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刘晓雯

作品数：10 被引量：14H指数：2
供职机构：山东大学附属省立医院更多>>
发文基金：山东省自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 9篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 8篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 8篇细胞
  • 3篇单核
  • 3篇蛋白
  • 3篇基因
  • 2篇单核细胞
  • 2篇增殖
  • 2篇真核
  • 2篇真核表达
  • 2篇肾肿瘤
  • 2篇肿瘤
  • 2篇核表达
  • 2篇核细胞
  • 2篇高迁移率族蛋...
  • 2篇癌细胞
  • 2篇HMGB1
  • 1篇单核巨噬细胞
  • 1篇蛋白纯化
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇蛋白质复性
  • 1篇雄激素

机构

  • 10篇山东大学
  • 3篇山东省医学科...
  • 1篇济南大学
  • 1篇聊城市人民医...

作者

  • 10篇刘晓雯
  • 7篇赵跃然
  • 5篇崔彬
  • 5篇焦玉莲
  • 5篇徐洁
  • 4篇曲芸芸
  • 4篇孙新平
  • 4篇朱敏
  • 3篇刘帅
  • 3篇刘征
  • 2篇牛志宏
  • 2篇吕家驹
  • 2篇张捷
  • 1篇张辉
  • 1篇金炎
  • 1篇傅强
  • 1篇种宗雷
  • 1篇毕东滨
  • 1篇王来城
  • 1篇赵雪

传媒

  • 4篇山东大学学报...
  • 1篇山东医药
  • 1篇中华泌尿外科...
  • 1篇中华实验外科...
  • 1篇细胞与分子免...
  • 1篇中国当代医药

