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不同日龄鸡接种ALV-J后的抗原和血清抗体变化: 前言禽白血病是鸡的重要肿瘤性疾病之一,阻碍了世界养禽业的发展。国外一些大型种鸡公司通过检测淘汰的净化方法逐步控制了禽白血病的发生与流行。J亚群禽白血病病毒(ALV-J)自20世纪80年代末发现以来,世界各主要养禽国家均出...; 杭柏林秦爱建尹丽萍孙薇薇梁有志钱琨金文杰邵红霞; 文献传递

鸡源性高迁移率族蛋白B1多克隆抗体的制备及应用被引量：1: 2014年; 目的制备针对鸡的高迁移率族蛋白B1(chHMGB1)特异性抗原亲和层析多克隆抗体,并进行初步应用。方法反转录PCR扩增chHMGB1的全长编码基因,通过序列比对分析筛选一段特异性的多肽序列,偶联载体后作为抗原免疫新西兰兔,采集血清,通过蛋白A柱及多肽偶联的Seprose4B柱得到亲和层析纯化的多克隆抗体;并利用Western blot法、间接免疫荧光染色、免疫组化方法进行鉴定。结果成功制备了抗chHMGB1特异性的多克隆抗体。各项实验结果表明该抗体能特异性的识别重组蛋白以及天然的chHMGB1蛋白。结论成功制备了鸡源性高迁移率族蛋白B1亲和层析多克隆抗体。; 张娜钱琨朱明月高爱俊邵红霞金文杰秦爱建; 关键词：多克隆抗体

抗鸡源EphA2蛋白小鼠多克隆抗体的制备及其特性研究被引量：1: 2020年; 为深入探究鸡源EphA2生物学功能,试验首先对鸡源EphA2基因进行了原核分段克隆以及真核表达载体构建。重组原核表达载体分别命名为pGEX-6p-1-EphA2-A(1-534aa)和pGEX-6p-1-EphA2-B(585-972aa),真核表达载体命名为pcDNA3.1-EphA2。重组原核表达载体转化BL21后经IPTG诱导以及SDS-PAGE分析发现,融合蛋白GST-EphA2-A和GST-EphA2-B均获得有效表达。以纯化的GST-EphA2-A和GST-EphA2-B蛋白免疫小鼠制备了抗鸡EphA2多克隆抗体。间接免疫荧光试验以及Western blot试验表明,所制备的抗鸡EphA2多克隆抗体不仅能识别转染pcDNA3.1-EphA2的DF-1及LMH细胞中表达的外源性EphA2,而且还能有效识别内源性鸡源EphA2蛋白。本研究中鸡EphA2的成功表达及其多克隆抗体研制为后续研究鸡EphA2的功能提供了分子生物学工具。; 姚晓慧李拓凡谢泉万志敏邵红霞邵红霞叶建强; 关键词：真核表达多克隆抗体

一株高致病性血清4型禽腺病毒的分离与鉴定被引量：25: 2016年; 研究对临床上疑似禽腺病毒感染鸡病例进行了病毒分离与鉴定。通过对病鸡肝组织研磨液接种鸡胚、电镜观察、PCR及序列鉴定,分离出一株血清4型禽腺病毒,命名为JH。动物回归试验证明,肌肉接种1 000 EID_(50)病毒量对3周龄SPF鸡的致死率高达90%;病死鸡剖解可见典型的心包积液与包涵体肝炎,肝组织切片HE染色可见典型的嗜碱性核内包涵体。这一高致病性血清4型禽腺病毒的分离报道,为探究国内禽腺病毒分子流行与毒力演变提供基础材料。; 梁广成高巍谢泉张建军邵红霞秦爱建叶建强

鸡产蛋下降综合症病毒快速纯化及其抗血清制备: 引言鸡产蛋下降综合症(EDS-76)是由禽腺病毒Ⅲ群引起的病毒性传染病,幼龄鸡感染后无临床症状,亦很难查到抗体,开产之后产蛋量下降率及蛋壳破损率极高,己被列为鸡四大病毒性传染病之一.由于医学领域对临床检验中标准化的呼声越...; 孙苹胡序明陈倩叶建强邵红霞钱坤金文杰秦爱建

