刘奕雄
- 作品数：9 被引量：15H指数：2
- 供职机构：深圳市计量质量检测研究院更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目广东省质量技术监督局科技项目“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：理学轻工技术与工程环境科学与工程农业科学更多>>
- 超高效液相色谱-飞行时间质谱法鉴定鹅源性成分特征肽及其应用研究被引量：2
- 2019年
- 本文建立了一种鉴定鹅源性成分的高效液相色谱-串联质谱分析方法。样品经过蛋白质提取、蛋白质的还原和烷基化、胰蛋白酶水解后,利用纳升液相色谱-飞行时间质谱和ProteinPilotTM软件分别进行多肽的检测和鉴定。通过BLAST搜索与Uniprot数据库对比分析,筛选出鹅肉的备选物种特征肽,再用超高效液相色谱-串联质谱的多反应监测(MRM)模式进行定量和验证。各特征肽段定量限为3.5~6.0 fmol,鸭肉中鹅肉成分的线性相关系数大于0.99,定量限为5%。
- 李碧芳王韦达刘奕雄李意程诚陈序杜业刚
- 关键词：蛋白质组学鹅肉质谱
- 超高效液相色谱串联质谱法鉴定皮革的动物源属性被引量：3
- 2022年
- 基于猪牛羊皮的特征肽段建立了一种鉴定皮革动物源属性的超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)。皮革样品经高温高压提取蛋白,酶解消化,收集多肽待测溶液,经C_(18)柱分离,以0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相梯度洗脱,通过多反应监测(MRM)扫描,从多肽溶液中特征肽段的出峰情况来鉴定皮革样品的动物源属性。所建立的方法特异性强,适用范围广,准确可靠,为皮革鉴定提供了新的技术手段。
- 杜业刚刘奕雄王韦达朱雨田郑燕燕
- 关键词：皮革液相色谱-串联质谱
- 小牛肠碱性磷酸酶活性检测方法的建立
- 2014年
- [目的]建立适用于科研用小牛肠碱性磷酸酶活性的检测方法。[方法]通过模拟科研中小牛肠碱性磷酸酶的使用条件及缓冲液，并研究不同底物浓度、反应时间、显色时间、缓冲液pH等对酶活性检测的影响。[结果]使用不同缓冲液对酶活性进行检测，其测量值差异较大。若使用添加硼酸的铁氰化钾溶液，则可以实现颜色的稳定显示。最佳水浴时间为10min，最佳底物浓度为0．04mol／L。随着温度的增加，对低浓度酶活性的影响不大，但对高浓度酶活性的影响逐渐增大。当缓冲液pH为7．O～8．0时，能够较好维持酶活性的稳定性。缓冲液粒子强度对酶活性的影响不大。[结论]成功建立了科研用小牛肠碱性磷酸酶的活性检测方法。
- 赖晓芳林霖李意刘奕雄兰全学赖心田杨国武
- 关键词：碱性磷酸酶活性检测紫外分光光度法
- 液相色谱串联质谱法测定牛肉制品中猪肉含量
- 2021年
- 建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定牛肉制品中猪肉含量的方法。样品经蛋白提取、酶解等前处理后,在0.1%甲酸水和乙腈的梯度洗脱下经C18色谱柱分离,多反应监测模式采集质谱数据进行定量分析,线性回归系数>0.999,方法定量限低至0.5%(w:w),回收率89.6%~109%,相对标准偏差低于10%。
- 杜业刚刘奕雄李星星孙林王韦达刘文丽杨国武
- 关键词：液相色谱-串联质谱牛肉生物标志物
- 基于特征肽段的液相色谱-质谱技术鉴定胶原蛋白的物种来源被引量：9
- 2018年
- 建立了一种基于特征肽段的液相色谱-质谱技术鉴定胶原蛋白物种来源的方法。样品经蛋白提取,还原,烷基化,胰蛋白酶消化后,采用Eksigent C18色谱柱(75μm×150 mm,3μm)分离,用流动相0. 1%甲酸水-乙腈溶液(98∶2)和0. 1%甲酸乙腈-水溶液(98∶2)梯度洗脱,在正离子模式下,通过纳升电喷雾四极杆飞行时间质谱进行检测,数据经Protein PilotTM软件及blast分析,筛选出潜在的特征肽段。消化后的样品再采用Eclipse Plus C18色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 8μm)分离,用流动相乙腈和1%甲酸水溶液梯度洗脱,在正离子模式下,通过电喷雾四极杆/线性离子阱串联质谱的多反应监测触发增强子离子扫描模式进行检测,进一步确认肽段的特异性。最终筛选并确证了3种猪源性胶原蛋白特征肽段,4种牛源性胶原蛋白特征肽段,1种羊源性胶原蛋白特征肽段。所筛选的特征肽段具有良好的耐热性,可为动物源性胶原蛋白鉴定提供一种特异性强、准确可靠的检测方法。
