刘冰
- 作品数：9 被引量：24H指数：3
- 供职机构：广东药学院药科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 辛伐他汀对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡及caspase-9、caspase-3活性的影响被引量：5
- 2013年
- 目的:观察辛伐他汀对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞凋亡的影响并探讨其机制。方法:辛伐他汀10,20,30μmol/L作用于NSCLC的A549细胞48,72h后,Hoechst 33 258荧光染色法观察细胞形态学改变,流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,分光光度法检测caspase-3、caspase-9活性。结果:不同浓度辛伐他汀作用于A549细胞48,72h后,细胞出现典型的凋亡表现,凋亡率明显增高,呈浓度依赖性,且辛伐他汀10,20μmol/L作用72h后,诱导细胞凋亡的作用更显著。同时,辛伐他汀呈浓度依赖性地增强caspase-3、caspase-9活性;其增强caspase-9活性的作用在72h更显著。结论:辛伐他汀能诱导A549细胞凋亡,该作用与其上调caspase-9、caspase-3活性有关。
- 刘冰阳洁
- 关键词：辛伐他汀非小细胞肺癌细胞凋亡CASPASE-9CASPASE-3
- A549细胞中NOX4介导IL-6自分泌及细胞侵袭的研究被引量：3
- 2015年
- 目的观察在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞A549中NADPH氧化酶4(NOX4)对炎症因子IL-6表达的影响,并研究NOX4、IL-6对A549细胞侵袭过程的作用。方法通过质粒p CMV-NOX4转染细胞,制备NOX4稳定过表达的A549细胞株,采用RT-PCR及Western blotting法对NOX4的表达进行检测;采用ELISA法检测IL-6的分泌水平;采用侵袭小室法检测A549细胞的侵袭能力;采用Western blotting法检测磷酸化Akt表达水平。结果与对照组相比,经质粒p CMV-NOX4转染后,A549细胞中NOX4的mRNA表达和蛋白表达水平均显著升高;NOX4过表达的A549细胞中IL-6表达量增高;NOX4过表达可促进A549细胞的侵袭能力及上调细胞中Akt活性,当采用P6或Siltuximab阻断IL-6/JAK2/STAT3信号时,上述效应被部分逆转。结论 A549细胞中,NOX4过表达能提高IL-6的自分泌水平,IL-6/JAK/STAT3信号参与介导NOX4促进A549细胞侵袭的效应。阻断这两个信号通路可能是针对NSCLC侵袭转移的一个潜在治疗手段。
- 李娟曾诚刘冰李明亚
- 关键词：NOX4IL-6A549细胞非小细胞肺癌
- 辛伐他汀对非小细胞肺癌细胞增殖和免疫逃逸的影响被引量：3
- 2013年
- 目的观察辛伐他汀对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和免疫逃逸的影响,并探讨其机制。方法用改进MTT法检测不同浓度辛伐他汀、RhoA siRNA处理后A549细胞的增殖情况;用Real-time RTPCR检测抗免疫逃逸相关因子即主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ,又称HLA-A)和肽转运蛋白(TAP1)的基因表达;用RhoA活性测定法观察RhoA活性变化;用Lipofectamine 2000转染siRNA。结果辛伐他汀能浓度依赖性(10～30μmol/L)地抑制A549细胞增殖,增强HLA-A和TAP1基因表达,抑制RhoA活性(P<0.05或<0.01)。用0.1μmol/L RhoA siRNA抑制RhoA活性后,也能显著抑制A549细胞增殖,增加HLA-A和TAP1基因表达(P<0.01)。但RhoA siRNA联合应用辛伐他汀不能产生协同效应,而与单用RhoA siRNA的作用相似(P>0.05)。结论辛伐他汀主要依赖于抑制A549细胞的RhoA活性,从而增加HLA-A和TAP1表达,减少免疫逃逸和细胞增殖。
- 刘冰阳洁
- 关键词：辛伐他汀非小细胞肺癌细胞增殖免疫逃逸RHOA
- KRAS突变对非小细胞肺癌增殖的影响及其机制被引量：2
- 2016年