年份

  • 1篇2016
  • 1篇2015
  • 2篇2012
  • 1篇2011
  • 2篇2010
  • 2篇2009
  • 1篇2008
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
重组人HMGB1 A box的表达纯化及对单核细胞的抑制作用被引量：2
2010年
目的:克隆人高迁移率族B1Abox(HMGB1 A box)基因,构建高效稳定的大肠杆菌(E.coli)表达菌株,并探讨其对免疫复合物(IC)刺激单核细胞活化的抑制作用。方法:根据本室优化合成的HMGB1基因序列设计引物,PCR扩增目的基因片段并插入克隆载体pMD19-T,菌落PCR、酶谱分析及DNA测序鉴定阳性克隆。重组克隆载体经NdeⅠ和XhoⅠ酶切,琼脂糖凝胶电泳分离目的基因,插入表达载体pQE-T7-2的相应位点,菌落PCR鉴定重组表达载体。重组菌株经IT-PG诱导,SDS-PAGE分析及Western blot鉴定重组蛋白。Ni2+-NTA层析柱纯化重组人HMGB1 A box,RT-PCR检测其对IC刺激单核细胞活化的抑制作用。结果:获得重组人HMGB1 A box的表达菌株,目的蛋白占菌体总蛋白的40%左右。Western blot显示重组蛋白能与抗人HMGB1多克隆抗体和抗His-Tag多克隆抗体特异反应。目的蛋白纯度高达90%以上,并能有效抑制IC诱导单核细胞分泌BAFF、IFN-γ及TNF-α。结论:成功构建了重组人HMGB1 A Box的表达载体,纯化的重组蛋白能有效抑制IC刺激单核细胞活化后细胞因子的分泌。
朱敏崔彬焦玉莲王来城曲芸芸孙新平刘晓雯徐洁赵跃然
关键词：BOX活性测定
人NKp30基因克隆及其真核表达载体的构建
2008年
目的对人NKp30(hNKp30)进行基因克隆并在大肠埃希菌中重组表达,为进一步研究NK细胞抗肿瘤作用奠定基础。方法提取人外周静脉血单个核细胞,分离纯化外周血总RNA。用PCR扩增hNKp30片段,克隆至质粒载体pMD18-T,对克隆的DNA片段行序列分析。用限制酶XhoI、EcoRI消化pMD18-T-hNKp30重组质粒,分离hNKp30片段,插入真核表达载体pIRES2-EGFP相应限制酶位点,酶谱分析鉴定重组表达载体pIRES2-EG-FP-hNKp30,并转染COS-7细胞。结果PCR扩增DNA片段与hNKp30 cDNA大小一致。重组质粒pMD18-T-hNKp30的DNA序列分析显示,克隆DNA序列与文献报道hNKp30的cDNA序列一致。重组表达质粒pIRES2-EGFP-hNKp30转染COS-7细胞后,实现了hNKp30基因在COS-7细胞中的体外转染及瞬时表达。结论采用重组技术成功构建了hNKp30真核表达载体,为探讨NK细胞受体的特性及其信号转导机制奠定了基础。
金炎赵雪刘晓雯徐洁王勇赵跃然
关键词：杀伤细胞真核表达转染基因重组
FK506结合蛋白51在脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义被引量：1
2016年
目的 探讨FK506结合蛋白51（FKBP51）在脑胶质细胞瘤组织中的表达及其临床意义。方法 选取本院2013年1月～2015年1月的223例脑胶质瘤患者作为研究对象,选取同期来自于颅脑损伤手术患者的23例正常脑组织进行对照研究。采用免疫组织化学法检测FKBP51的表达水平,分析其表达水平与脑胶质瘤病理组织类型和病理分级的关系。结果 脑胶质瘤的FKBP51阳性率显著高于正常脑组织,差异有统计学意义（P〈0.05）。不同病理类型脑胶质瘤组织的FKBP51阳性率比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。恶性的胶质母细胞瘤FKBP51的表达水平显著高于良性的星形细胞瘤,差异有统计学意义（P〈0.05）。FKBP51的表达水平与脑胶质瘤分级呈正相关（r=0.30,P〈0.05）。结论 FKBP51表达与脑胶质瘤的病理类型和临床病理分级具有相关性,有可能作为脑胶质瘤标志物用于临床病理特征分析和预后判断。
郝瑜刘晓雯董竟崔彬焦玉莲周隆善种宗雷赵跃然
关键词：脑胶质瘤病理分级
他克莫司结合蛋白51在前列腺癌细胞雄激素非依赖性转化过程中的作用被引量：1
2015年
目的观察他克莫司（FK506）结合蛋白（FKBP51）在前列腺癌细胞（LNCaP）激素非依赖性转变过程中的作用。方法LNCaP细胞采用激素递减法诱导激素非依赖性前列腺癌细胞（LNCaP．AI），Westernblot检测雄激素受体（AR）、前列腺特异抗原（PSA）、FKBP51及蛋白激酶B（Akt）的表达水平。结果在雄激素非依赖转化过程中，雄激素受体亚型发生逆转，AR—A／AR—B比值在LNCaP中为1．75，而在去激素培养9d及LNCaP-A1分别为0．08和0．13，与LNCaP的差异均有统计学意义（P〈0．01）。PSA表达水平在转化过程中呈现先降低后升高的趋势。FKBP51及其相关Akt信号通路水平在无雄激素培养9d后，表达水平显著升高（P〈0．05），而最终回落至LNCaP水平。结论FKBP51可能参与调节LNCaP细胞雄激素非依赖性转变过程中AR—B／A亚型逆转。
刘征刘帅刘晓雯傅强
关键词：前列腺癌雄激素受体
人HMGB1真核表达载体的构建及其在单核细胞的表达
2009年
目的构建人高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达载体,并探讨其免疫调节作用。方法从HMGB1克隆载体酶切分离HMGB1基因片段,插入增强型绿色荧光蛋白载体pCITE-EGFP,菌落PCR和酶谱分析鉴定重组载体。重组表达质粒转染人单核细胞系(U937),梯度G418筛选,荧光和Western blot检测HMGB1的表达。结果菌落PCR和酶谱分析显示目的基因被正确插入真核表达载体,获得重组质粒pCITE-EGFP-HMGB1,转染U937细胞随培养基中G418浓度的升高而增强,转染细胞中目的蛋白HMGB1表达量明显升高。结论成功构建重组载体pCITE-EGFP-HMGB1,并获得稳定表达人HMGB1的单核细胞系,为研究HMGB1对单核巨噬细胞的作用及其机制奠定基础。