- 阳洪波王韦达王韦达李意刘奕雄杜业刚杜业刚
- 关键词：胶原蛋白液相色谱-质谱
- 液相色谱串联质谱法鉴定虾中外源性成分被引量：2
- 2019年
- 建立一种基于特征肽段鉴别虾肉中猪皮源和牛皮源明胶的液相色谱-质谱方法。从猪皮、牛皮中提取蛋白,酶解处理后,利用纳升液相色谱-飞行时间质谱进行检测。数据经Protein PilotTM软件结合Uniprot数据库分析,BLAST搜索对比,筛选出潜在特征肽段。根据Skyline软件构建的离子对,用超高效液相色谱-三重四极杆质谱的多反应监测(MRM)模式对明胶进行验证,表明选择的2条猪皮源和2条牛皮源特征肽段皆具有很强的特异性。利用所建立的MRM质谱方法对200批次的虾进行检测,结果未检出猪皮源和牛皮源成分。
- 刘奕雄李意阳洪波王韦达李碧芳杜业刚
- 关键词：明胶质谱
- 酒店海产品与养殖池水中26种药物残留分析被引量：2
- 2013年
- 分析酒店鲜活海产品与养殖池水中孔雀石绿和26种抗生素残留的关联性,为查找海产品中抗生素残留的污染源头,提高产品质量提供技术依据。在酒店采集鲜活海产品及其对应的养殖池水,采用液相色谱串联质谱联法检测样品中的孔雀石绿和26种抗生素,对检测结果进行关联性分析。养殖池水中孔雀石绿和抗生素总体含量水平很低,没有在海产品与养殖池水中检出相同的药物残留,海产品与养殖池水中孔雀石绿和抗生素没有关联性。酒店鲜活海产品孔雀石绿和抗生素污染不是来自酒店的养殖池水,主要是来自海产品养殖过程。
- 杜业刚邓武剑刘奕雄陈亿展杨国武李碧芳
- 关键词：海产品药物残留关联性分析
- 液相色谱质谱法测定豆腐中74种抗生素残留
- 2021年
- 建立一种同时检测豆腐中74种抗生素的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)高通量方法。豆腐样品采用Na2EDTA-Mcllvain缓冲液提取后,经亲水亲脂平衡固相萃取柱(PEP)净化,氮吹浓缩复溶后,以0.1%甲酸水和乙腈为流动相,C18柱分离,多反应离子监测(MRM)进行检测,基质工作曲线外标法定量。74种抗生素在0~100μg/kg范围内呈良好的线性关系,线性相关系数均大于0.999,回收率介于73.5%至115.0%之间,相对标准偏差小于15%。该方法快速简便,准确性好,高通量的方法能对豆腐中抗生素的情况进行更全面的监测分析。
- 杜业刚吴益淳张斌刘奕雄刘文丽张世伟朱雨田郑燕燕
- 关键词：豆腐
- 自动固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定暂养水中45种抗生素药物的含量
- 2023年
- 提出了自动固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法(SPE-UPLC-MS/MS)同时测定水产品暂养水中45种抗生素药物含量的方法,包括4种四环素类、3种氯霉素类、15种喹诺酮类、17种磺胺类、4种呋喃类、孔雀石绿及隐色孔雀石绿。取40.0 mL暂养水,与10 mL乙二胺四乙酸二钠(Na_(2)EDTA)-Mcllvaine缓冲溶液混匀,加入0.05 mL混合内标溶液(其中氘代喹诺酮类、氘代磺胺类的质量浓度为1.00 mg·L^(-1),氘代孔雀石绿、氘代隐色孔雀石绿、氘代氯霉素类的质量浓度为100μg·L^(-1))。上述溶液用0.1 mol·L^(-1)盐酸溶液调节至pH 4,过HLB固相萃取柱(预先用3 mL甲醇、3 mL水活化),以2 mL水淋洗,用6 mL甲醇洗脱,收集洗脱液,于40℃氮吹至近干,用1.00 mL 20%(体积分数)甲醇溶液溶解残渣,经0.22μm滤膜过滤。滤液采用Agilent Eclipse Plus C_(18)RRHD色谱柱分离,以不同体积比的甲醇和0.1%(体积分数)甲酸溶液混合液为流动相进行梯度洗脱,以多反应监测(MRM)模式进行定性与定量分析。结果表明,氯霉素类和孔雀石绿工作曲线的线性范围为0.200~20.0μg·L^(-1),测定下限为5.0 ng·L^(-1);其他抗生素药物工作曲线的线性范围为1.00~100μg·L^(-1),测定下限为25 ng·L^(-1)。按照标准加入法进行回收试验,回收率为61.6%~115%,测定值的相对标准偏差(n=6)均小于9.0%。
- 刘奕雄张凯旋朱雨田李意冯玉桢袁定帅赵博扬杜业刚
- 关键词：超高效液相色谱-串联质谱法抗生素孔雀石绿
