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4种有囊膜RNA病毒形态发生的比较观察被引量：1: 2008年; 目的从形态结构及形态发生角度准确区分和确认流感病毒、犬冠状病毒、狂犬病毒和新城疫病毒。方法将感染4种RNA病毒的体外培养细胞用戊二醛、锇酸固定,制成超薄切片,透射电镜观察。结果4种病毒子代病毒的核衣壳或完整病毒粒子的装配都在胞浆中进行,子代病毒装配的前体物质的形态结构不同。4种病毒子代病毒的完整病毒粒子装配的形式不同,其中流感病毒和新城疫病毒只在细胞膜以向胞外出芽的方式装配成完整病毒粒子;狂犬病毒在细胞浆膜相结构和细胞膜表面以出芽方式装配成完整病毒粒子;冠状病毒在细胞浆膜相结构以出芽方式装配成完整病毒粒子。流感病毒子代病毒装配完即离开细胞膜;新城疫病毒的子代病毒不易离开细胞膜。多数狂犬病毒和冠状病毒的子代病毒要待细胞破碎后才能释放到细胞外。结论利用病毒培养物的超薄切片进行电镜观察,可根据其形态发生准确区分4种RNA病毒。; 孟轲音邹啸环杨松涛高玉伟韩小虎宋战均梅妹夏咸柱; 关键词：透射电子显微镜 RNA病毒

蟾酥不同溶剂萃取物对小鼠免疫细胞功能的影响被引量：21: 2008年; 目的对蟾酥不同溶剂萃取物进行初步免疫活性筛选。方法用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖反应和腹腔巨噬细胞(M)能量代谢水平,中性红吞噬法测定腹腔M的吞噬功能,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群和S期细胞的百分率。结果蟾酥各萃取层中的水层(VB2)、乙酸乙酯层(VB4)及总水提蛋白层(VB6)分别在1.25～30、10～20和10～40mg.L-1浓度范围内增强刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应;其他3组(VB1,VB3和VB5)蟾酥提取物单独作用或与ConA联合作用对小鼠脾淋巴细胞增殖反应无明显影响;VB2,VB4和VB6在1.25～40mg.L-1浓度范围内可增强ConA诱导的小鼠腹腔M能量代谢水平和吞噬中性红的能力。在10mg.L-1时,VB2,VB4和VB6可协同ConA增加脾淋巴细胞中S期细胞百分率,并降低CD4+CD8-和CD4-CD8+、增加CD4+CD8+T淋巴细胞亚群百分率。结论蟾酥不同溶剂萃取物VB2,VB4和VB6体外可协同ConA促进脾淋巴细胞和腹腔M的免疫功能,其机制可能与协同ConA促进DNA合成并活化CD4+CD8-T细胞表达CD8a抗原、增加兼具辅助和细胞毒作用的CD4+CD8+T淋巴细胞亚群的数量有关。; 姜峰邓旭明韩小虎王大成赵文杰宋宇张金子; 关键词：免疫活性淋巴细胞细胞周期

麝鼠香囊腺形态学观察及腺上皮体外培养初报被引量：6: 2006年; 取泌香期成年麝鼠香囊腺或对非泌香期麝鼠进行人工诱导香腺发育后取材,在形态学观察的基础上,分离香囊腺上皮细胞并进行体外初步培养。结果显示,用1mg/mlⅣ型胶原酶和0.25mg/ml胰蛋白酶分次于37℃下消化组织块5h和15min,可得到大量的分散单细胞用于原代培养;用含10%胎牛血清和双抗的DME/F12培养液为基础液,在培养液中添加10ng/ml表皮生长因子(EGF),对麝鼠香囊腺上皮细胞的存活和生长具有较明显的促进作用;腺上皮细胞可进行传代培养,也可用常规方法进行冷冻保存和复苏;体外传代培养到第5代的上皮细胞仍增殖旺盛,细胞内有丰富的脂滴,细胞分泌活动旺盛。提示,通过体外分离培养麝鼠香囊腺上皮细胞,建立香囊腺干(前体)细胞系,进而用细胞工程方法大量生产人工麝鼠香是可能的。; 姜峰张学明韩小虎韩春田岳占碰邓旭明; 关键词：体外培养麝鼠

狂犬病毒的形态及形态发生学研究: 为研究狂犬病毒形态和形态发生情况，以口服弱毒疫苗株SRV9毒株为原始材料，经鼠脑复壮后接种BHK-21细胞，分别观察感染后不同时间病毒在BHK-21细胞上的形态发生情况、纯化后病毒粒子的形态和鼠脑复壮前后病毒粒子形态的差...; 韩小虎邹啸环江禹李茂王莉莉涂长春; 关键词：狂犬病毒电子显微镜弱毒疫苗; 文献传递

狂犬病毒鼠脑复壮后的典型形态恢复及感染细胞内的形态发生学被引量：2: 2008年; 【目的】观察比较鼠脑复壮前后狂犬病毒的形态变化，并观察病毒感染BHK．21细胞后不同时间的形态发生情况。【方法】以保存时间较长的SRV9毒株为原始材料，经乳鼠脑传代复壮后接种BHK．21细胞，浓缩、纯化后观察。【结果】（1）未经复壮的病毒中DI粒子占较高比例，典型粒子只占少数，而复壮后典型粒子所占比例升高到病毒粒子总数的90％。（2）感染24h后在细胞浆内可以观察到典型病毒粒子，其数量随着培养时间的延长而增加。带毒传代之后的培养过程中细胞内病毒数量增加不明显。（3）病毒可以在细胞内的空泡膜表面以多种方式成堆出芽。【结论】（1）鼠脑复壮可恢复狂犬病毒中典型粒子所占比例。（2）带毒传代1-2次时为狂犬病毒收获的最佳时机。（3）本研究为狂犬病毒的装配机制补充了数据。; 韩小虎邹啸环江禹宣华涂长春; 关键词：狂犬病毒复壮

麝鼠香囊腺形态学观察及腺上皮体外初步培养: 取泌香期成年麝鼠香囊腺或对非泌香期麝鼠进行人工诱导香腺发育后取材,在形态学观察的基础上,分离香囊腺上皮细胞并进行体外初步培养.结果显示,用1 mgmLⅣ型胶原酶和0.25 mg/mL胰蛋白酶分次于37℃下消化组织块5 h...; 姜峰张学明韩小虎岳占碰邓旭明; 关键词：体外培养麝鼠

动物狂犬病病毒巢式RT-PCR检测方法的建立被引量：11: 2009年; 以GenBank收录的多基因型狂犬病病毒(RV)N基因序列为参考,设计了简并的PCR引物,建立了能够有效扩增7种基因型RV基因组片段的巢式RT-PCR(nested RT-PCR)方法,命名为RVN371。该方法能够检测到4.6个TCID50的SRV9固定毒,对犬、猪、蝙蝠及牛的狂犬病阳性脑组织样品均表现出良好的特感性:扩增产物目的带位置正确,未见非特异性扩增条带。对比试验表明,RVN371对街毒脑组织样品检测的灵敏度较乳鼠脑内接种试验(MIT)高出100倍;在对3种鼠脑固定毒、12种犬脑街毒样品的检测中,与RV检测的金标方法——免疫荧光试验(FAT)完全符合。RVN371为动物狂犬病的实验室诊断和流行病学研究提供了有利的工具。; 江禹王莉莉韩小虎邵明富范金红刘芳涂长春; 关键词：狂犬病病毒巢式RT-PCR

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韩小虎