徐洁崔彬焦玉莲游力张捷刘晓雯曲芸芸朱敏孙新平赵跃然
关键词：高迁移率族蛋白质类真核细胞单核细胞
肾母细胞瘤过表达基因对肾癌细胞的作用
2012年
目的探讨肾母细胞瘤过表达（nephroblastomaoverexpressed，NOV）基因对肾癌细胞增殖、黏附、侵袭和迁移能力的影响。方法构建NOV蛋白表达真核细胞重组表达质粒pEGFP—C1-NOV，转染人肾癌细胞株786—0。通过计数细胞绘制生长曲线、水溶性四氮唑法（WST-1）检测细胞生长抑制率，通过细胞黏附实验、侵袭实验和细胞迁移实验，比较转染pEGFP—C1-NOV组（实验组）与转染空载体组（空载组）及未转染组（空白组）的细胞增殖、黏附、侵袭和迁移能力的差异。结果与空白组比较，实验组48、72h抑制率分别为29．14％、32．46％，空载组分别为9．25％和-8．16％，实验组与空白组比较差异有统计学意义（P〈0．05），空载组与空白组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。与层粘连蛋白黏附，实验组A值为0．26±0．03，高于空白组（0．15±0．01）和空载组（0．14±0．02），差异有统计学意义（P〈0．05）；与人纤维连接蛋白黏附，实验组A值为0．28±0．04，高于空白组（0．124±0．095）和空载组（0．128±0．082），差异有统计学意义（P〈0．05）。实验组穿越Matrigel基质胶的细胞数为240．25±23．12，显著高于空白组（56．16±6．25）和空载组（50．28±7．13），差异有统计学意义（P〈0．05）；实验组迁移通过聚碳酸酯微孔滤膜的细胞数为267．25±20．94，显著高于空白组（66．10±5．68）和空载组（56．28±4．11），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论NOV可抑制。肾癌细胞的增殖，促进。肾癌细胞786—0的黏附、侵袭和迁移。
牛志宏刘帅毕东滨刘征刘晓雯袁晓东吕家驹
关键词：肾肿瘤增殖
免疫复合物对单核巨噬细胞的调节作用被引量：8
2010年
目的研究免疫复合物对单核巨噬细胞的增殖、细胞因子的分泌及吞噬功能的调节作用。方法免疫复合物组:细胞坏死上清+系统性红斑狼疮(SLE)患者血清;对照组有5组:坏死上清+正常人血清组、坏死上清组、SLE血清组、正常人血清组和培养基组,以上分别作用于U937细胞和U937细胞诱导产生的巨噬细胞。24h后,用CCK-8法检测U937细胞的增殖,RT-PCR法检测U937细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)和B细胞活化因子(BAFF)的变化,中性红比色法检测诱导产生的巨噬细胞的吞噬功能。结果与对照组相比,免疫复合物能明显促进U937细胞的增殖(P<0.05),TNF-α和BAFF的mRNA表达水平明显增加(P<0.05),并明显抑制巨噬细胞的吞噬功能(P<0.05)。结论在免疫复合物作用下,单核巨噬细胞系统(MPS)处于异常活化状态,使免疫复合物的形成增多而清除减少,从而参与了SLE的发生发展。
曲芸芸马春燕朱敏刘晓雯孙新平徐洁赵跃然
关键词：红斑狼疮免疫复合物单核巨噬细胞增殖分泌
重组人可溶性突变体BAFF蛋白的制备及生物学活性的鉴定被引量：1
2012年
目的制备高纯度的B细胞活化因子(BAFF)可溶性突变体(smBAFF)蛋白,鉴定其生物学活性。方法重组原核表达载体pET41a/smBAFF在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达smBAFF蛋白,采用SDS-PAGE和Western blot检测表达产物,超声碎菌,提取包涵体,Ni2+-NTA亲和层析纯化,复性,鉴定其生物学活性。结果经鉴定表达出相对分子质量为1.7×104的外源蛋白smBAFF,经Ni2+-NTA亲和层析纯化出该重组蛋白,复性后的smBAFF与B细胞具有较高的亲和力,但失去共刺激B细胞增殖的能力,且能竞争性抑制天然sBAFF的作用。结论成功制备具有B细胞结合活性而失去刺激B细胞增殖活性的smBAFF,为以smBAFF为靶向载体在B细胞恶性增殖性和异常活化性疾病治疗研究奠定基础。
李鸿昌焦玉莲崔彬刘晓雯卢冰如孙文萍孙亚方刘相东赵跃然
关键词：B细胞活化因子原核细胞包涵体蛋白质复性
NOV基因对肾透明细胞癌细胞MMP表达的影响被引量：1
2011年
目的探讨肾母细胞瘤过表达基因(NOV)对肾透明细胞癌细胞基质金属蛋白酶(MMP)表达的影响。方法构建NOV蛋白表达真核细胞重组表达质粒pEGFP-C1-NOV,转染人肾癌细胞株786-O。通过实时定量RT-PCR的方法定量转染pEGFP-C1-NOV细胞(实验组)、转染空载体细胞(空载组)和未转染的786-O细胞(空白组)的基质金属蛋白酶(MMP)亚型(包括MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MMP-13)的表达水平。方差分析法比较实验组与空载组及空白组各MMP亚型表达水平的差异。结果实验组与空白组和空载组比较,MMP-1、MMP-3和MMP-13表达水平升高(P<0.05),而MMP-2和MMP-7的表达水平下降(P<0.05)。实验组MMP-9的表达水平与空白组和空载组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NOV可调节肾透明细胞癌细胞MMP的表达,NOV对MMP的调节可能是NOV发挥功能的机制之一。
牛志宏张辉刘帅刘征刘晓雯吕家驹
关键词：肾肿瘤基质金属蛋白酶
人高迁移率族蛋白B1 Abox的基因合成及其在大肠杆菌中的表达
目的:克隆人高迁移率族蛋白B1 Abox（human HMGB1 ABOX）基因,构建高效稳定的大肠杆菌表达菌株。方法:根据GenBank报道的人HMGB1 ABOX基因序列,对其基因序列进行优化,按照优化后的基因序列设...
朱敏焦玉莲王来成张捷崔彬曲芸芸刘晓雯徐洁孙新平高学军赵跃然
关键词：BL21蛋白纯化
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