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采用MeDIP-seq检测二氧化硅诱导的肺成纤维细胞转分化前后的特异甲基化改变: [目的]采用MeDIP-seq的方法检测二氧化硅诱导的肺成纤维细胞转分化前后的特异甲基化改变,探讨表观遗传学变化在肺成纤维细胞转分化过程中的机制。[材料和方法]使用组织块法取SD大鼠肺成纤维细胞进行原代培养至6-8代,肺...; 侯建永陈慧婷李娟刘素娜张红义王迪姚武郝长付; 关键词：二氧化硅肺成纤维细胞转分化

树突状细胞在实验性矽肺发生发展中的作用初探: 目的:初步探讨树突状细胞在矽肺发生发展过程中作用。方法:体外细胞因子诱导培养外周血来源的树突状细胞。用不同浓度的SiO2对树突状细胞进行染毒处理24h后,MTT法检测SiO2对树突状细胞活性的影响;应用扫描电镜和投射电镜...; 姚武郝长付刘素娜暴磊张红义侯建永

煤工尘肺患者血清中血管内皮生长因子抗体的表达被引量：3: 2014年; 目的检测煤工尘肺患者及接尘工人血清中血管内皮生长因子抗体（VEGF-Ab）的表达水平,探讨其在尘肺病发病过程中的意义。方法将对象分为4组：以230例煤工尘肺观察对象（已出现尘肺病变但尚未达到壹期尘肺）为观察对象组,以328例煤工尘肺患者为煤工尘肺组,以309例正在接尘的工人为接尘组（尚未出现尘肺病变）,以393例医院健康体检人员为对照组,对所有研究对象进行问卷调查,并采集外周静脉血,分离收集血清,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清中VEGF-Ab的表达水平。结果煤工尘肺组和接尘组血清中VEGF-Ab表达水平均高于健康对照组和观察对象组（P〈0.05）。随着尘肺病期别的增高,煤工尘肺组患者血清中VEGF-Ab的表达水平虽有增加的趋势,但差异无统计学意义（P〉0.05）。观察对象组中20~岁组和40~岁组VEGF-Ab表达水平均高于60~岁组（P〈0.05）;煤工尘肺组和健康对照组中20~岁组和40~岁组VEGF-Ab表达水平均低于60~岁组（P〈0.05）。煤工尘肺组中采煤组血清VEGF-Ab高于辅助工种组（P〈0.05）,接尘组中掘进组血清VEGF-Ab高于采煤组（P〈0.05）。观察对象组和煤工尘肺组的壹期尘肺组中,工龄〈25年的患者血清中VEGF-Ab表达低于工龄≥25年者（P〈0.05）。结论血清中VEGF-Ab的表达水平可能与煤工尘肺的发生发展过程相关,随着年龄的增大、接尘工龄的增加VEGF-Ab的表达水平升高。; 程远博刘素娜暴磊张红义侯建永郝长付姚武; 关键词：血管内皮生长因子抗体煤工尘肺接尘工人

实验性矽肺大鼠肺组织中Th1/Th2型细胞因子动态变化及意义: ：检测Th1/Th2型细胞因子在实验性矽肺大鼠肺组织中的动态表达水平. 方法：将SD大鼠随机分为染尘组、对照组,采用非气管暴露法建立大鼠矽肺模型,分别在染尘后不同时间点各处死6只,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)...; 暴磊刘素娜李娟王娟张红义侯建永郝长付姚武; 关键词：实验性矽肺肺组织 TH1型细胞因子 TH2型细胞因子

煤工尘肺患者血清中颗粒酶B抗体的表达及其意义: 2014年; 目的:检测煤工尘肺患者及接尘工人血清中颗粒酶B(Granzyme B,Gzm B)抗体的表达水平,探讨其在煤工尘肺发病过程中的意义。方法:采用ELISA法检测观察对象组、接尘组、病例组和健康对照组血清中Gzm B抗体的表达水平。结果:煤工尘肺患者血清中Gzm B抗体的表达量的OD值为(1.478±0.450),高于接尘组和对照组表达量的OD值(1.325±0.463)、(1.377±0.430),差异均有统计学意义(P<0.05)。壹期尘肺且工龄<25 a患者Gzm B抗体表达量OD值为(1.418±0.457),工龄>25患者Gzm B抗体表达量OD值为(1.534±0.443),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:煤工尘肺患者血清中Gzm B抗体表达水平增高且与接尘工龄正相关,提示血清中Gzm B抗体可能与煤工尘肺的发生发展及严重程度密切相关。; 裴阳晴刘素娜暴磊张红义侯建永郝长付姚武; 关键词：煤工尘肺接尘工人