新城疫病毒F蛋白在昆虫细胞中的表达及其融细胞作用: 本研究用RT-PCR方法扩增出新城疫病毒标准强毒株F48E8的F基因,并将其克隆到pGEM-T载体,命名为pGEM-F.鉴定正确后,以BamHI和XbaI双酶切将F基因从pGEM-F中释放出来,并插入到pFast Bac...; 王桂军秦爱建邵红霞崔平福金文杰; 关键词：新城疫病毒 F48E8 融合蛋白重组杆状病毒昆虫细胞; 文献传递

鸡传染性贫血病毒VP3蛋白的原核表达及其单克隆抗体的研制被引量：1: 2020年; 本研究首先利用同源重组一步克隆法将鸡传染性贫血病病毒(CIAV)的VP3基因克隆到pGEX-6P-1原核表达载体上,经IPTG诱导及SDS-PAGE分析成功获得了重组蛋白rGST-VP3的表达.随即以纯化的重组蛋白rGST-VP3免疫Balb/c小鼠,通过脾细胞与SP2/0细胞融合以及间接免疫荧光(IFA)筛选,获得2株稳定分泌CIAV-VP3抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8;亚型鉴定表明,CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8均为IgG1;效价测定发现,CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8的腹水间接免疫荧光效价分别为1:102400与1:12800;Western blot进一步证实,CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8均能识别重组蛋白rGST-VP3.本研究结果为后期研究VP3蛋白在CIAV致病中作用及其诱导凋亡分子机制奠定了坚实的物质基础.; 史静柯王鹏霍臣智宋昊杨海蓉朱韩钰许文琳袁慧莎叶建强叶建强秦爱建钱琨; 关键词：鸡传染性贫血病毒 VP3蛋白原核表达单克隆抗体

国内活禽市场新型环形病毒AGV2的发现被引量：1: 2015年; 为了解国内鸡群是否存在新型环形病毒AGV2,研究对来自扬州的一个活禽市场的20份鸡羽囊样品进行了AGV2的PCR检测。通过对鸡羽囊DNA提取、PCR扩增以及序列分析,在20份样品中检测到4份阳性样品。测序比对发现,本研究检测到的国内AGV2序列与NCBI中发表的AGV2的同源性为95.7%~99.4%。并对一份阳性样品的PCR产物进行了TA克隆,测定了该PCR的灵敏度为2.7个拷贝数。这一结果不仅首次证明国内活禽市场存在AGV2,而且为进一步开展国内鸡群AGV2的分子流行病学及其致病性等研究奠定良好的基础。; 张雨沈元朝田晓彦谢泉谢泉王雨蒙邵红霞秦爱建邵红霞; 关键词：鸡群 PCR

雁鹅小鹅瘟病毒的分离及其组织嗜性被引量：2: 2016年; 从安徽省某雁鹅养殖场疑似小鹅瘟死亡的雁鹅肝脏中分离获得1株病毒,经过电镜观察、琼脂扩散和PCR试验证实分离病毒株为小鹅瘟病毒(gosling plague virus,GPV),命名为Yan-2株。全基因组扩增与测序分析表明Yan-2株基因组为5 106bp;与省内番鸭源GPV Y株和大雁源GPV SHFX1201株的亲源关系最近,与国内疫苗株SYG61v以及国外B株的亲源关系较远。单抗免疫组化试验还发现,Yan-2株病毒主要分布于雁鹅的肝细胞、肠上皮细胞、神经细胞等细胞胞浆内。这些结果不仅表明雁鹅可以作为GPV的自然宿主,而且证明雁鹅的肝、肠和神经组织对GPV有明显的亲嗜性,为进一步研究GPV的宿主范围、致病机理打下了基础。; 汪凯王传均王浩邵红霞潘玲祁克宗秦爱建刘红梅王桂军; 关键词：雁鹅小鹅瘟病毒组织嗜性

抗J亚群禽白血病病毒的鸡胚成纤维细胞系建立: 将J亚群禽白血病病毒囊膜基因(ALV-J env)插入pcDNA3.1真核表达载体,构建成转移载体pcDNA-env,并转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,通过Zeocin药物筛选获得转染阳性细胞。细胞经传30代后,冻存。13...; 叶建强秦爱建邵红霞刘红梅金文杰刘岳龙; 关键词：J亚群禽白血病病毒 ENV基因细胞系抗病毒感染

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邵红霞