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青蒿鲨烯合酶基因的克隆、结构分析与大肠杆菌表达(英文)被引量：6: 2003年; 用RT PCR方法从青蒿 (ArtemisiaannuaL .)中克隆了一个 15 39bp全长鲨烯合酶cDNA。青蒿鲨烯合酶氨基酸序列与拟南芥、烟草、人类、酵母鲨烯合酶的一致性分别为 70 %、77%、4 4 %和 39%。青蒿鲨烯合酶基因组DNA结构很复杂 ,包括 14个外显子和 13个内含子。全长的或C末端截短的鲨烯合酶cDNA被克隆进原核表达载体pET30a并在大肠杆菌 (Escherichiacoli)BL2 1(DE3)中诱导表达。但在含有全长的鲨烯合酶cDNA的大肠杆菌中并没有观察到预期大小的鲨烯合酶表达 ,而C末端截短疏水区; 刘彦叶和春王红李国凤; 关键词：青蒿鲨烯合酶大肠杆菌基因结构克隆

优系青蒿法呢基焦磷酸合酶基因的克隆和酶学分析被引量：12: 2003年; 从青蒿(Artemisia annua L)高产株系025的cDNA文库中克隆到了一个编码青蒿法呢基焦磷酸合酶(AaFPSl)的cDNA(afl).序列分析表明,这一cDNA编码一个含343个氧基酸残基的蛋白质,分子量为39kD.推导出的氯基酸序列与来自其他植物、哺乳动物及酵母的FPS相似,也包含异戊烯基转移酶和聚异戊烯基合酶所共有的5个保守域.此cDNA在大肠杆菌中的表达产物表现出明显的FPS酶学活性.通过离子交换层析纯化后,进一步测定了其酶学动力学.上述结果将进一步推动青蒿素生物合成分子调控的研究.; 赵玉军叶和春叶和春李国风陈大华; 关键词：热病抗疟药物酶学分析

植物类异戊二烯代谢途径的分子生物学研究进展被引量：104: 2000年; New advances in molecular biology of plant secondary metabolic pathway were summarized. The biosynthesis of artemisinin was used as an example, combined with the research work in the authors’ laboratory. Some new ways for producing plant secondary metabolites were proposed.; 陈大华叶和春李国凤刘彦; 关键词：次生代谢分子调控 HMGR

马铃薯HMGR基因的克隆、序列分析及其表达特征被引量：16: 2000年; 采用RT_PCR技术 ,从马铃薯 (SolanumtuberosumL .)幼叶中克隆了一个约 1.0kb的cDNA片段 ,序列分析结果表明 ,该cDNA与已报道的马铃薯HMGR基因家族的三种类型基因具有较高核酸序列同源性 ,与HMGRⅠ基因同源性为 77.0 % ,HMGRⅡ基因为 93.2 % ,HMGRⅢ基因为 77.1%。其中 3′端非翻译区序列与HMGRⅠ、HMGRⅡ、HMGRⅢ三种基因同源性分别为 5 0 .2 %、80 .3%和 5 0 .7% ,因此推测该cDNA片段为HMGR基因家族中HMGRⅡ亚基因家族新发现的成员之一 ,命名为HMGR_c2。以特异探针进行的Southern杂交结果初步证明 ,HMGR_c2基因至少以两个以上拷贝形式存在于马铃薯基因组中 ;Northern杂交分析表明 ,HMGR_c2基因的全长mRNA约为 2 .0kb。定量RT_PCR分析表明 ,HMGR_c2基因在根、茎、叶等组织中均有表达 ,且在叶片表达量最高 ,约为根、茎的两倍。; 陈大华叶和春李国凤刘彦; 关键词：马铃薯

一个新高产青蒿倍半萜合酶基因的克隆、表达和分析(英文)被引量：3: 2002年; 用RACE方法从青蒿 (ArtemisiaannuaL .)高产株系 0 0 1中克隆了一个新的 1886bp的全长倍半萜合酶cDNA。克隆的倍半萜合酶氨基酸序列与烟草马兜铃烯合酶、莨菪岩兰螺旋二烯合酶、棉花杜松烯合酶的一致性分别为 39%、38%和 4 1% ;与青蒿柏木脑合酶、紫穗槐二烯合酶和一个推测的倍半萜合酶克隆cASC12 5的一致性为5 0 %、4 8%和 5 9%。cDNA编码区序列被克隆进原核表达载体pET_30a,并在大肠杆菌 (Escherichiacoli)BL2 1(DE3)中诱导表达 ,但过量表达的蛋白主要是以不溶性蛋白形式存在。Northernblotting分析表明此基因在茎、叶和花中表达 ,在根中没有表达。; 刘彦叶和春李国凤; 关键词：青蒿克隆

青蒿素生物合成相关基因的克隆、大肠杆菌表达与分子分析: 利用现代分子生物学和基因工程技术手段,克隆青蒿素生成途径的关键酶基因,研究关键酶基因对青蒿素生物合成的调控规律,是打破青蒿素生物合成的限速步骤,大幅度提高青蒿素含量,最终达到利用植物生物技术工业化生产青蒿素的目的必须解决...; 刘彦; 关键词：青蒿素生物合成相关基因分子克隆分子分析; 文献传递

大规模细胞培养生产青蒿素: 叶和春李国凤王红刘本叶逯春明陈大华刘彦耿飒王玉春陈建林张龙; 该课题研究了不同基因型青蒿中青蒿素的含量，旨在客服遗传不稳定问题。获得转异源FPS基因和Cad基因的高产发根系；获得转异源FPS基因的青蒿F-73高产株系；建立了转基因植株丛生芽克隆和规模化生产技术系统；研制了新型发根生...; 关键词：; 关键词：青蒿素青蒿细胞培养

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刘彦