实验性矽肺大鼠肺组织中Th1/Th2型细胞因子动态变化被引量：7: 2016年; 目的检测Th1/Th2型细胞因子在实验性矽肺大鼠肺组织中的动态表达水平。方法将SPF级成年雄性SD大鼠随机分为染尘组和对照组,每组42只。模型组采用非气管暴露法一次性注入1 m L二氧化硅悬液（100 mg/m L）建立大鼠矽肺模型,对照组气管内注入等量灭菌生理盐水。分别在染尘第1天、1周、2周、3周、6周、9周和12周各处死6只大鼠,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测大鼠肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）、白介素18（IL-18）、白介素4（IL-4）、白细胞介素10（IL-10）及IFN-γ/IL-4的表达水平。结果染尘组TNF-α表达量均高于对照组（P〈0.05）;染尘组IFN-γ在染尘第1天-2周表达量高于对照组（P〈0.05）;染尘组IL-18表达量均高于对照组,差异无统计学意义;染尘组IL-4在染尘第1周表达量低于对照组（P〈0.05）,第9周及12周高于对照组（P〈0.05）;染尘组IL-10在染尘第6-9周表达量高于对照组（P〈0.05）;染尘组Th1/Th2比值随染尘时间增长而降低,染尘组Th1/Th2在染尘第1天-2周比值高于对照组（P〈0.05）。结论在矽肺的发生发展过程中细胞因子发生变化：Th1型细胞因子持续高表达,Th2型细胞因子表达量先降低后升高。; 暴磊刘素娜李娟王娟张红义侯建永郝长付姚武; 关键词：矽肺细胞因子

采用MeDIP-seq检测二氧化硅诱导的肺成纤维细胞转分化前后的特异甲基化改变: 【目的】采用MeDIP-seq的方法检测二氧化硅诱导的肺成纤维细胞转分化前后的特异甲基化改变,探讨表观遗传学变化在肺成纤维细胞转分化过程中的机制。【材料和方法】使用组织块法取SD大鼠肺成纤维细胞进行原代培养至6-8代,肺...; 侯建永陈慧婷李娟刘素娜张红义王迪姚武郝长付; 关键词：二氧化硅肺成纤维细胞转分化; 文献传递

游离二氧化硅所致肺成纤维细胞转分化过程中DNA甲基化差异基因的MeDIP-seq检测被引量：3: 2017年; 目的:检测游离二氧化硅所致肺成纤维细胞转分化过程中可能存在的DNA甲基化差异基因并探讨其可能作用机制。方法:原代培养肺成纤维细胞和肺泡巨噬细胞,建立共培养的矽肺体外模型,采用甲基化DNA免疫共沉淀测序技术检测分析不同染毒时间(0、24、48 h)的肺成纤维细胞之间的DNA甲基化差异基因,并采用DAVID工具对检测到的甲基化差异基因进行KEGG的通路富集分析。结果:共发现8 791个基因的DNA甲基化程度在3个染毒时间组中均存在差异,DAVID工具分析发现这些差异主要集中在代谢、环境信息过程、细胞过程、生物体系统、人类疾病相关通路等通路中。结论:矽肺形成过程中存在大量DNA甲基化程度发生改变的基因,且这些基因涉及多个通路。; 侯建永姚武郝长付; 关键词：矽肺 DNA甲基化

大鼠矽肺噬菌体单链抗体库构建被引量：4: 2016年; 目的利用噬菌体展示技术构建大鼠矽肺噬菌体单链抗体（Sc Fv）库,为后续筛选矽肺特异性Sc Fv奠定基础。方法无特定病原体级雄性SD大鼠24只,予质量浓度为100 g/L的二氧化硅混悬液1.0 m L经支气管一次性灌注染尘,构建矽肺模型。于造模后第3、6、9和12周分别取6只大鼠周围血淋巴细胞混匀,以Trizol法提取总RNA,逆转录合成cDNA;利用简并引物进行聚合酶链式反应（PCR）,扩增抗体重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）的基因,用T4 DNA连接酶连接获得ScFv基因片段,将其与噬菌粒PCANTAB-5e重组,采用氯化钙转化法转化至感受态大肠埃希氏菌（E.coli）TG1中,经M13K07辅助噬菌体超感染,构建矽肺模型大鼠噬菌体ScFv库;随机挑取10个菌落进行质粒双酶切鉴定。结果矽肺模型大鼠周围血总RNA琼脂糖凝胶电泳可见2条明显28S和18S条带,总RNA完整性较好;VH基因片段大小约为400 bp,VL基因片段大小约为350 bp,重组后Sc Fv基因片段长度约为750 bp;M13K07辅助噬菌体扩增后铺双层琼脂平板,见小米粒大小、透亮的噬菌斑,噬菌体滴度为1.35×10^16pfu/L;以重组噬菌粒转化感受态E.coli TG1后铺氨苄青霉素抗性固体平板,计算菌落数为8.0×10^9cfu/L;阳性克隆质粒PCR和双酶切产物经琼脂糖凝胶电泳显示阳性插入率为90.0%,所建Sc Fv库库容为7.2×10^9cfu/L。结论成功构建矽肺模型大鼠噬菌体Sc Fv库,其库容量及多样性可为后续筛选提供保障。; 张红义郝长付刘素娜李娟暴磊侯建永王迪陈慧婷姚武; 关键词：矽肺噬菌体抗体库单链抗体基因重组

MeDIP-seq检测游离SiO2所致肺成纤维细胞转分化的DNA甲基化: 目的:　　尘肺病是我国职业病中占比例最多的疾病，一直以来影响着发病者的生活质量和社会的经济发展，而游离 SiO2粉尘致肺纤维化作用最强，矽肺也是尘肺中进展最快、死亡率最高的一种之一。长期以来，人们对矽肺进行了大量研究，但...; 侯建永; 关键词：尘肺病细胞转分化 DNA甲基化

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侯建永

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