法:制备L-02肝细胞总蛋白,SDS-PAGE电泳分离后转膜,内参蛋白GADPH,β-actin一抗孵育,二抗用藕联有IRDye700、IRDye800的荧光抗体和辣根过氧化物酶抗体,通过双色红外荧光检测技术和化学发光法检测,比较相同量时,两种方法的灵敏度及特异性差异。结果:双色法显色的图像较化学发光法更清晰直观,且实验背景低。结论:双色红外荧光检测提高了蛋白检测灵敏度,保证实验结果的准确,在蛋白检测方面具有不可比拟的优势。 黄海燕 刘建军 席仁荣 邢秀梅 陈国仁 王艳关键词:化学发光法 WESTERN BLOT 日本血吸虫成虫性别差异蛋白的筛选及鉴定 血吸虫病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病。开展血吸虫的蛋白质组学研究,对深入探讨血吸虫基因的功能,了解血吸虫生长、发育和生殖等的分子机制具有重要意义。 袁仕善 邢秀梅 刘建军 黄琼瑶 杨盛清 彭飞文献传递 血清蛋白质组分析方法筛选并鉴定TCE致L-02肝细胞损伤相关蛋白 本研究采用血清蛋白质组分析方法(SERPA)筛选并鉴定三氯乙烯(TCE)致肝细胞损伤相关特异蛋白,以40μmol/LTCE处理正常L-02肝细胞,撮总蛋白,分别利用TCE接触者血清、TCE中毒患者急性期血清和TCE中素养... 刘建军 邢秀梅 黄海燕 庄志雄 何浩伟关键词:肝细胞损伤 临床毒理学 三氯乙烯 文献传递 血清蛋白质组分析方法筛选并鉴定TCE致L-02肝细胞损伤相关蛋白 目的采用血清蛋白质组分析方法(SERPA)筛选并鉴定三氯乙烯(TCE)致肝细胞损伤相关特异蛋白.方法以40μmol/LTCE处理正常L-02肝细胞,提取总蛋白,分别利用TCE接触者血清、TCE中毒患者急性期血清和TCE中... 邢秀梅 刘建军 黄海燕 何浩伟 庄志雄 徐新云 袁建辉 周丽关键词:毒理学 L-02肝细胞 三氯乙烯 文献传递 降钙素基因相关肽和内皮素-1对支气管上皮细胞与嗜酸性粒细胞黏附功能的影响 被引量:1 2007年 观察肺内调节肽对嗜酸性粒细胞(EOS)与支气管上皮细胞(BEC)粘附功能的影响.选择降钙素基因相关肽(CGRP)和内皮素-1(ET-1)两种调节肽作为研究对象,观察它们对BEC白细胞介素(ILs)分泌及细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响.结果表明:CGRP,ET-1可使O3应激的BEC分泌ILs能力升高,并上调气道上皮ICAM-1的表达.CGRP、ET-1能促进BEC与EOS的粘附,对气道炎症起正性调节作用,加重局部的损伤. 张坚松 王笑梅 李翔 邢秀梅 麻小浩关键词:降钙素基因相关肽 内皮素-1 支气管上皮细胞 嗜酸性粒细胞 三氯乙烯药疹样皮炎差异血清蛋白的筛选及鉴定 2010年 目的 筛选并鉴定三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)暴露者、TCE药疹样皮炎急性期及恢复期差异血清蛋白.方法 收集TCE暴露者血清(Ⅰ组)、TCE药疹样皮炎急性期患者血清(Ⅱ组)和TCE药疹样皮炎恢复期患者血清(Ⅲ组)各5份,各组血清样本等量混合,去除白蛋白、IgG等高丰度蛋白后经除盐处理并定量.采用双向凝胶电泳技术对上述3组混合血清分别进行蛋白分离,银染后扫描成像,用ImageMaster Platinum 2D 5.0软件进行分析,筛选差异蛋白,并应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定.结果 经去除高丰度蛋白和除盐处理后获得了分辨率高、重复性好的双向电泳图谱,处理后血清蛋白检出量增至(300±12)个.经MALDI-TOF-MS鉴定得到5个差异蛋白,分别为:补体4b、载脂蛋白A-Ⅰ、载脂蛋白C-Ⅲ、载脂蛋白C-Ⅱ和转甲状腺素蛋白.补体4bⅢ组相对Ⅰ组表达量为1.352 88,表达上调.Ⅱ组相对Ⅰ组血清中载脂蛋白C-Ⅱ相对表达量为1.512 14,表达上调;载脂蛋白A-Ⅰ、载脂蛋白C-Ⅲ和转甲状腺素蛋白相对表达量分别为-1.601 17、-1.034 49、-1.313 35,表达有所下调.结论 筛选的差异蛋白功能与机体免疫及肝功能异常有关,为阐明TCE致TCE药疹样皮炎作用机制及筛选相关生物标志物提供了重要信息. 刘建军 邢秀梅 黄海燕 袁建辉 徐新云 周丽 杨细飞 方道奎关键词:三氯乙烯 血清 电泳 凝胶 光谱分析