- 目的观察在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中KRAS突变对炎症因子IL-6和NADPH氧化酶4(NOX4)表达的影响,并研究由KRAS突变引起的IL-6分泌和NOX4的表达对NSCLC细胞增殖能力的影响。方法分别通过质粒p Babe puro-KRAS^(G12V)和siRNA转染细胞,制备KRAS^(G12V)过表达的Calu3细胞株和KRAS^(G12V)干扰的H411细胞株,采用Western blotting法对NOX4的表达进行检测;采用ELISA法检测IL-6的分泌水平;采用MTT法检测Calu3细胞的增殖能力。结果与对照组相比,经质粒p Babe puro KRAS^(G12V)转染后,Calu3细胞中NOX4的蛋白表达水平和IL-6的分泌水平均显著升高;经siRNA转染干扰KRAS^(G12V)后,H411细胞中NOX4表达和IL-6的分泌量均显著降低;在KRAS^(G12V)过表达的基础上,在Calu3细胞中加入IL-6的中和抗体Siltuximab可降低NOX4的表达,而干扰NOX4后可减少IL-6的分泌;在过表达KRAS^(G12V)的Calu3细胞中,分别干扰NOX4的表达或加入Siltuximab,均可显著抑制细胞的增殖能力。结论在NSCLC细胞中,KRAS的突变能引起IL-6的分泌和NOX4的表达,并通过IL-6和NOX4的相互激活共同促进癌细胞的恶性增殖。
- 曾诚姚贝吴启鹏刘冰
- 关键词：KRASNOX4IL-6NSCLC细胞增殖
- 阿托伐他汀通过抑制RhoA活性减少非小细胞肺癌的增殖被引量：2
- 2013年
- 目的观察阿托伐他汀(ATV)对非小细胞肺癌(NSCLCs)细胞增殖的影响并探讨其机制。方法用改进MTT法检测不同浓度ATV、RhoA特异性抑制剂C3转移酶(C3 transferase)、RhoA siRNA处理后A549细胞、H358细胞、Calu3细胞的增殖情况。用RhoA活性测定法观察C3 transferase及不同浓度、不同时间ATV处理后NSCLCs细胞的RhoA活性变化。用Lipofectamine2000转染RhoA siRNA,Western blot检测RhoA的蛋白表达。结果 ATV浓度依赖性(0.1～25.0μmol/L)地抑制三株NSCLCs细胞增殖(P<0.05或P<0.01)。ATV浓度依赖性(0.1～25.0μmol/L)和时间依赖性(12～96 h、48～96 h)地抑制不同NSCLCs细胞的RhoA活性(P<0.05或P<0.01)。C3 transferase能显著降低三株NSCLCs细胞的RhoA活性并抑制NSCLCs细胞增殖(P<0.01)。RhoA siRNA在有效沉默RhoA蛋白表达后,也明显抑制NSCLCs细胞增殖(P<0.01)。但ATV联合应用C3 transferase或RhoA siR-NA不能产生协同抑制效应,而与单用C3 transferase或RhoA siRNA的抑制增殖作用相似(P>0.05)。结论 ATV主要通过抑制RhoA活性从而抑制NSCLCs细胞增殖。
- 刘冰阳洁
- 关键词：阿托伐他汀非小细胞肺癌细胞增殖RHOA
- 肿瘤源性S100A9对食管鳞癌细胞顺铂耐药性的影响被引量：3
- 2015年
- 目的研究S100A9是否参与食管鳞癌细胞顺铂耐药过程。方法建立食管鳞癌及其耐药株(KYSE140细胞)。分为Control vector组、vector+cisplatin、S100A9 vector组、S100A9 vector+cisplatin组。Control vector组为细胞转染空白质粒对照,vector+cisplatin组为细胞转染空白质粒对照并加入顺铂处理,S100A9 vector组为细胞转染S100A9质粒,S100A9 vector+cisplatin组为细胞转染S100A9质粒并加入顺铂处理。MTT观察顺铂的细胞毒性。Western blot检测蛋白表达。结果 Western blot结果显示,与单纯的食管鳞癌细胞株相比,S100A9在食管鳞癌耐药细胞中的表达显著增加。MTT结果显示,与顺铂治疗组相比,过表达S100A9可显著降低顺铂的细胞毒性作用(P<0.01);与过表达S100A9组相比,沉默经典的S100A9受体-RAGE受体对过表达S100A9所引起的顺铂细胞毒性降低的效应没有作用(P>0.05)。Western blot结果显示KYSE140细胞中主要表达的NOX亚型是NOX5,此外还有NOX2表达。MTT结果显示,与过表达S100A9的KYSE140细胞相比,NOX抑制剂DPI可显著逆转过表达S100A9所引起的顺铂细胞毒性降低效应(P<0.01)。结论 S100A9可能通过激活NOX通路,介导食管鳞癌细胞顺铂耐药机制。
- 陈晓兰丁颖秦鑫田南南兰天刘冰王希成
- 关键词：食管鳞癌S100A9耐药顺铂
- 芦荟凝胶壳聚糖三元膜对大鼠深Ⅱ度烧伤的治疗作用被引量：3
- 2016年
- 目的制备芦荟凝胶的胶原-壳聚糖-硫酸软骨素三元膜,研究其在大鼠皮肤深Ⅱ度烧伤创面愈合过程中的作用。方法制备芦荟凝胶的胶原-壳聚糖-硫酸软骨素三元膜。取大鼠60只,随机分为模型对照组、湿润烧伤膏组、三元膜组,每组20只。造成深Ⅱ度烧伤模型后,测量大鼠烧伤后皮肤创面平均愈合时间及第1、3、7、14天创面愈合率,检测烧伤后第1、14天皮肤创面组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量、血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)含量并作统计学分析。结果与模型对照组相比,三元膜组能缩短烧伤大鼠皮肤创面愈合的时间(P<0.05),提高第3、7、14天的创面愈合率(P<0.01)。烧伤后第14天,与模型对照组相比,三元膜组皮肤创面组织中SOD含量升高(P<0.01),MDA含量降低(P<0.01),血清中TNF-α含量降低(P<0.01)。以上指标,三元膜组和烧伤膏组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论芦荟凝胶的胶原-壳聚糖-硫酸软骨素三元膜可通过清除氧自由基、减少促炎症因子的生成,从而促进大鼠皮肤深Ⅱ度烧伤的愈合。
- 黄庆芳刘冰冯承恩
- 关键词：氧自由基促炎症因子
- 短链酰基辅酶A脱氢酶在心肌细胞凋亡中的作用被引量：4
- 2015年
- 目的:研究短链酰基辅酶A脱氢酶(short-chain acyl-Co A dehydrogenase,SCAD)在心肌细胞凋亡中的变化,探讨其与心肌细胞凋亡之间的关系。方法:以叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide,t BHP)刺激心肌细胞建立凋亡模型。检测细胞存活率、SCAD mRNA和蛋白表达、SCAD活性以及游离脂肪酸含量变化;并采用SCAD的最优干扰序列siRNA-1186进行干扰,观察其对心肌细胞凋亡的影响。结果:与对照组相比,在t BHP诱导的心肌细胞凋亡模型中,SCAD的mRNA和蛋白表达均显著下调。与阴性对照序列组相比,siRNA-1186干扰后心肌细胞的SCAD表达和活性明显下降,心肌细胞游离脂肪酸含量明显增加,同时,心肌细胞出现了明显凋亡,与t BHP诱导的心肌细胞凋亡趋势一致。结论:SCAD表达失调可能参与心肌细胞凋亡的过程,上调SCAD可能成为干预心肌细胞凋亡的重要环节之一。
- 曾振华黄秋菊黄金贤舒朝辉刘培庆陈少锐刘冰周四桂
- 关键词：心肌细胞细胞凋亡能量代谢叔丁基过氧化氢
- NOX4介导缺氧诱导A549细胞侵袭的机制研究
- 2017年
- 目的:探讨NADPH氧化酶4(NOX4)对缺氧诱导A549细胞侵袭的影响及其可能的作用机制。方法:将A549细胞分为常氧组和缺氧组,采用RT-PCR检测细胞中HIF-1αmRNA的表达水平;过氧化氢检测试剂盒检测细胞中活性氧簇(ROS)水平;Transwell法检测A549细胞的侵袭情况;Western blotting法检测A549细胞中NOX4、Akt、磷酸化的Akt(p-Akt)蛋白的表达情况。结果:与常氧组相比,缺氧组A549细胞中HIF-1αmRNA表达水平明显增高(P<0.01),且细胞的侵袭能力显著增强(P<0.01),且缺氧组中NOX4、p-Akt蛋白表达量较常氧组显著上调(P<0.01),细胞内ROS水平显著增加(P<0.01)。与缺氧组相比,在缺氧组A549细胞中加入NOX4抑制剂GKT137831(25μmol/L)或DPI(10μmol/L)后,可明显逆转缺氧对A549细胞的侵袭促进作用(P<0.05)及逆转Akt的磷酸化(P<0.01);且PI3K/Akt信号抑制剂LY294002(30μmol/L)处理后,A549细胞的侵袭能力显著减弱(P<0.01)。结论:缺氧能够促进NOX4介导的A549细胞侵袭,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。
- 罗燕妹滕翠芳黄国林骆敏覃贵慧刘冰阳洁
- 关键词：NOX4缺氧NSCLC
